線虫における糖鎖シグナルによる細胞間コミュニケーション

线虫中通过糖链信号进行的细胞间通讯

基本信息

批准号：
12033216
负责人：
笠井献一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

糖鎖生物学研究のための最良の実験動物のひとつと考えられる線虫C.elegansのガレクチンについて多角的研究を行った。ゲノムプロジェクトの完成により、C.elegansには少なくとも11種類のガレクチン関連遺伝子が発見されたが、それらをすべてリコンビナントタンパク質として発現させ、糖結合特性を含む諸性質を解明した。糖結合に関しては最近われわれが大幅に改良したフロンタルアフィニティークロマトグラフィー法を駆使し、多数の糖鎖に対する解離定数を測定することより比較検討した。その結果、脊椎動物のガレクチンとの対比が明らかになり、生物種の進化およびタンパク質の進化の過程で、何が保存され、何が変化したのか等の差異が示唆された。線虫は最初にタンデムリーピート型ガレクチンが発見された生物でもあるが、このようなガレクチンの存在意義を解明するために、2つの糖結合部位のそれぞれ一方のみを含む半分子をリコンビナントタンパク質として発現させ、それぞれについて糖結合特性を詳細に検討した。それにはわれわれが開発した特異的相互作用解析法であるフロンタルアフィニティークロマトグラフィー法、キャピラリーアフィノフォレシス法が有効に利用された。その結果、2つの結合部位はそれぞれが独自の特異性を示し、タンデムリピート型ガレクチンは構造の異なる複合糖質間を架橋しうること、すなわちヘテロ2価性架橋分子であることが示唆された。

我们从线虫秀丽隐杆线虫进行了一项多方面研究的乳肠蛋白研究，该研究被认为是糖生物学研究的最佳实验动物之一。随着基因组项目的完成，在秀丽隐杆线虫中发现了至少11种与lectectin相关的基因，所有这些基因均以重组蛋白表示为重组蛋白，并阐明了包括糖结合特性在内的各种特性。关于糖结合，我们使用了明显改善的额叶亲和色谱法比较并检查了许多糖链的解离常数。结果表明，与脊椎动物甘氨酸蛋白形成鲜明对比，表明在物种和蛋白质进化过程中保守的差异和变化的差异。线虫也是首次发现串联重复型甲状腺蛋白的生物，但是为了阐明这种甲状腺素的存在，其中一半仅包含两个糖结合位点中的一个，并详细检查了它们每个糖结合蛋白的糖结合蛋白。我们开发的特定相互作用分析方法，额叶亲和色谱和毛细血管反感染的特定相互作用分析方法有效地使用了这一点。结果表明，这两个结合位点每个都表现出独特的特异性，这表明串联重复甲状腺可以在不同结构的复杂碳水化合物之间进行交联，即异差的交联分子。