ヒト癌細胞株によるリンパ行性自然転移モデルの確立とリンパ行性転移関連遺伝子の解析

人癌细胞系淋巴自发转移模型的建立及淋巴转移相关基因分析

• 批准号: 11139280
• 负责人: 小崎 健一
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11139280/
• 关键词: 癌浸潤・転移; リンパ行性転移; リンバ節転移; マウス皮下移植自然転移モデル; cyclooxygenase2

我々はヒト癌転移の臨床病態において予後との相関から明らかであるリンパ節転移に着目し、リンパ節を選択的な転移先臓器の一つと考えてリンパ行性転移モデルの確立を進め、ヒト非小細胞性肺癌細胞株(大細胞癌)NCI-H460を用いたin vivo selectionによって、マウス皮下移植により所属リンパ節へ確実に短期間で自然転移するリンパ行性転移亜株NCI-H460-LNM35(LNM35)を樹立した。本研究において、マトリックス分解酵素やその特異的阻害因子、癌関連糖鎖抗原、細胞接着分子群などの既報の転移関連分子について検討したところ、LNM35と親株NCI-H460の両細胞株間における発現レベルでの差を認めなかったが、cyclooxygenase2(COX-2)の発現がLNM35で有意に増大していることを見出した。COX-2選択的阻害剤nimesulideが内服時に血中到達可能な濃度とほぼ同じ低濃度でLNM35のin vitro細胞運動能と浸潤能を強く抑制し得ることから、ヒト肺癌の浸潤・転移過程にCOX-2が関与している可能性が強く示唆された。また、本研究の目的は未だ明らかではないリンパ行性転移の分子機序の解明と関連遺伝子群の単離・同定にあるが、目的達成の基盤として、多因子が関与する複雑な転移プロセスの全体像の把握すべく、低転移性リバータントクローンの樹立を試みた。転移形質に関連する遺伝子群の発現におけるメチル化の関与を想定して、LNM35をメチル化阻害剤で処理し、複数の低転移性リバータントクローンの樹立に成功した。現在、リンパ行性転移関連遺伝子群の単離・同定を目指して、これらのリバータントクローンとLNM35間の遺伝子発現について、macroarrayやmicroarrayを用いた網羅的比較・検討を進めつつある。今後は、発現バランスの変化に基づいた遺伝子群のパターン化を進めることによって、質的に有意なリンパ行性転移関連遺伝子群を選別・濃縮し、得られた各転移関連遺伝子について、LNM35のin vitro実験系とin vivo皮下移植自然転移モデル系を用いた詳細な解析によって転移促進遺伝子あるいは抑制遺伝子の機能的確認を試みる予定である。

A study on the clinical pathology of cancer metastasis and its correlation with the development of NCI-H460 in vivo selection Subcutaneous transplantation of NCI-H460-LNM35(LNM35) was carried out naturally in a short period of time. In this study, we identified the differences in the expression of cytoxygenase 2 (COX-2) between LNM35 and its parent NCI-H460 cell lines, and the intentional increase in the expression of cytoxygenase 2(COX-2) in LNM35. COX-2 selective inhibitor nimesulide can be reached in the blood at low concentrations and can inhibit the motility and infiltration of LNM35 cells in vitro. COX-2 can be involved in the infiltration and migration of lung cancer. Therefore, the objective of this study is to clarify the molecular sequence of the molecular shift in the middle and lower mobility, and to establish the molecular shift in the middle and lower mobility. The LNM35 is designed to deal with all kinds of chemical barriers, and the establishment of multiple low mobility clusters is successful. Now, the characteristics of migration related genetic groups are different, and the characteristics of migration related genetic groups are different, and the characteristics of migration related genetic groups are different, and the characteristics of migration related genetic groups are different, and the characteristics of migration related genetic groups are different. In the future, we will select, concentrate, and obtain all the migration related gene groups for the transformation of LNM35 in vitro system and in vivo natural migration system, and make a detailed analysis of the migration promotion gene groups and confirm the function of the inhibition gene groups.

项目成果

Tsukamoto,T., et al.: "Development and distribution of 2-Amino-1-methyl-6-phenylimidazo [4,5-b]pyridine (PhIP) induced aberrant crypt foci in the rat large intestine."Jpn.J.Cancer Res.. 90. 720-725 (1999)

Tsukamoto,T. 等人：“2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4,5-b]吡啶 (PhIP) 诱导大鼠大肠异常隐窝病灶的发育和分布。”Jpn.J

Achiwa, H., et al.: "Prognostic significance of elevated cyclooxygenase 2 expression in primary, resected lung adenocarcinomas"Clin. Cancer Res.. 5. 1001-1005 (1999)

Achiwa, H. 等人：“原发性切除肺腺癌中环氧合酶 2 表达升高的预后意义”Clin。

Hida, T., et al.: "Cyclooxygenase (COX)-2 inhibitor induces apoptosis and enhances cytotoxicity of various anticancer agents in non-small cell lung cancer cell lines"Clin. Cancer Res.. (in press).

Hida, T., 等人：“环氧合酶 (COX)-2 抑制剂在非小细胞肺癌细胞系中诱导细胞凋亡并增强各种抗癌药物的细胞毒性”Clin。

Kozaki, K., et al.: "Establishment and characterization of a human lung cancer cell line NCL-H460-LNM35 with consistent lymphogenous metastasis via both subcutaneous and orthotopic propagation"Cancer Res.. (in press).

Kozaki, K. 等人：“通过皮下和原位传播具有一致淋巴转移的人肺癌细胞系 NCL-H460-LNM35 的建立和表征”Cancer Res..（出版中）。