遺伝子導入によるグリオーマ糖脂質抗原の細胞接着、浸潤における機能的解析

基因转移胶质瘤糖脂抗原在细胞粘附和侵袭中的功能分析

• 批准号: 11671374
• 负责人: 八巻 稔明
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11671374/
• 关键词: グリオーマ; ガングリオシド; 遺伝子導入; 浸潤; 接着; GM3ガングリオシド; GD3ガングリオシド; シアル酸転移酵素

細胞表面に発現されている糖脂質糖鎖が神経膠腫の生物学的特性、特に増殖、接着、浸潤に何らかの関わりを持つことを明らかにする目的で実験を行った。ラットグリオーマ細胞株RG2はその糖脂質成分がほぼGM3ガングリオシドからなる単純な組成を示している。糖脂質合成抑制剤D-PBPPを作用させるとRG2細胞はMatrigel invasion chamberにて浸潤能の亢進を示す。これに外来性のGM3を投与して糖脂質発現を正常化させると浸潤能の変化も元の状態に回復した。これによりGM3が浸潤に抑制的に機能していることが示唆された。さらに糖鎖抗原の発現を変化させることにより細胞の接着、浸潤との関わりを検証すべく糖鎖改変のためのシアル酸転移酵素遺伝子を導入し、GD3ガングリオシドに改変したクローンをした。平成11年度の実験では細胞の形態、増殖能、細胞間基質(collagen type I,IV,laminin,fibronectin)に対する接着性、Matrigel invasion chamberにおける浸潤能のいずれのアッセイにおいてもRG2 wild typeとRG2-GD3クローンの生物学的な機能に変化は認められなかった。平成12年度はGD3発現量の異なる3クローン(FACS解析ではGD3 26%、65%,100%陽性)を用いて同様の実験を行った。本年度の実験でも細胞の形態、増殖、接着、浸潤いずれのアッセイにおいても有意な変化を認めることはできなかった。以上の結果からRG2細胞においてはGM3にシアル酸を転嫁させたGD3に糖鎖構造を改変しても生物学的な機能には大きな変化は現われないものと結論された。

Cell surface に 発 now さ れ て い る sugar lipid sugar lock が god 経 gum swollen の biology characteristics, what, then, infiltrating に に raised colonization ら か の masato わ り を hold つ こ と を Ming ら か に す で る purpose be 験 を line っ た. ラ ッ ト グ リ オ ー マ cell lines RG2 は そ の sugar lipid composition が ほ ぼ GM3 ガ ン グ リ オ シ ド か ら な る 単 of pure な を shown し て い る. Glycolipid synthesis inhibitor D-PBPPを acts on させるとRG2 cells <s:1> Matrigel invasion chamberにて infiltration energy を shows す. <s:1> れに exogenous <s:1> GM3を investment with <s:1> て glycolipids を normalization させると infiltration can <s:1> change the quaternion <e:1> state に return to た た. The に function of に inhibition is infiltrated by <s:1> れによ に る る る とが とが とが とが とが とが とが とが とが とが とが instigated by された. さ ら に sugar lock antigen の 発 を now - the さ せ る こ と に よ の then, り cell infiltrate と の masato わ り を 検 card す べ く sugar change lock - の た め の シ ア ル acid heritage planning shift enzyme 伝 を import し, GD3 ガ ン グ リ オ シ ド に change - し た ク ロ ー ン を し た. In Heisei 11, <s:1> experiment: で で cell <s:1> morphology, proliferative capacity, intercellular matrix (collagen type I,IV,laminin,fibronectin)に vs. する adhesion, Matrigel invasion Chamber に お け る can infiltrate の い ず れ の ア ッ セ イ に お い て も RG2 wild type と RG2 - GD3 ク ロ ー ン の に な function of biology - the は recognize め ら れ な か っ た. Pp.47-53 12 は GD3 発 different showing quantity の な る 3 ク ロ ー ン (both FACS parsing で は GD3 were 26%, 65%, 100% positive) を with い て with others の be 験 を line っ た. This year の be 験 で の も cell morphology, raised colonization, then, infiltrating い ず れ の ア ッ セ イ に お い て も intentionally な variations change を recognize め る こ と は で き な か っ た. の above results か ら RG2 cells に お い て は GM3 に シ ア ル acid を planning to marry さ せ た GD3 に sugar を lock structure change - し て も biology な function に は big き な variations change は now わ れ な い も の と conclusion さ れ た.