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植物RNAウイルスの増殖に関与する宿主遺伝子TOMlのクローニング

参与植物RNA病毒繁殖的宿主基因TOM1的克隆

基本信息

批准号：
07740607
负责人：
石川雅之
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

シロイヌナズナのtoml変異は、植物プラス鎖RNAウイルスのひとつであるタバコモザイクウイルスの一細胞内での増殖を低レベルに抑制する。我々は、toml変異に対応する野生型遺伝子TOMlのクローン化を目指している。本年度は、まず、シロイヌナズナ第4染色体上のTOMl座を含む領域を、酵母人工染色体(YAC)ベクターを用いて構築されたシロイヌナズナゲノミックDNAクローン群(コンティグ)でカバーした。TOMl座の存在位置の同定は、toml変異株PD114(エコタイプCol-0由来)と野生型エコタイプLa-0(TOMl/TOMl)の交雑により得られたF2植物を用いたRFLPマッピングにより行なった。コンティグが完成した時点で、マッピングラインの数が数十と少なかったため、TOMl座が存在する可能性のある領域(すなわち、toml/TOMl座に最も近いDNAマーカー間の距離)は、数百kbと広大な領域に及んだ。そこで、TOMl座の位置をより狭い領域に絞り込むために、マッピングラインの数を約800株増やした。さらに、TOMl座近傍に末端を持つYACクローンをもとに挿入DNAの末端付近に特異的なプローブを調製し、より密に分布するRFLPマーカー群を得た。これらのマッピングラインとRFLPマーカーを用いることにより、TOMl座の存在する可能性のある領域は、約150kbに限定された。現在、挿入DNAを植物に導入できるようにデザインされたコスミドベクターを用いて構築されたシロイヌナズナゲノミックDNAライブラリーより、この領域のサブフラグメントを持つクローンを単離し、どこにtoml変異を相補する能力があるか決定する試みを行っている。また、この領域に存在する転写単位の決定も近日中に開始する予定である。

The plants were infected by toml, the plants were infected by RNA, and the plants were inhibited by low colonization. I said, "toml", "TOMl", "wild", "wild" and "wild". This year, the TOMl locus on chromosome 4 contains domain, yeast artificial chromosome (YAC), yeast artificial chromosome (YAC), yeast artificial chromosome (Saccharomyces cerevisiae), yeast artificial chromosome (Saccharomyces cerevisiae), yeast artificial chromosome (Saccharomyces cerevisiae). The location of TOMl plant is the same as that of toml plant PD114 (Col-0), wild type plant (TOMl/TOMl), wild type plant (TOMl/TOMl), wild type plant (F2 plant), wild type plant (F2 plant). There are several hundred kilobytes (kb) of airwaves in the TOMl seat, which is the most recent DNA location in the toml/TOMl seat, and several hundred kilobytes (kb). The location and location of TOMl seat is very narrow, and the number of plants is about 800 plants. The end of the TOMl block is close to the end of the YAC block, and the end of the RFLP block is close to the end of the DNA. There is a possibility that there is a possibility in the RFLP seat, and that there is a limit in the 150kb. Now, you can use the DNA to determine the performance of the plant. You can use it to determine the performance of the DNA, the field and the toml. In the field of information and communication, there is a decision to start a pre-determined period in the near future.