二種の植物ウイルスの細胞間移行を阻害する宿主変異の解析

抑制两种植物病毒细胞间运动的宿主突变分析

• 批准号: 12052202
• 负责人: 石川 雅之
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12052202/
• 关键词: キュウリモザイクウイルス; シロイヌナズナ; 宿主因子; 細胞間移行

シロイヌナズナcum2-1変異は、キュウリモザイクウイルス(CMV)とカブクリンクルウイルス(TCV)の細胞間移行を抑制するが、タバコモザイクウイルス(TMV)の増殖には影響を与えない。従って、野生型CUM2遺伝子産物はCMVおよびTCVの効率の良い細胞間移行に特異的に必要であると考えられた。本研究は、CUM2遺伝子をポジショナルクローニングにより得、構造を決定し、ウイルスの細胞間移行における役割を明らかにすることを目的とした。まず、蛍光ラベルした既知分子量をもつデキストランを単独でcum2-1変異株および野生株の葉肉細胞にマイクロインジェクションし、細胞間移行の可否を調べたが、移行の様子に変異株と野生株の間で差は認められなかった。このことと、変異がTMVの増殖に影響を与えないことから、CMVあるいはTCV非存在時の変異株におけるプラスモデスマータは野生株と同様のsize exclusion limitをもつことが示唆された。次に、CUM2遺伝子をポジショナルクローニングするために、本年度は1,424株のF2植物を用いて詳細なマッピングを行い、第3染色体上の約80kbpの領域にCUM2遺伝子座を絞り込んだ。最近、この領域の塩基配列がゲノムプロジェクトにより明らかにされたので、遺伝子がコードされると予測される部分約45kbpについて野生株とcum2-1変異株の間でゲノムDNA塩基配列を比較し、遺伝子予測に基づけばアミノ酸置換を伴う1塩基置換を見いだした。現在、この変異がcum2-1に相当するかを検討するために、当該遺伝子をカバーするゲノミックDNAでcum2-1変異株を形質転換し、CMVおよびTCV増殖抑制形質が相補されて野生株並にまで戻るか検討中である。

The effect of the change of cum2-1, CMV, TCV on the proliferation of TMV is discussed. The wild type CUM2 gene product is essential for efficient intercellular migration of CMV and TCV. The aim of this study is to determine the structure of CUM2 gene and its intercellular migration. The molecular weight of each plant is known as cum2 -1, and the mesophyll cells of each plant are different from those of the wild plant. The ability to regulate the migration between cells and the difference between the different plants and wild plants is also known. The effect of TMV on the growth of wild plants is different from that of CMV in the absence of TCV. This year, there were 1,424 F2 plants in use, and the CUM2 locus was located in an approximately 80kbp region on chromosome 3. Recently, the nucleotide sequence of this domain has been determined by comparing the nucleotide sequence of wild strains with cum2 -1 and heterozygous strains with 1 nucleotide sequence of DNA in the predicted portion of about 45kbp. Now, when this gene is detected, the DNA of cum2 - 1 mutant is changed qualitatively, CMV and TCV growth inhibitors complement each other, and wild strains are also detected.

项目成果

W-M.Lee: "Mutation of host Δ9 fatty acid desaturase inhibits brome mosaic virus RNA replication between template recognition and RNA synthesis."J.Virology. 75(5). 2097-2106 (2001)

W-M.Lee：“宿主 Δ9 脂肪酸去饱和酶的突变抑制了雀麦花叶病毒 RNA 模板识别和 RNA 合成之间的复制。”J.Virology 75(5) (2001)。

T.Yamanaka: "TOMl, an Arabidopsis gene required for efficient multiplication of tobamovius, encodes a putative transmembrane protein."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97(18). 10107-10112 (2000)

T.Yamanaka：“TOM1，tobamovius 有效增殖所需的拟南芥基因，编码推定的跨膜蛋白。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。

M.Ishikawa: "The 3a cell-to-cell moverment gene is despensable for cell-to-cell transmission of brome mosaic virus RNA replicons in yeast but retained over 10^<45>-fold amplification."J.Gen.Virol.. 81(9). 2307-2311 (2000)

M.Ishikawa：“3a细胞间运动基因对于酵母中雀麦花叶病毒RNA复制子的细胞间传播是不必要的，但保留了超过10^45倍的扩增。”J.Gen.Virol。

J.Diez: "Identification and characterization of a host protein required for efficient template selection in viral RNA replication."Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 97(8). 3913-3918 (2000)

J.Diez：“病毒 RNA 复制中有效模板选择所需的宿主蛋白的鉴定和表征。”Proc.Natl.Acad.Sci.USA。