Rap1シグナルによるリンパ球動態の制御機構

Rap1信号控制淋巴细胞动力学的机制

• 批准号: 20060027
• 负责人: 木梨 達雄
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20060027/
• 关键词: RAPL; Rap1; リンパ球ホーミング; ケモカイン; インテグリン; 血管内皮; LFA-1; ICAM-1

リンパ球の全身性動態制御は獲得免疫の基盤として免疫自己の維持に不可欠である。本研究では、インテグリン接着を制御するRap1シグナルによるリンパ球の血管内皮接着と組織内移動のメカニズムに焦点をあてて、リンパ球動態の分子基盤を明らかにする。生体内の血管内皮接着や組織内移動をin vivo imagingし、そのメカニズムがどのように機能しているかin vitroで再現し明らかにする。本年度は、リンパ節内高内皮細静脈(HEV)にRap1が停止接着に必須であることを明らかにした。Rapla/RaplbをshRNAによってknockdownすると、ローリングには影響しないが、停止を阻害した。一方、タリン、RAPL, Mst1のノックダウン及びノックアウトは、ケモカインによるローリンングから停止接着は正常であったが、安定した接着が阻害され、数分以内にHEVから脱落した。これらの結果からLFA-1/ICAM-1を介する血管内皮への接着は一秒以内におこる停止接着から安定した接着ヘシグナル依存的に制御されることが初めて明らかになった。これらのシグナルがインテグリン細胞内領域、特に前年度明らかにしたbeta2/W747の領域にどのようなに作用するか今後明らかにしたい。リンパ組織内移動について、in vivo, ex vivoでリンパ球組織内移動を2光子レーザー顕微鏡で追跡する系を確立し、RAPL-/-, Mst1-/-Tリンパ球の移動速度や距離が約50%低下していることを明らかにした。インテグリン阻害によるの移動の低下は約30%であることから、RAPL/Mst1による細胞極性制御が細胞内移動に重要であることが示唆された。またリンパ節ストローマ細胞を単離し解析した結果、ストローマ細胞がin vitroで活発なナイーブリンパ球移動を誘導することから、ストローマ細胞依存的移動の重要性が明らかになった。以上の結果から、Rap1, RAPL, Mst1が生体内リンパ球動態を調節していることが示された。RAPL-/-, Mst1-/-マウスは自己免疫様疾患を発症することから、動態異常と自己寛容の破綻がどのような因果関係にあるのか、今後明らかにしたい。

Youdaoplaceholder0 パ パ the ball <s:1> full-body dynamic control obtain immunity <s:1> base と て immunize itself て maintain に without any deficiency である. This study で は, イ ン テ グ リ ン then を suppression す る Rap1 シ グ ナ ル に よ る リ ン パ ball の endothelial then と tissues の メ カ ニ ズ ム に focus を あ て て, リ ン パ ball dynamic の molecular base plate を Ming ら か に す る. Born in vivo の endothelial then mobile を や tissues in vivo imaging し, そ の メ カ ニ ズ ム が ど の よ う に function し て い る か in vitro で reappearance し Ming ら か に す る. This year は, リ ン パ section high endothelial fine vein (HEV) に Rap1 が stop then に must で あ る こ と を Ming ら か に し た. Rapla/Raplb を shRNA に よ っ て knockdown す る と, ロ ー リ ン グ に は influence し な い が, stop を resistance against し た. Party, タ リ ン, RAPL Mst1 の ノ ッ ク ダ ウ ン and び ノ ッ ク ア ウ ト は, ケ モ カ イ ン に よ る ロ ー リ ン ン グ か ら stop then は normal で あ っ た が, stable し た then が resistance against さ れ, several points に HEV か ら off し た. Results こ れ ら の か ら LFA - 1 / ICAM - 1 を interface す る endothelial へ の then は a seconds に お こ る stop then か ら settle し た then ヘ シ グ ナ ル dependent に suppression さ れ る こ と が early め て Ming ら か に な っ た. こ れ ら の シ グ ナ ル が イ ン テ グ リ ン cell areas, special に before annual Ming ら か に し た beta 2 / W747 の field に ど の よ う な に role す る か ら Ming future か に し た い. リ ン パ tissues mobile に つ い て, in vivo and ex vivo で リ ン パ goals within the organization moving を two photon レ ー ザ ー 顕 micromirror で tracing す る を established し, RAPL - / -, Mst1 - / - T リ ン パ の ball movement speed や low about 50% from が し て い る こ と を Ming ら か に し た. イ ン テ グ リ ン resistance against に よ る の mobile の is low about 30% で は あ る こ と か ら, RAPL/Mst1 に よ る cell polarity suppression が cellular mobile に important で あ る こ と が in stopping さ れ た. Section ま た リ ン パ ス ト ロ ー マ cells を 単 from し parsing し た results, ス ト ロ ー が マ cells in vitro で live 発 な ナ イ ー ブ リ ン パ ball mobile を induced す る こ と か ら, ス ト ロ ー マ dependent cell importance の が Ming ら か に な っ た. の above results か ら, Rap1 RAPL, Mst1 が born in vivo リ ン パ ball dynamic を adjust し て い る こ と が shown さ れ た. RAPL - / -, Mst1 - / - マ ウ ス は himself immune others diseases を 発 disease す る こ と か ら flaw, dynamic abnormal と oneself understanding let の が ど の よ う な causal masato is に あ る の か, future Ming ら か に し た い.

项目成果

Rap1-RAPLによるインテグリン制御とリンパ球動態

Rap1-RAPL 的整合素调节和淋巴细胞动力学

• 发表时间: 2008
• 期刊: 実験医学 26(14)
• 作者: Katakai T;Suto H;Sugai M;Gonda H;Togawa A;Suematsu S;Ebisuno Y;Katagiri K;Kinashi T;Shimizu A.;木梨達雄
• 通讯作者: 木梨達雄

Mst1 controls lymphocyte trafficking and interstitial motility within lymph nodes

• DOI: 10.1038/emboj.2009.82
• 发表时间: 2009-05-06
• 期刊: EMBO JOURNAL
• 影响因子: 11.4
• 作者: Katagiri, Koko;Katakai, Tomoya;Kinashi, Tatsuo
• 通讯作者: Kinashi, Tatsuo

Regulation of lymphocyte trafficking by RAPL and Mst1 signaling

RAPL 和 Mst1 信号传导调节淋巴细胞运输

• 发表时间: 2009
• 作者: Katakai T;Suto H;Sugai M;Gonda H;Togawa A;Suematsu S;Ebisuno Y;Katagiri K;Kinashi T;Shimizu A.;木梨達雄;Kinashi T.
• 通讯作者: Kinashi T.

Lymphocyte adhesion cascade regulated by Rap1 signaling

Rap1 信号传导调节淋巴细胞粘附级联

• 发表时间: 2008
• 作者: Katakai T;Suto H;Sugai M;Gonda H;Togawa A;Suematsu S;Ebisuno Y;Katagiri K;Kinashi T;Shimizu A.;木梨達雄;Kinashi T.;Kinashi T.;Kinashi T
• 通讯作者: Kinashi T

CXCL13production by an established lymph node stromal cell via lymphotoxin-beta receptor engagement involves the cooperation of multiple signaling pathways

已建立的淋巴结基质细胞通过淋巴毒素-β 受体参与产生 CXCL13，涉及多个信号通路的配合

• 发表时间: 2009
• 期刊: Int Immunol. 21(4)
• 作者: Suto H;Katakai T;Sugai M;Kinashi T;Shimizu A.
• 通讯作者: Shimizu A.