アポトーシス制御にかかわる新規蛋白質の探査

寻找参与细胞凋亡调节的新蛋白质

• 批准号: 12217051
• 负责人: 須田 貴司
• 金额: $ 10.05万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217051/
• 关键词: アポトーシス; ミトコンドリア; Bid; DR6; DR6リガンド; yeast-two-hybrid; チトクロムc; 単クローン抗体; VDAC; リボザイム

新たな抗がん剤や癌治療法の標的分子を探索する目的で、アポトーシス制御に係る新規蛋白質の探索を行った。昨年度樹立したシトクロームcを高感度に検出するELISA系を用い、新たに樹立した抗ミトコンドリア抗体産生ハイブリドーマ450株の産生する抗体について、ミトコンドリアからのチトクロムC放出促進、或いは抑制作用があるかを検討した。しかし、そのような抗体は得られなかった。また、ミトコンドリアからのチトクロムc放出を誘導するアポトーシス促進性BcI-2ファミリーに属するBid蛋白と相互作用する分子をyeast-two-hybrid法によって探索した。human T Iymphoma, Fetal Liver, BrainのcDNAライブラリーよりBidと結合しうる因子をコードするcDNA断片を12種類得た。このうち2種類について動物細胞内でのBidとの結合が確認できた。また、Bidで誘導されるapoptosisを抑制する作用が認められた。これらの分子について、さらに詳細な解析を行っている。新規デス受容体様分子DR6を種々の動物細胞に導入し、その機能を検討した。報告されているようなアポトーシスの誘導は全長のDR6では認められなかったが、NF-kBの弱い活性化が認められた。さらに、抗DR6抗体を作成しDR3分子を架橋しても、アポトーシスの誘導は認められなかった。また、DR6-Fc融合蛋白を調整し、この分子に特異的に結合する細胞表面分子を発現する細胞株を特定した。この分子はDR6リガンドである可能1性があり、現在その同定を試みている。

New target molecules for anti-cancer therapy are being explored for the purpose of developing new protein systems for cancer control. In the past year, the ELISA system has been established to detect high sensitivity of C. The new ELISA system has been established to produce anti-C antibodies. The production of anti-C antibodies has been discussed.しかし、そのような抗体は得られなかった。A yeast-two-hybrid approach to molecular interactions between BcI-2 and BcI-2 is proposed. Human T lymphocyte, Fetal Liver, Brain cDNA fragments were obtained from 12 species. 2 kinds of animal cells are identified. It is important to recognize the role of induction and inhibition. This is the first time that we've seen this. The new receptor molecule DR6 is introduced into animal cells and its function is discussed. Report on the induction of DR6, NF-kB and its weak activation In addition, anti-DR6 antibodies are formed, DR3 molecules are bridged, and the induction of apoptosis is no longer recognized. The DR6-Fc fusion protein regulates the expression of molecules specific to cell surface molecules. This molecule is DR 6. It is possible to determine the identity of the molecule. It is possible to determine the identity of the molecule.

项目成果

Naozumi Ishimaru: "Possible role of organ-specific autoantigen for Fas ligand-mediated activation-induced cell death in murine Sjogren's syndrome"J. Immunol.. 167. 6031-6037 (2001)

Naozumi Ishimaru：“器官特异性自身抗原在小鼠干燥综合征中 Fas 配体介导的激活诱导的细胞死亡中的可能作用”J.

Masayuki Fujino: "In vitro prevention of cell-mediated xeno-graft rejection via theFas/FasL-pathway in CrmA-transducted porcine kidney cells"Xenotransplantation. 8. 115-124 (2001)

Masayuki Fujino：“在 CrmA 转导的猪肾细胞中通过 Fas/FasL 途径体外预防细胞介导的异种移植排斥”异种移植。

Koyo Shudo: "The membrane-bound but not the soluble form of human Fas ligand is responsible for its inflammatory activity"Eur. J. Immunol.. 31. 2504-2511 (2001)

Koyo Shudo：“人 Fas 配体的膜结合形式而非可溶形式是其炎症活性的原因”Eur。

Hidehiro Fukuyama: "Requirement of Fas expression in B cells for tolerance induction"Eur. J. Immunol.. 32. 223-230

Hidehiro Fukuyama：“B 细胞中 Fas 表达对于耐受诱导的要求”Eur。

Koyo Shudo: "The membrane-bound but not the soluble form of human Fas ligand is responsible for its inflammatory activity"Eur.J.Immunol.. (発表予定).

Koyo Shudo：“人 Fas 配体的膜结合形式而非可溶形式是其炎症活性的原因”Eur.J.Immunol..（待提交）。