腎細胞癌におけるホルモン依存性増殖の解明と治療への応用

肾细胞癌激素依赖性增殖的阐明及其在治疗中的应用

• 批准号: 11671581
• 负责人: 堀口 明男
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11671581/
• 关键词: 腎細胞癌; エストロゲンレセプター; アポトーシス

【目的】ヒト腎細胞癌におけるエストロゲンレセプター(ER-α、および-β)の発現と各エストロゲン製剤による増殖抑制に対する効果につき検討した。【対象と方法】ヒト腎細胞癌株(KU19-20,KU2,Caki)を対象とした。各細胞におけるER-α、および-βの発現をRT-PCR法を用いて確認した。β-estradiol,β-estradiol-3-sulfate,diethylstilbestrol diphosphate(DESD)との96時間の混合培養の後、吸光度測定法にて細胞増殖効果を比較検討した。DESDに関しては125I標識DESDによりbinding affinityを、そしてflowcytometryによるBrdU/DNA二重染色法、さらにfragmented DNA ELISA法にてapoptosisの誘導の有無を検討した。KU19-20ではER-α、および-βの両者の発現が確認されたが、KU2ではER-αのみ、CakiではER-βのみの発現が認められた。β-estradiol-3-sulfateとの混合培養では増殖抑制効果は認められなかったが、β-estradiolでは全ての細胞で濃度依存性に増殖抑制が認められた。DESDにおいてはKU19-20,KU2のみ5〜100Mg/mlの濃度において著明な増殖抑制が認められた。またKU19-20,KU2においてはfragmented DNAの増加が観察された。DESDに対するbinding affinityの検討では全ての細胞に明らかな結合能が認められた。以上よりエストロゲン製剤は薬剤により腎細胞癌に対し異なる反応を示し、一部の腎細胞癌細胞において増殖抑制が誘導される可能性が示唆された。

目的：研究人肾细胞癌中雌激素受体（ER -α和-β）的表达以及每种雌激素制剂对抑制生长的影响。 [受试者和方法]包括人类肾细胞癌系（KU19-20，KU2，CAKI）。使用RT-PCR确认ER-α和-β在每个细胞中的表达。在与β-雌二醇，β-雌二醇-3-硫酸盐和二乙基苯甲酸二磷酸二磷酸酯（DESD）混合培养后，通过吸光度测量比较细胞增殖效应。关于DESD，使用125i标记的DESD研究了结合亲和力，并使用流动性仪和BRDU/DNA双重染色，以及碎片的DNA ELISA方法来确定是否诱导了凋亡。在KU19-20中证实了ER-α和-β的表达，但在CAKI中观察到了仅在KU2中观察到ER-α的表达。尽管在与β-雌二醇-3-硫酸盐混合培养物中未观察到生长抑制作用，但所有β-雌二醇的细胞均表现出浓度依赖性生长抑制。在DESD中，仅在5至100 mg/mL的浓度下仅显着抑制KU19-20和KU2。另外，在KU19-20和KU2中观察到碎片DNA的增加。在对DESD的结合亲和力的研究中，所有细胞均具有明显的结合能力。从以上，已经提出，雌激素制剂通过药物对肾细胞癌的反应有所不同，并且在某些肾细胞癌细胞中可能诱导增殖抑制作用。