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マイクロアレイ法を用いたTh1,Th2型免疫応答の分類化と免疫疾患の病態解析

利用微阵列方法进行Th1和Th2型免疫反应的分类及免疫疾病的病理分析

基本信息

批准号：
12204015
负责人：
幸田敏明
金额：
--
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12204015/
关键词：
ヘルパーT細胞 Th1 Th2 遺伝子発現 DNAアレイ免疫疾患

项目摘要

Th1またはTh2主導の免疫応答が各種免疫疾患の異なる病態を引き起こしていると考えられている。我々はマウスのTh1、Th2細胞及び免疫疾患モデルを用いてTh1あるいはTh2主導の免疫応答における典型的な遺伝子発現パターンを明らかにし、ヒトの免疫疾患の病態解析に応用しようと考えた。まずはじめにT細胞レセプタートランスジェニックマウス(DO11.10)の脾細胞から純粋なTh1、Th2細胞を調整し、そのRNAを用いてTh1、Th2細胞に特異的な遺伝子発現を、DNAマイクロアレイ法を用いて調べた。この結果、約8700個の遺伝子のうちTh1に特異的に発現するものとして82個、Th2に特異的なものとして52個の遺伝子が同定された。このほか、Representational Difference Analysis(RDA法)においても19個の遺伝子がTh1あるいはTh2に特異的な遺伝子として同定された。これらの解析結果をもとに約150の遺伝子を選択して、RT-PCRにより平均500bpの長さのcDNA断片をそれぞれクローン化した。これを用いてTh1、Th2細胞に特異的な遺伝子発現を検出するための独自のDNAアレイフィルターを作製した。次に、マウスのTh1、Th2細胞から抽出したRNAを用いて、このアレイフィルターがTh1/Th2細胞に特異的な遺伝子発現を検出するのに有効であることを確認した。現在、マウスの免疫疾患モデルのリンパ球を材料にして、このDNAアレイフィルターを用いて生体内におけるTh1型あるいはTh2型免疫応答の類型化作業を行っている。平成12年度中にはマウスの結果をふまえて、改良したヒト用のフィルターを作製し、免疫疾患患者の臨床材料を用いた病態解析を進めていく。

Th1 is responsible for immunizing all kinds of immune diseases, diseases and diseases. We detected Th1, Th2 cells and immune diseases by using the Th2 leader of Th1 immune diseases to answer the typical immune diseases. The spleen cells (DO11.10), the spleen cells, the Th1 cells, the Th2 cells, the RNA cells, the Th1 cells, the Th2 cells, the cells. According to the results of the test, there were 82 in Th1 and 52 in Th2 in the same cluster. The license, Representational Difference Analysis (RDA method), and the RDA method are the same as those of the Th2 special license, which are the same as those of the 19 customers. The results of this analysis show that the average 500bp length of the cDNA fragments is much longer than that of the RT-PCR and the average length of the cDNA fragments is much longer than that of the control. You can use the special Th1 and Th2 cell computers to find out that you are not alone. You are not alone. You are not allowed to do this. The second, the second, the Th1, the Th2 cell, the second, the second, the Now, in the case of immune diseases, we need to know that the materials and materials of the immune disease have not been detected, and that the DNA has been changed to Th2-type immune response type in vivo. In the middle of Pingcheng, the results showed that the patients with immune diseases were tested by pathological analysis, and the clinical materials of patients with immune diseases were tested by pathological analysis.