免疫細胞におけるインテグリン活性化シグナルの制御機構と免疫反応調節

免疫细胞整合素激活信号控制机制及免疫反应调节

基本信息

批准号：
12051222
负责人：
木梨達雄
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12051222/
关键词：
インテグリン LFA-1 JCAM-1 IL-2 Rap1 APC SDF-1 SLC

项目摘要

1 LFA-1によるT細胞と抗原提示細胞の接着形成メカニズとT細胞の活性化T細胞としてHEL抗原特異的3A9またはOVA特異的T細胞クローンを用い、抗原特異的におこるT細胞とAPC接着の形成とT細胞活性化のシステムを確立した。T-APC接着はLFA-1/ICAM-1依存的であり、抗原によるTCRからの刺激依存性に起る。またIL-2の産生はLFA-1/ICAM-1によるT-APC接着が必要であった。LFA-1の接着性上昇はRap1依存的である。Rap1の活性化を阻害すると、T-APC接着やIL-2の産生は著しく阻害されたが、抗体によるTCRとCD28架橋ではIL-2産生は正常に起った。またRap1にGFPを付けT細胞に導入したところRap1-GFPはT-APC接着面に集積した。T細胞にRap1を導入してRap1の活性化を増強するとT-APC接着の増強、TCRのdown-regulationの亢進が起り、IL-2の産生が早期に起ってくる。しかし18時間後にFas/FasLによるapoptosisに陥るというactivation-induced cell deathを引き起こした。以上の結果よりRap1はLFA-1/ICAM-1によるT-APCの接着を調節することによりT細胞活性化の大きな影響を与えることが明らかになった。2 ケモタキシスにおけるLFA-1の接着性調節ケモカイン刺激(SDF-1,SLC)によるICAM-1上での細胞移動を経時的ビデオ撮影する系を確立した。リンパ球系細胞株にGFPをつけたLFA-1を導入し、細胞移動に伴い、LFA-1がゴルジ体周辺、leading edgeに分布することが分かった。また活性化型Rap1V12を導入すると細胞接着だけでなく、細胞移動も亢進することがわかり、そのメカニズムについて解析中である。

1。使用HEL抗原特异性3A9或OVA特异性T细胞克隆激活T细胞和T细胞在T细胞和抗原呈现细胞之间的粘附形成机制，以建立形成抗原特异性T细胞和APC粘附和T细胞激活的系统。 T-APC粘附是LFA-1/ICAM-1依赖性，并且抗原对TCR的刺激依赖性。此外，IL-2产生需要LFA-1/ICAM-1的T-APC粘附。 LFA-1的粘附增加取决于RAP1。 RAP1激活的抑制显着抑制了T-APC粘附和IL-2的产生，但是当TCR和CD28通过抗体交联时，IL-2的产生通常发生。此外，当将GFP连接到RAP1并引入T细胞中时，RAP1-GFP积聚在T-APC粘附表面上。将RAP1引入T细胞以增强RAP1激活会导致T-APC粘附增强并增加TCR下调，从而提高IL-2的早期产生。然而，它引起了激活诱导的细胞死亡，这引起了18小时后FAS/FASL引起的凋亡。以上结果表明，RAP1通过通过LFA-1/ICAM-1调节T-APC的粘附对T细胞激活具有重大影响。 2通过趋化因子刺激（SDF-1，SLC），建立了一个系统来录像ICAM-1上的细胞迁移。带有GFP的LFA-1被引入淋巴细胞细胞系中，发现LFA-1分布在高尔基体围绕，并在细胞迁移的前缘处分布。此外，发现引入活化的RAP1V12不仅会增加细胞粘附，而且还会增加细胞迁移，并且目前正在分析机制。