ギャップ結合による肝がん発生の抑制メカニズム

间隙连接抑制肝癌发展的机制

• 批准号: 13216083
• 负责人: 小島 隆
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216083/
• 关键词: ギャップ結合; タイト結合; 肝細胞; 増殖; 分化; シグナル伝達

ギャップ結合とくにCx32が肝がん発生を抑制するメカニズムを解明するために,今回我々は,培養肝細胞を用いて、Cx32と肝細胞の増殖および分化に焦点を絞って検討した。さらに肝細胞の増殖あるいは増殖抑制に重要な役割をもち、ギャップ結合蛋白の発現調節にも関与する可能性があるMAPK,PI3K,p38MAPKによるシグナル伝達経路においても同様にin vitroで検討した。1.ギャップ結合の肝細胞の増殖および分化への関与の解析Cx32ノックアウトマウスから作製した初代培養肝細胞、さらにその細胞を継代により不死化させ、ヒトCx32を遺伝子導入した肝細胞株を用いて解析した結果、Cx32ノックアウトマウスの初代培養肝細胞では、正常マウスと比較してstress actinおよび細胞増殖度の増加がみられた。Cx32遺伝子導入肝細胞株では、増殖抑制はみられないものの、上皮分化の指標であるタイト結合蛋白およびその機能の増加、circumfential actin形成の増強も認められた。このタイト結合の発現誘導は、Cx32変異遺伝子、Cx26およびCx43遺伝子の導入ではみられず、コミュニケーション阻害薬剤でも抑制が認められた。以上の結果は、Cx32の発現およびそのコミュニケーション能は、正常肝細胞では増殖よりむしろ分化に密接に関与している可能性が考えられた。2.シグナル伝達によるギャップ結合の発現調節機構の解析ギャップ結合高発現初代培養ラット肝細胞を用いて,増殖刺激のオンオフによるin vitro再生肝モデルを作製し,シグナル伝達経路であるMAPK,PI3K,p38MAPKの各inhibiter(PD98059,LY294002,SB23850)を処置した結果、増殖刺激によるギャップ結合の発現および機能の変化は、MAPKおよびp38MAPK経路で調節されていることが明らかになった。

ギ ャ ッ プ combining と く に Cx32 が liver が ん 発 raw を inhibit す る メ カ ニ ズ ム を interpret す る た め に, now back to my 々 は, develop hepatocellular を with い て, Cx32 と hepatocellular の raised colonization お よ に び differentiation focus を ground っ て beg し 検 た. さ ら に hepatocellular の raised colonization あ る い は raised important な colonization inhibit に service cut を も ち, ギ ャ ッ プ binding protein の 発 now adjust に も masato and す る possibility が あ る MAPK, PI3K, p38MAPK に よ る シ グ ナ ル 伝 da 経 road に お い て も with others に in vitro で beg し 検 た. 1. ギ ャ ッ プ combining の hepatocellular の raised colonization お よ び differentiation へ の masato and analytical Cx32 の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス か ら cropping し た early generation of liver cells, さ ら に そ の cells を 継 generation に よ り die change さ せ, ヒ ト Cx32 を heritage 伝 son import し た liver cell lines を with い て parsing し た results, Cx32 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の original culture Hepatocytes で で and normal ウスと compared with <s:1> てstress actinおよび, the proliferation of および increased がみられた. Cx32 posthumous son 伝 import liver cell lines で は, raised colonization suppression は み ら れ な い も の の, epithelial differentiation の で あ る タ イ ト binding protein お よ び そ の function の raised addition, circumfential actin to form strong の raised も recognize め ら れ た. こ の タ イ ト combining の 発 induced は, Cx32 now - different heritage 伝, Cx26 お よ び Cx43 posthumous son 伝 の import で は み ら れ ず, コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン resistance against 薬 tonic で も inhibit が recognize め ら れ た. の above results は, Cx32 の 発 now お よ び そ の コ ミ ュ ニ ケ ー シ ョ ン は, normal liver cell で は raised colonization よ り む し ろ differentiation に contact に masato and し て い る possibility が exam え ら れ た. 2. シ グ ナ ル 伝 da に よ る ギ ャ ッ プ combining の 発 now adjusting mechanism の parsing ギ ャ ッ プ combined with high 発 now original training ラ ッ を ト liver cells with い て, raised colonization stimulus の オ ン オ フ に よ る in Vitro regenerative liver モ デ ル を as し, シ グ ナ ル 伝 da 経 road で あ る MAPK, PI3K, p38MAPK の the inhibiter (PD98059, LY294002, SB23850) を 処 buy し た results, raised colonization stimulation に よ る ギ ャ ッ プ combining の 発 now お よ び function の - は, MAPK お Youdaoplaceholder0 p38MAPK pathway で modulates されて る る とが とが brightness ら る になった になった.

项目成果

Ichimiya S.: "p73 is expressed in human thymic epithelial cells"J.Histochem.Cytochem.. (In press).

Ichimiya S.：“p73 在人胸腺上皮细胞中表达”J.Histochem.Cytochem..（正在出版）。

Kojima T.: "expression and cell proliferation in differentiating cultures of Cx32 KO mouse hepatocytes."Am. J. Physiol.. 281. G1004-G1013 (2001)

Kojima T.：“Cx32 KO 小鼠肝细胞分化培养物中的表达和细胞增殖。”Am。

Kojima T.: "In The Liver:Biology and Pathobiology,4th edn(ed.I.M.Arias,J.L.Boyer,N.Fausto,W.B.Jakoby,D.Schachter,D.A.Shafritz)Lippincott Williams&Wilkins,PA"Gap and tight junctions in liver:composition,regulation and function. 1064 (2001)

小岛T.：“肝脏：生物学和病理学，第四版（编辑I.M.Arias，J.L.Boyer，N.Fausto，W.B.Jakoby，D.Schachter，D.A.Shafritz）Lippincott Williams

Kojima T.: "Occludin and claudin-1 concentrate in the midbody of immortalized mouse hepatocytes during cell division"J. Histochem. Cytochem.. 49. 333-339 (2001)

Kojima T.：“Occludin 和 Claudin-1 在细胞分裂过程中集中在永生化小鼠肝细胞的中体”J.

Kojima T.: "Growth-suppressive function of human connexin32 in a conditional immortalized mouse hepatocyte cell line"In vitro Cell. Dev. Biol. Anim.. 37. 589-598 (2001)

Kojima T.：“人连接蛋白32在条件永生化小鼠肝细胞系中的生长抑制功能”体外细胞。