Rap1シグナルによるリンパ球動態の制御機構

Rap1信号控制淋巴细胞动力学的机制

• 批准号: 20060027
• 负责人: 木梨 達雄
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20060027/
• 关键词: RAPL; Rap1; リンパ球ホーミング; ケモカイン; インテグリン; 血管内皮; LFA-1; ICAM-1

リンパ球の全身性動態制御は獲得免疫の基盤として免疫自己の維持に不可欠である。本研究では、インテグリン接着を制御するRap1シグナルによるリンパ球の血管内皮接着と組織内移動のメカニズムに焦点をあてて、リンパ球動態の分子基盤を明らかにする。生体内の血管内皮接着や組織内移動をin vivo imagingし、そのメカニズムがどのように機能しているかin vitroで再現し明らかにする。本年度は、リンパ節内高内皮細静脈(HEV)にRap1が停止接着に必須であることを明らかにした。Rapla/RaplbをshRNAによってknockdownすると、ローリングには影響しないが、停止を阻害した。一方、タリン、RAPL, Mst1のノックダウン及びノックアウトは、ケモカインによるローリンングから停止接着は正常であったが、安定した接着が阻害され、数分以内にHEVから脱落した。これらの結果からLFA-1/ICAM-1を介する血管内皮への接着は一秒以内におこる停止接着から安定した接着ヘシグナル依存的に制御されることが初めて明らかになった。これらのシグナルがインテグリン細胞内領域、特に前年度明らかにしたbeta2/W747の領域にどのようなに作用するか今後明らかにしたい。リンパ組織内移動について、in vivo, ex vivoでリンパ球組織内移動を2光子レーザー顕微鏡で追跡する系を確立し、RAPL-/-, Mst1-/-Tリンパ球の移動速度や距離が約50%低下していることを明らかにした。インテグリン阻害によるの移動の低下は約30%であることから、RAPL/Mst1による細胞極性制御が細胞内移動に重要であることが示唆された。またリンパ節ストローマ細胞を単離し解析した結果、ストローマ細胞がin vitroで活発なナイーブリンパ球移動を誘導することから、ストローマ細胞依存的移動の重要性が明らかになった。以上の結果から、Rap1, RAPL, Mst1が生体内リンパ球動態を調節していることが示された。RAPL-/-, Mst1-/-マウスは自己免疫様疾患を発症することから、動態異常と自己寛容の破綻がどのような因果関係にあるのか、今後明らかにしたい。

淋巴细胞的全身动力学调节对于维持免疫系统作为获得免疫的基础至关重要。这项研究的重点是淋巴细胞内皮粘附的机制和通过RAP1信号对淋巴细胞的组织迁移，该信号调节整联蛋白粘附，揭示了淋巴细胞动力学的分子基础。进行器官内血管内皮粘附和组织迁移的体内成像，以及该机制在体外和揭示中的作用。今年，我们透露，RAP1对于停止淋巴结高内皮静脉（HEVS）的粘附至关重要。 Rapla/Raplb用ShRNA的甲板不会影响滚动，但会抑制停止。同时，塔林，RAPL和MST1的敲低和淘汰赛在停止与趋化因子滚动的粘附方面是正常的，但是稳定的粘附受到了抑制，并且在几分钟内掉落了HEV。这些结果首次表明，LFA-1/ICAM-1对血管内皮的粘附受到稳定的，透明度依赖性的方式，从一秒钟内发生的停止粘附。我们想澄清将来这些信号如何影响整联蛋白细胞区域，尤其是去年揭示的Beta2/W747区域。关于淋巴组织迁移，我们建立了一个系统，使用两光子激光显微镜在体内和体内跟踪淋巴细胞组织的迁移，揭示了RAPL - / - / - / - / - / - / - / - T淋巴细胞的迁移速度和距离大约减少了约50％。整联蛋白抑制引起的迁移减少约为30％，这表明RAPL/MST1的细胞极性调节对于细胞内迁移很重要。此外，随着基质细胞在体外诱导活跃的天真淋巴细胞迁移，淋巴结基质细胞的分离和分析揭示了基质细胞依赖性迁移的重要性。以上结果表明，RAP1，RAPL和MST1在体内调节淋巴细胞动力学。由于Rapl - / - 和MST1 - / - 小鼠患有自身免疫性疾病，因此我们想澄清动力学异常与自我忍受分解之间的因果关系是什么样的。

项目成果

Rap1-RAPLによるインテグリン制御とリンパ球動態

Rap1-RAPL 的整合素调节和淋巴细胞动力学

• 发表时间: 2008
• 期刊: 実験医学 26(14)
• 作者: Katakai T;Suto H;Sugai M;Gonda H;Togawa A;Suematsu S;Ebisuno Y;Katagiri K;Kinashi T;Shimizu A.;木梨達雄
• 通讯作者: 木梨達雄

Mst1 controls lymphocyte trafficking and interstitial motility within lymph nodes

• DOI: 10.1038/emboj.2009.82
• 发表时间: 2009-05-06
• 期刊: EMBO JOURNAL
• 影响因子: 11.4
• 作者: Katagiri, Koko;Katakai, Tomoya;Kinashi, Tatsuo
• 通讯作者: Kinashi, Tatsuo

Regulation of lymphocyte trafficking by RAPL and Mst1 signaling

RAPL 和 Mst1 信号传导调节淋巴细胞运输

• 发表时间: 2009
• 作者: Katakai T;Suto H;Sugai M;Gonda H;Togawa A;Suematsu S;Ebisuno Y;Katagiri K;Kinashi T;Shimizu A.;木梨達雄;Kinashi T.
• 通讯作者: Kinashi T.

Organizer-like reticular stromal cell layer common adult secondary lymphoid organs

组织者样网状基质细胞层常见成人次级淋巴器官

• 发表时间: 2008
• 期刊: J.Immunol. 181
• 作者: T. Katakai ;H. Suto;M. Sugai;H. Gonda;A.Togawa ;S. Suematsu;Y. Ebisuno;K. Katagiri;T. Kinashi;A. Shimizu
• 通讯作者: A. Shimizu

CXCL13production by an established lymph node stromal cell via lymphotoxin-beta receptor engagement involves the cooperation of multiple signaling pathways

已建立的淋巴结基质细胞通过淋巴毒素-β 受体参与产生 CXCL13，涉及多个信号通路的配合

• 发表时间: 2009
• 期刊: Int Immunol. 21(4)
• 作者: Suto H;Katakai T;Sugai M;Kinashi T;Shimizu A.
• 通讯作者: Shimizu A.