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肺炎クラミジア菌感染症による脳・頚動脈の動脈硬化進展機構の解明

阐明肺炎衣原体感染引起的脑部和颈动脉动脉硬化的进展机制

基本信息

批准号：
11877242
负责人：
白井睦訓
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

肺炎クラミジアChlamydia pneumoniae(CP)は、心筋梗塞、動脈硬化症などの原因として注目されていが、動脈硬化進展には、炎症性サイトカインや接着分子などの発現調節をしている転写因子NF-κBが重要な役割を持つと考えられている。CP感染による宿主細胞のNF-κBの活性誘導と、NF-κBが発現調節しているcyclooxygenase-2(COX-2)やNOについて検討し、また抗炎症剤の一つであるaspirinのNF-κB活性やCP増殖に対する影響を検討した。方法としては培養HEp-2細胞にNF-κBのenhancer elementとluciferaseの融合遺伝子を持つplasmidを導入後CPを感染させ、luciferase活性を指標にNF-κBの活性を経時的に測定した。さらに経時的にNO産生やcyclooxygenase-2 protein産生も測定した。またCP感染後aspirinを培養液に加え、NF-κBの活性や本菌の増殖に対する影響を調べた。結果として1)CP感染8、24時間後において、luciferaseの値は感染前に比べ有意な上昇を示し、感染によるNF-κBの活性化が認められた。2)CP感染によりCOX-2 proteinの誘導とその産物の一つであるprostaglandin E2の産生が有意に認められた。3)感染によるNF-κBの活性化とPGE2産生はaspirinにより抑制された。4)感染によるNOの産生は認めなかった。5)aspirin投与により48時間後までは最大約40%の肺炎クラミジアの増殖抑制を認め、tryptophan添加により改善した。CP感染によりNF-κB活性が上昇したことから、炎症性サイトカインや接着分子が発現して動脈硬化が進展すると考えられた。またaspirinは抗炎症作用だけではなく抗クラミジア作用を有することが示唆された。CPのエネルギーの大部分は宿主細胞のATPを利用しているが、そのATP加水分解代謝に最も重要な因子であるアデニレートキナーゼ(AK)の活性を酵素学的に解析した結果、CPのAKは他菌種のものに比べて基質特異性が高く、遺伝子の点特異的変異を導入したリコンビナント酵素タンパクを用いた解析により、亜鉛を結合して高い活性を呈し、高温安定性を維持するために重要な4個のシステイン構造領域を発見した(J.Biol.Chem)。

Pneumonia pneumonia (CP) is a major cause of heart disease and atherosclerosis, and it is important for the development and regulation of NF-κB in atherosclerosis. The induction of NF-κB activity in host cells during CP infection, the regulation of NF-κB expression, the regulation of cyclooxygenase-2(COX-2) and NO, and the effects of anti-inflammatory agents on the induction of aspirin NF-κB activity and CP proliferation were investigated. Methods: To culture HEp-2 cells and determine the NF-κB enhancer element, luciferase and fusion protein after plasmid introduction. NO production and cycloxygenase-2 protein production were measured during the period. After CP infection, aspirin culture medium was increased, NF-κB activity was increased, and the effect of CP infection on bacterial proliferation was modulated. Results: 1) Luciferase activity increased significantly 8 and 24 hours after CP infection, and NF-κB activity increased significantly after CP infection. 2) The production of prostaglandin E2 is intentionally recognized by the induction of COX-2 protein by CP infection. 3)The activation of NF-κB by infection and the production of PGE2 are inhibited by aspirin. 4)NO is produced by infection. 5)Aspirin was administered 48 hours later, and the most recent 40% of pneumonia growth inhibition was identified and tryptophan was added. CP infection increases NF-κB activity, inflammation increases, and atherosclerosis progresses. Aspirin has an anti-inflammatory effect and an anti-inflammatory effect. Most of CP's production is related to ATP utilization in host cells. The most important factor in ATP hydrolysis and metabolism is the enzyme activity of CP's AK. The enzyme activity of CP's AK is higher than that of other species. The enzyme activity of CP's AK is higher than that of other species. Four important structural domains for high temperature stability maintenance were identified (J. Biol.Chem).