权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

老年性痴呆関連糖タンパク質の糖鎖異常に関する生化学的研究

老年痴呆相关糖蛋白聚糖异常的生化研究

基本信息

批准号：
09670167
负责人：
遠藤玉夫
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

CHO細胞で発現させたAPP(アミロイド前駆体タンパク質)のN型およびO型糖鎖について解析した.ヒドラジン分解によってN型糖鎖を遊離させた後、放射性ホウ素化水素ナトリウムによって還元標識した。こうして得た標識オリゴ糖の混合物をMono Qを用いた陰イオン交換カラムより分画すると、約97%がシアル酸を持つことが分かった。さらにレクチンカラム及びゲル瀘過カラムにて個々の糖鎖を分画後、特異性の高い糖鎖分解酵素による逐次消化によりその糖鎖構造を推定した。その結果、母核にフコースを持つあるいは持たない複合型2本鎖、3本鎖構造であることが判明した。O型糖鎖はシアル酸をもつGal β1→3GalNAc構造であることが分かった。微量糖タンパク質糖鎖を解析するために質量分析計を利用した分析技術の開発も行なった。その結果、約10フェントモルのオリゴ糖で良好なスペクトルを得ることができた。また、この方法では複数の検体を同時に測定でき、かつ各々の分析も10分以内で可能とし大幅に時間を短縮することができた。今後はこうした一連の分析手法を用いることにより、少量しか得られない貴重な老年性痴呆関連糖タンパク質の糖鎖についての解析が可能になった。一方、痴呆など病的老化機構をより理解するために生埋的老化に関する研究をラットをモデルとして進めた結果、脳糖タンパク質は加齢に伴い大きく変化することが分かった。さらに、これらの糖タンパク質は脳の各部位で異なった分布をしており、興味深いことにその分布状態が加齢に伴い変化することも明らかにした。

CHO cells develop APP(a precursor protein) and N-type and O-type carbohydrate chains. After the decomposition of N-type carbohydrate, the radioactive isotope is identified. About 97% of the sugar mixture was separated by a single solvent. After the analysis of the glycan chain, the structure of the glycan chain was estimated by the sequential digestion of specific high glycan enzymes. As a result, the parent core is still in the middle of the complex type of 2-lock, 3-lock structure. O-type sugar chain is composed of Gal β1→3GalNAc structure. The development of analytical techniques for the analysis of trace amounts of sugar The results were about 10 minutes. This method can be used to measure multiple samples simultaneously, and the analysis time can be shortened greatly within 10 minutes. In the future, a series of analytical methods will be used to analyze the possible effects of Alzheimer's disease. The aging mechanism of dementia is understood, and the aging mechanism of dementia is studied. The results are analyzed, and the quality of dementia is analyzed. The distribution of sugar in different parts of the body is different, and the distribution of sugar in different parts is different.