ギャップ結合による肝がん発生の抑制メカニズム

间隙连接抑制肝癌发展的机制

• 批准号: 12215124
• 负责人: 小島 隆
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215124/
• 关键词: 肝発がん; ギャップ結合; タイト結合; 細胞分化

我々は,ギャップ結合とくにCx32が肝がん発生を抑制するメカニズムを解明するために,Cx32欠損マウスを用いて,Cx32と肝細胞の増殖および分化に焦点を絞ってin vivoおよびin vitroで検討した。In vivoの実験では,部分肝切除後,Cx32欠損マウスではwild typeマウス(C57BL/6)と比較して肝細胞の増殖抑制がみられた。Cx32欠損マウスの発がん物質投与実験より,Cx32欠損マウスはwild typeマウスと比較して肝腫瘍の増加がみられた。In vitroの実験では,まず初代培養ラット肝細胞の解析結果から,肝細胞に発現しているギャップ結合蛋白であるCx32とCx26のうち,Cx32が上皮の分化の指標のひとつであり細胞の極性に関与しているタイト結合と密接な関係があることが分かった。次に,Cx32欠損マウスの初代培養肝細胞の解析結果から,Cx32欠損マウスの肝細胞の増殖度の明らかな増加がみられた。さらに,Cx32欠損マウスの初代培養肝細胞から継代培養により肝細胞株を樹立し,この細胞株にCx32遺伝子を再導入した結果,タイト結合の誘導およびアクチン形成の増強がみられ,分化の亢進が認められた。以上のことより,Cx32が肝がん発生を抑制するメカニズムとしては,Cx32の発現およびそれを介した細胞間コミュニケーションが,肝細胞の増殖だけでなく分化をも調節している可能性が考えられた。

I 々 は, ギ ャ ッ プ combining と く に Cx32 が liver が ん 発 raw を inhibit す る メ カ ニ ズ ム を interpret す る た め に, Cx32 owe loss マ ウ ス を with い て, Cx32 と hepatocellular の raised colonization お よ に び differentiation focus を ground っ て in vivo お よ び in vitro で beg し 検 た. The In vivo の be 験 で は, after partial liver resection, Cx32 owe loss マ ウ ス で は wild type マ ウ ス (C57BL / 6) と comparative し て liver cells inhibit が の raised colonization み ら れ た. Cx32 owe loss マ ウ ス の 発 が ん material cast and be 験 よ り, Cx32 owe loss マ ウ ス は wild type マ ウ ス と compare し て liver abscess were swollen の raised plus が み ら れ た. In Vitro の be 験 で は, ま ず original culture ラ ッ ト hepatocellular の analytical results か ら, liver cell に 発 now し て い る ギ ャ ッ プ binding protein で あ る Cx32 と Cx26 の う ち, Cx32 が epithelial differentiation の の index の ひ と つ で あ の り cell polarity に masato and し て い る タ イ ト combining と contact な masato is が あ る こ と が points か っ た. に, Cx32 owe loss マ ウ ス の original analytical results develop hepatocellular の か ら, Cx32 owe loss マ ウ ス の hepatocellular の raised colonization degrees の Ming ら か な raised plus が み ら れ た. さ ら に, Cx32 owe loss マ ウ ス の original culture hepatocytes か ら 継 generation develop に よ り liver cell lines を establish し, こ の cell lines に Cx32 posthumous son 伝 を to import し た results, タ イ ト combining の induced お よ び ア ク チ ン form の raised strong が み ら れ, differentiation の hyperthyroidism が recognize め ら れ た. Above の こ と よ り, Cx32 が liver が ん 発 raw を inhibit す る メ カ ニ ズ ム と し て は, Cx32 の 発 now お よ び そ れ を interface し た intercellular コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン が, liver cell の raised colonization だ け で な く differentiation を も adjust し て い る possibility が exam え ら れ た.

项目成果

Kojima T. et al.: "Cx32 but not Cx26 is associated with tight junctions in primary cultures of rat hepatocytes."Exp.Cells Res.. 263. 193-201 (2001)

Kojima T. 等人：“Cx32 但不是 Cx26 与大鼠肝细胞原代培养物中的紧密连接相关。”Exp.Cells Res.. 263. 193-201 (2001)

Takakuwa R. et al.: "Uncoupling of gate and fence functions of MDCK cells by the actin depolymerizaing reagent mycalolide B."Exp.Cell Res.. 257. 238-244 (2000)

Takakuwa R. 等人：“通过肌动蛋白解聚试剂 mycalolide B 解偶联 MDCK 细胞的门和栅栏功能。”Exp.Cell Res.. 257. 238-244 (2000)

Kojima,T. et al.: "Occludin and claudin-1 concentrate in the midbody of immortalized mouse hepatocytes during cell division."J.Histochem.Cytochem.. 49. 333-339 (2001)

小岛，T.

Kojima T. et al.: "Gap junction expression and function in primary cultures of Cx32 deficient (KO) mouse hepatocytes."Am.J.Physiol.. (印刷中).

Kojima T. 等人：“Cx32 缺陷 (KO) 小鼠肝细胞原代培养物中的间隙连接表达和功能。”Am.J.Physiol..（出版中）。

Kojima T. et al.: "In The Liver : Biology and Pathology, 4th edn (ed.I.M.Arias,J.L.Boyer,N.Fausto,W.B.Jakoby,D.Schachter,D.A.Shafritz) Raven Press,NY."Gap and tight junctions i liver : composition, regulation and function.(印刷中).

Kojima T. 等人：“肝脏：生物学和病理学，第 4 版（ed.I.M.Arias、J.L.Boyer、N.Fausto、W.B.Jakoby、D.Schachter、D.A.Shafritz）Raven Press，纽约。”差距和紧密肝脏连接处：组成、调节和功能。（正在出版）。