癌病態特異的microRNAの統合的スクリーニングと核酸医薬への応用

癌症病理特异性microRNA整合筛选及其在核酸医学中的应用

• 批准号: 26293067
• 负责人: 小崎 健一
• 金额: $ 9.82万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014 至 2016
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26293067/
• 关键词: 発現制御; 癌; microRNA

本研究では、機能性低分子RNAとしてゲノム情報発現系内在性制御機序を担うmicroRNA(miRNA)による癌個別化医療の実現を目指して、様々な癌病態において特異的にgain-of-functionあるいは、loss-of-functionをきたす癌病態特異的miRNAを同定すべく、独自のin vitro/in vivo癌病態モデル系等における統合的スクリーニングを行ってきた。発癌から悪性形質獲得に至る連続的な癌病態の変化や発現異常の時空間的変化に着目したオミックス統合解析、さらに、癌病態特異的miRNAと標的遺伝子の分子機序の詳細な解明から核酸医薬としての可能性の検討までを一貫して実施する本研究の成果は、癌miRNA創薬による癌治療体系の確立等に貢献しうると考えられる。本研究では、初年度(平成26年度)より癌における上皮-間葉転換(EMT)異常との関連性が報告されている上皮系ならびに間葉系マーカー遺伝子として知られるE-カドヘリン(CDH1)ならびにビメンチン(VIM)等のプロモーター配列をgenomic PCR法により単離、それらの配列における転写活性を確認し、平成27年度にかけて単離したプロモーター領域を蛍光レポーター系ベクターへ組み込んだgPADシステムの作成・検証を行ってきた。CDH1/gPADについては、gPADシステムの創薬における有用性を先行研究である独自のcell-based reporter system(CBRS)によるmicroRNA(miRNA)の機能的スクリーニング系によって明らかにし(Harazono, Y, et al, PLOS ONE, 2013), in vitro/in vivo癌病態モデル系への応用を進めつつある。VIM/gPADでの機能的スクリーニング系では、新規癌EMT誘導性miRNAであるmiRNA-544aとその直接的標的分子CDHとAXIN2を同定し、miR-544aがTGF-β経路ならびにWNT経路を活性化してEMTを促進させることを報告した(Yanaka Y, et al, Carcinogenesis, 2015)。最終年度である平成28年度は、既報の癌浸潤・転移関連マーカー遺伝子の中でも細胞外マトリックス分解酵素であるMMP-9による独自のin vitro/in vivo癌病態イメージング・モデル系の確立に着手した。具体的には、マウス大腸癌細胞株colon26を用いたin vitro浸潤/in vivo転移モデル系へ、MMP-9/gPADシステムを遺伝子導入し、MMP-9遺伝子活性を指標とした独自のin vitro/in vivo癌病態イメージング・モデル系を確立した。

In this study, the functional and functional low molecular weight RNA antigens were identified in the internal sex control machine, microRNA (miRNA), gain-of-function, gain-of-function, and miRNA, respectively. The symptoms of in vitro/in vivo cancer alone are caused by the combination of diseases, such as those of other diseases. The molecular sequence analysis of the molecular sequence of miRNA patients with specific symptoms of cancer, the possibility of nucleic acid therapy, the possibility of DNA therapy, the results of this study, the results of this study, the results of this study. The cancer miRNA treatment system is established, and so on. In this study, in the first year of this study (Pingcheng 26), we reported that the epithelial cells were linked to the epithelium (EMT). The epitheliums were linked to the epithelium. the epitheliums were isolated from the epithelium. the results showed that the genomic PCR method was used to isolate and isolate the epithelium (CDH1), the epithelium (VIM) and so on. In order to ensure that the writing activity is confirmed, it is necessary to make sure that there are significant differences in the field of light production in the field in the year 27. The system of the system is that the gPAD system is designed to improve the performance of the system. In the study of the usefulness of CDH1/gPAD (CBRS) and Harazono (Harazono, Y, et al, PLOS ONE, 2013), the clinical data of microRNA (miRNA) alone were analyzed in this paper. The pathological features of in vitro/in vivo cancer were analyzed by Elisa. The molecular structure of VIM/gPAD is sensitive to miRNA-544a, the molecular CDH of miRNA-544a is directly linked to miRNA of cancer, and the miR-544a of TGF- β pathway induces the activation of WNT pathway. EMT promotes the development of cancer report (Yanaka Y, et al, Carcinogenesis, 2015). In the most recent year of Pingcheng 28, we have made sure that we have set our hands on the status of in vitro/in vivo cancer alone, including extracellular enzymes, etc. The specific cancer cell line colon26 was immersed with in vitro immersion

项目成果

新しいCell-based reporter systemのin vivoイメージングと創薬の試み

使用新的细胞报告系统进行体内成像和药物发现试验

• 发表时间: 2016
• 作者: 十川千春;奥舎有加;十川紀夫;大山和美;江口傑徳;小崎健一
• 通讯作者: 小崎健一

核酸医薬への応用を目指した癌関連microRNAの統合的スクリーニング

癌症相关microRNA的综合筛选及其在核酸医学中的应用

• 发表时间: 2015
• 期刊: 岡山歯学会雑誌
• 作者: 2. Fujiwara N;Inoue J;Kawano T;Tanimoto K;Kozaki K;Inazawa J;坂本純二;小崎健一
• 通讯作者: 小崎健一

MicroRNA-634 induces caspase-dependent apoptosis by targeting anti-apopotic and mitochondria-related genes in human cancer cells.

MicroRNA-634 通过靶向人类癌细胞中的抗凋亡和线粒体相关基因来诱导 caspase 依赖性凋亡。

• 发表时间: 2014
• 作者: Fujiwara N.;Inoue J.;Kawano T.;Kozaki K. and Inazawa J.
• 通讯作者: Kozaki K. and Inazawa J.

Genome-wide screening of DNA methylation markers to predict the presence of lymph node metastasis in esophageal squamous cell carcinoma

全基因组筛查 DNA 甲基化标记物以预测食管鳞状细胞癌淋巴结转移的存在

• 发表时间: 2014
• 作者: Ken-ichi Kozaki;Hiroaki Nagata;Kousuke Tanimoto;Naoto Fujiwara;Seiya Imoto;Daisuke Ichikawa;Satoru Miyano;Tatsuyuki Kawano;Eigo Otsuji;Johji Inazawa
• 通讯作者: Johji Inazawa

Exploring target gene(s) within chromosome 19-amplification detected in a subclone from metastatic tumors in mouse transplantable OSCC

探索小鼠可移植性 OSCC 转移性肿瘤亚克隆中检测到的 19 号染色体扩增中的靶基因

• 发表时间: 2014
• 作者: Tomoki Muramatsu;Ken-ichi Kozaki;Seiya Imoto;Rui Yamaguchi;Hitoshi Tsuda;Tatsuyuki Kawano;Satoru Miyano;Johji Inazawa
• 通讯作者: Johji Inazawa