脳の発生異常をウィルムス腫瘍を合併する有系分裂異常症の病態解析と原因遺伝子の同定

脑发育异常伴肾母细胞瘤有丝分裂紊乱致病基因的病理分析及鉴定

• 批准号: 11877134
• 负责人: 鈴木 英明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877134/
• 关键词: 紡錘糸チェックポイント; anaphase-promoting complex; Wilms腫瘍; Dandy-Walker奇形; 紡錘糸チェックポイント(MSC); anaphase-promoting complex(APC); ユビキチン・リガーゼ; Wilm's腫瘍

前年までの研究により、Dandy-Walker奇形を含む重度の脳奇形とWilms'腫瘍を合併する稀な先天奇形症候群において、紡錘糸チェックポイント機能が欠損していることを解明し、この症候群をmosaic variegaled aneuploidy type2(MVA type2)と命名した。本疾患の原因遺伝子を同定するために、本年度は、紡錘糸チェックポイント経路の既知蛋白(Mad2,Securin)の過剰発現実験を行った。方法はMad2-IRES-EGFP、Securin(PTTG1)-IRES-EGFPの2つのコンストラクトを持つレトロウィルスを作成し、患児細胞に感染させた後、GFP陽性細胞について紡錘糸形成阻害剤に対する反応を形態およびFACSを用い解析した。この結果Mad2およびSecurinどちらの蛋白を過剰発現させた場合でも、紡錘糸チェックポイント機能は回復することがわかった。このことから少なくとも本疾患の原因遺伝子はMad2より上流に存在する可能性が示唆された。この結果をもとに、Mad2より上流に位置すると考えられている既知の紡錘糸チェックポイント遺伝子の変異解析をSSCPおよびdirect sequence法を用いて行った。解析した遺伝子はMad1、Mad2、Mad3/BubR1、Bub1、Bub3、ZW10、Rough Deal(ROD)、CENP-Eである。しかしこれらの遺伝子には変異は認められなかった。

In the past year, the study of Dandy-Walker syndrome, including severe and Wilms'disease, has been carried out to explain the rare congenital anomaly syndrome, spindle syndrome, and its functional impairment. The syndrome is named mosaic variegalaneuploidy type2(MVA type2). The cause of this disease has been identified in the past few years, and the occurrence of the known protein (Mad2,Securin) in the spindle circuit has been reported this year. Methods Mad2-IRES-EGFP and Securin(PTTG1)-IRES-EGFP were analyzed by morphological and FACS analysis. The result is that Mad2 and Securin are able to restore the protein to the normal position. This incident raises the possibility that causal factors of this disease may exist upstream of Mad2. The result is that the SSCP and direct sequence method are used to analyze the difference between the known spindle and the upstream position. Analysis of Mad1, Mad2, Mad3/BubR1, Bub1, Bub3, ZW10, Rough Deal(ROD), CENP-E The children of the two countries are different.

项目成果

H.Suzuki,M.Akiyama,M.Tsukuno, et al.: "A novel Wilms' tumor-predisposing syndrome associated with the lack of metaphase checkpoint"Cancer Reserch. (in press).

H.Suzuki、M.Akiyama、M.Tsukuno 等人：“一种与缺乏中期检查点相关的新型维尔姆斯肿瘤诱发综合征”癌症研究。

Tsukuno M., Suzuki H., Eto Y.,: "Pfeiffer syndrome caused by haploinsufficiency mutation of FGFR2.J"Caniofac Genet Dev Biol. 19. 183-188 (1999)

Tsukuno M.、Suzuki H.、Eto Y.，：“由 FGFR2.J 单倍剂量不足突变引起的 Pfeiffer 综合征”Caniofac Genet Dev Biol。

Tsukuno M., Suzuki H., Eto Y.,: "Genomic structure of fibroblast growth factor receptor 2 ・・・"Jikeikai Med J. (in press). (2000)

Tsukuno M.、Suzuki H.、Eto Y.，：“成纤维细胞生长因子受体 2 的基因组结构……”Jikeikai Med J.（出版中）。