ウイルスの細胞間移行に関与する宿主変異を用いた細胞間コミニケーションの解析

利用参与病毒细胞间运动的宿主突变分析细胞间通讯

• 批准号: 11163202
• 负责人: 石川 雅之
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11163202/
• 关键词: キュウリモザイクウイルス; シロイヌナズナ; 宿主因子; 細胞間移行; プラスモデスマータ

(1)cum1-1変異株の解析:キュウリモザイクウイルス(CMV)の移行蛋白質(MP)存在下でのプラスモデスマーダのsize exclusion limit(SEL)の比較を、シロイヌナズナcum1-1変異株と野生型株の間で行う目的で、CMVのMPを発現するcum1-1変異株および野生株由来の形質転換体を作製した。得られた形質転換体におけるCMV MPの発現レベルをウエスタン法により解析したところ、発現レベルは大きくばらつくものの、平均すると野生株における蓄積よりも変異株における蓄積の方が低いことを見いだした。CUM1遺伝子産物がプラスモデスマータの構成要素あるいはその機能調節因子である可能性を考慮すると、cum1-1変異株において微細形態に異常がみられる可能性も考えられる。そこで、cum1-1変異株および野生株の根を樹脂包埋して横断切片を作製し観測を行ったが、樹脂を浸透させるステップにおいてある確率でアーティファクトがはいる(変異株の維管束部が潰れる)ことが明らかになった。そこで、生試料をアガロース包埋してビブラトームで切って観察した。その結果、変異株においては細胞の形、あるいは並び方が不規則になる傾向が見られた。しかし、その差は微妙で、それを表現する適当なパラメーターが見いだせず、また、現時点ではその差がcuml変位自体に付随することを容易に示すことができないので、これ以上の解析はとりあえずストップすることにした。(2)CUM1遺伝子座のクローン化:ファインマッピングによりCUM1遺伝子の存在しうる範囲を約60kbpの領域に狭めた。

Cum1-1 - (1) different strains の analytic: キ ュ ウ リ モ ザ イ ク ウ イ ル ス (CMV) の transitional protein (MP) in the presence of で の プ ラ ス モ デ ス マ ー ダ の size exclusion Limit (SEL) の を, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ cum1-1 - different strains と で line between wild type strains の う purpose で, CMV の MP を 発 now す る cum1-1 - different strains お よ び wild plant origin の form quality planning in body を cropping し た. Have ら れ た form quality planning in body に お け る CMV MP の 発 now レ ベ ル を ウ エ ス タ ン method に よ り parsing し た と こ ろ, 発 now レ ベ ル は big き く ば ら つ く も の の, average す る と wild strains に お け る accumulation よ り も - different strains に お け る low accumulation の party が い こ と を see い だ し た. CUM1 heritage 伝 zi chan content が プ ラ ス モ デ ス マ ー タ の elements あ る い は そ の functional regulation factor で あ る possibility を consider す る と, CUM1-1 - different strains に お い に て subtle form abnormal が み ら れ る possibility も exam え ら れ る. そ こ で, cum1-1 - different strains お よ び wild strains の root を resin embedding し て cross sectional slice を cropping し 観 measuring line を っ た が drenched, resin を さ せ る ス テ ッ プ に お い て あ る probabilistic で ア ー テ ィ フ ァ ク ト が は い る (- different strains の vascular bundle が collapse れ る) こ と が Ming ら か に な っ た. Youdaoplaceholder0 ムで で で, production test material をアガロ ス ス encapsulation <s:1> てビブラト ムで ムで cutting って観 inspection た た. そ の results, - different strains に お い て の は cells form, あ る い は and び が irregular に な る tendency が see ら れ た. し か し, そ の は subtle で, そ れ を performance す る appropriate な パ ラ メ ー タ ー が see い だ せ ず, ま た, current で は そ の poor が cuml - who pay with autologous に す る こ と を に easily shown す こ と が で き な い の で, こ れ above analytical は の と り あ え ず ス ト ッ プ す る こ と に し た. (2) CUM1 heritage 伝 stroma の ク ロ ー ン : フ ァ イ ン マ ッ ピ ン グ に よ り CUM1 posthumous son 伝 の is し う る van 囲 about 60 KBP を の field に narrow め た.

项目成果

石川 雅之: "植物アルファ様ウイルスの増殖をサポートする宿主因子"ウイルス. 49. 79-84 (1999)

Masayuki Ishikawa：“支持植物α样病毒生长的宿主因素”病毒。49. 79-84 (1999)