RAPLによるリンパ球極性誘導機構を解明するシステムの樹立

RAPL阐明淋巴细胞极性诱导机制的体系建立

基本信息

  • 批准号:
    16657058
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

低分子量Gタンパク質Rap1とそのエフェクター分子RAPLはTCRやケモカインによるLFA-1、VLA-4の接着性亢進を伝達するinside-outシグナルである。Rap1-RAPLにインテグリン接着上昇の機序は細胞極性誘導と連関してインテグリンを細胞先端極に集積させることによることを明らかにしてきた。この機序をさらに明らかにするために可視化技術を用いて解析する系を樹立することを試みた。樹状細胞は特徴的な樹状突起や大きな細胞質もち、可視化技術による観察に適しており、しかもリンパ球と同様、Rap1-RAPLによる高い動態能力を持つ細胞である。そこでまず樹状細胞を用いてRap1-RAPLの細胞内局在変化をとらえる系を樹立した。Rap1の活性化型であるRap-1GTPに特異的に結合するRalGDS由来のRap1-binding domainにGFPを融合させたGFP-RalGDS-RBD蛋白質を作成した。またGFPに融合させたRAPLを作成した。また細胞極性誘導におけるRap1の必要性を調べるため、Rap1を特異的に不活化するSpa1や優性活性化型Rap1V12をレトロウイルスで導入する系を作製した。これらを骨髄由来樹状細胞に導入し、ケモカインCCL21刺激による細胞極性形成はRap1-RAPLに依存して一極にラッフル膜を形成し、そこにRap1-GTPやRAPLが移行する。またLFA-1,VLA-4も同じ部位に集積した。現在、微小管、アクチン線維、小胞マーカーを用いてこれらとの関係を解析している。
Low molecular weight G タ ン パ ク qualitative Rap1 と そ の エ フ ェ ク タ ー molecular RAPL は TCR や ケ モ カ イ ン に よ る LFA - 1, the VLA - 4 の then hyperthyroidism を 伝 da す る inside - out シ グ ナ ル で あ る. Rap1 - RAPL に イ ン テ グ リ ン then rise の machine sequence は cell polarity induced と masato し て イ ン テ グ リ ン を cells apex very に set product さ せ る こ と に よ る こ と を Ming ら か に し て き た. こ の machine sequence を さ ら に Ming ら か に す る た め を に visualization technology with い て parsing す を る department set up す る こ と を try み た. Dendritic cells of 徴 は な dendritic protrusions や big き な cytoplasm も ち, visualization technology に よ る 観 examine に optimum し て お り, し か も リ ン パ と ball with others, Rap1 - RAPL に よ る を hold high い dynamic capabilities つ cells で あ る. Youdaoplaceholder0 でまず でまず dendritic cells を with <s:1> てRap1-RAPL <s:1> intracellular localized changes をとらえる system を establish a た. Rap1 の activation type で あ る GTP に made specific に combined Rap - 1 す る RalGDS origin の Rap1 - binding domain に GFP fusion を さ せ た GFP - RalGDS - RBD protein を made し た. Youdaoplaceholder0 GFPに fuses させたRAPLを to make た. ま た cell polarity induced に お け る Rap1 の necessity を adjustable べ る た め, Rap1 を specific に inactive す る Spa1 や optimum activation type Rap1V12 を レ ト ロ ウ イ ル ス で import す る を makes system し た. こ れ ら を bone marrow origin dendritic cells に import し, ケ モ カ イ ン CCL21 stimulus に よ る cell polarity form は Rap1 - RAPL に dependent し て an に ラ ッ フ を ル membrane forming し, そ こ に Rap1 - GTP や made RAPL が transitional す る. Youdaoplaceholder0 LFA-1,VLA-4 に and じ site に accumulation た. Now, tiny tubes, ア ク チ ン line dimension, vesicular マ ー カ ー を with い て こ れ ら と の masato is を parsing し て い る.

项目成果

期刊论文数量(10)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Rapl-mediated LFA-1 activation by the T cell antiger receptor is dependent on PLCγ-1
T 细胞抗原受体 Rapl 介导的 LFA-1 激活依赖于 PLCγ-1
LAD-III, a leukocyte adhesion deficiency syndrome associated with defective Rapl activation
LAD-III,一种与 Rapl 激活缺陷相关的白细胞粘附缺陷综合征
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kinashi;T
  • 通讯作者:
    T
Aquaporin-2 trafficking is regulated by PDZ-domain containing protein SPA-1
  • DOI:
    10.1016/j.febslet.2004.05.021
  • 发表时间:
    2004-06-18
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3.5
  • 作者:
    Noda, Y;Horikawa, S;Sasaki, S
  • 通讯作者:
    Sasaki, S
Crucial roles of Rapleffector molecule RAPL in Lymphocyte and deixlritic cell trafficking
Rapleffector 分子 RAPL 在淋巴细胞和干细胞运输中的关键作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Katagiri;K.
  • 通讯作者:
    K.
Regulation of lymphocyte adhesion and migration by the small GTPass Rapl and its effector molecule, RAPL
小 GTPass Rapl 及其效应分子 RAPL 对淋巴细胞粘附和迁移的调节
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kinashi;T.
  • 通讯作者:
    T.
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  • 发表时间:
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