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末梢神経接着糖蛋白質に見い出された新規糖鎖の生物学的意義

周围神经粘附糖蛋白中发现的新型糖链的生物学意义

基本信息

批准号：
11159219
负责人：
遠藤玉夫
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

我々が末梢神経や骨格筋で見つけた哺乳動物では珍しいOマンノシル型糖鎖について、生合成経路の解明を目指した。本年度はマンノースの次に起こるN-アセチルグルコサミン転移反応について検討した。合成したマンノシルペプチドを基質として新生ラット脳を酵素源にしてN-アセチルグルコサミン転移活性を測定した。その結果、反応時間、蛋白質量、基質量、それぞれに依存した転移活性を検出することに成功した。この活性は、100度3分間の熱処理により消失し、金属イオンとしてマンガンを要求した。生成された分子は、GlcNAcβ1→2Manのみを特異的に水解する肺炎双球菌由来のN-アセチルヘキソサミニダーゼによりN-アセチルグルコサミンを遊離した。一方、反応生成分子からアルカリβ脱離反応により二糖が回収された。こうして回収された物質は、高アルカリpHイオン交換カラムで標準物質のGlcNAcβ1→2Manと溶出位置が一致した。以上の結果、脳にはマンノシルペプチド上のマンノースを受容体とし、N-アセチルグルコサミンをβ1→2で転移する酵素が存在することが分かった。N-アセチルグルコサミンβ1→2転移酵素については、すでにN型糖鎖の生合成に係わるGnT-IおよびGnT-IIが知られているが、我々が見つけた酵素はその両者とも異なる新規酵素であることが判明した。また、ラット脳以外について調べてみると、ウシ脳、ブタ脳、および骨格筋細胞とシュワノーマ細胞で酵素活性の存在を確認した。本酵素の精製および遺伝子クローニングに着手している。

We are looking forward to seeing the understanding of the pathway of biosynthesis in mammals. This year, the number of employees in the company increased by 1.5%, while the number of employees in the company decreased by 1.5%. The activity of N-Alcellucosamine migration was determined by using synthetic mannosyl peptide as a substrate and nascent riboflavin as an enzyme source. The results, reaction time, protein content, basic mass, and activity of the enzyme are dependent on the activity of the enzyme. This activity is required for heat treatment at 100 ° C for 3 minutes. The production of molecules such as GlcNAcβ1→2Man and the specific hydrolysis of N-3 - 4 - 5 - 6- One side, anti-formation molecule, anti-formation molecule The dissolution position of GlcNAcβ1→2 Man is consistent with that of GlcNAcβ1→2Man As a result of the above, the enzyme is present on the receptor and the N-terminal. N-type carbohydrate synthesis system GnT-I and GnT-II are known to be involved in the synthesis of N-type carbohydrate. The presence of enzyme activity in cells other than muscle cells was confirmed. The enzyme is refined and processed in a batch process.