シロイヌナズナの全成分研究

拟南芥所有成分的研究

• 批准号: 11878105
• 负责人: 海老塚 豊
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878105/
• 关键词: シロイヌナズナ; ゲノムプロジェクト; 生合成工学; トリテルペン; ステロール; GC-MS

シロイヌナズナの種子を播種し二ヶ月後成長した植物体(全草)を収穫、メタノール冷浸抽出エキスを得た。比較的少量のサンプルで成分分析をしなければならないことを考慮し、手持ちの標準品の多いトリテルペン成分の検討から始めることにした。まずメタノールエキスに同量の20%水酸化カリウムを加え加温ケン化した。ヘキサンで脂溶性画分を抽出、TLC(展開溶媒:ベンゼン-アセトン系)で分離し、4,4-ジメチルステロール画分を得た。この画分につきLCMS解析を行ったところ、β-アミリン(60%)、ルペオール(20%)、シクロアルテノール(5%)、α-アミリン(5%)、タラキサステロール(5%)、ブチロスペルモール(3%)、及び、微量の未同定トリテルペン(2%)を検出した。シロイヌナズナからは、シクロアルテノール合成酵素、ルペオール合成酵素のcDNAがクローニングされており、また、ゲノム遺伝子解読から、これらの他に4種のオキシドスクアレン閉環酵素(OSC)相同遺伝子の存在が知られている。今回得られた情報は、ゲノム上の4種の機能未知OSCの同定において極めて貴重なものになると思われる。今後は、トリテルペンのみならず、フラボノイドなどの他の化合物群についても精査し、二次代謝生合成に関与する遺伝子の機能解明へ向けて、化合物レベルでの検討を進めたいと考えている。

The seeds are sown two months later and the plants (whole grass) are harvested, and the seeds are extracted by cold soaking. Comparison of small amounts of sample composition analysis to consider, hand-held standard of multiple sample composition analysis to start The amount of water added to the mixture was 20%. The lipid soluble fraction was extracted and separated by TLC(development solvent: solvent-solvent system), and the 4,4-solvent fraction was obtained. The analysis of LCMS was carried out in the following categories: β-amylin (60%), sorrel (20%), sorrel (5%), α-amylin (5%), sorrel (5%), sorrel (3%), and micro-variable sorrel (2%). The cDNA of the four enzymes, i.e., the enzyme synthase, the enzyme synthase, and the protein synthase, is used to detect the presence of the same gene. Now we have 4 kinds of unknown functions in the system. In the future, we will further investigate the functional interpretation of genes related to secondary metabolism and synthesis of other compound groups.