ヒトがん関連遺伝子導入ハエを用いたがん治療薬の新規分子標的と新規抗がん剤の探索

利用转染人类癌症相关基因的果蝇寻找癌症治疗的新分子靶点和新的抗癌药物

• 批准号: 12217176
• 负责人: 山口 政光
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217176/
• 关键词: GAL4-UAS標的発現系; p53; crumbs; 遺伝子導入ハエ; NPM-MLF1; TAF-1β; SET-CAN; armadillo; shotgun

GAL4-UAS標的発現系を用いて、ヒトp53をショウジョウバエ複眼原基で発現させると細胞のG1期停止とアポトーシスの誘導がおこり、その結果として複眼の著しい形態異常(rough eye表現型)を引き起こす。このrough eye表現型を抑圧または、増強する突然変異をスクリーニングすることにより、p53の標的遺伝子や、p53機能の修飾遺伝子の同定が可能となる。これまでに、ショウジョウバエcrumbs遺伝子のコピー数の半減が、ヒトp53の発現により誘導されるrough eye表現型を増強することを見いだしていた。TUNEL法による解析で、crumbs遺伝子コピー数を半減させると、p53過剰発現により誘導される複眼原基でのアポトーシスがさらに増強されることがわかった。crumbsタンパク質は細胞のadherens junctionの形成に必須であることから、突然変異体との交配により、adherens junctionの他の構成因子、shotgun(E-cadherinのショウジョウバエホモログ)遺伝子やarmadillo(β-cateninのショウジョウバエホモログ)遺伝子コピー数を半減させてみたが、これらの場合も同様のrough eye表現型の増強が見られた。また、GAL4結合サイト(UAS)を持つプロモーターの支配下に、骨髄性白血病において見出された転座型融合遺伝子NPM-MLF1(奈良先端大・加藤規子博士より供与)あるいはTAF-Iβ/SET-CAN(東工大・永田恭介博士より供与)を置き、P-エレメントベクターに挿入後、受精卵に微量注入し、遺伝子導入ハエ系統を新たに樹立した。

The system of GAL4-UAS was used to make a copy of the original gene. The cell cycle stopped in the G1 phase. The results showed that the morphology of the complex eye was normal (rough eye table type). According to the rough eye table type, the suppression effect, the strength test, the sensitivity test, the p53 marker, the p53 marker, and the p53 machine can be used to determine the same possibility. Please tell me that the number of crumbs children is half, that is, p53 will show that the rough eye table is in good shape, and that the data in the rough eye table will be displayed. The analysis of TUNEL method, the number of crumbs subsets and the detection of p53 were used to detect the expression of DNA in the primordia of the eyes. It is necessary for the crumbs gene to form a cell that needs to be mating, suddenly mating, adherens junction, shotgun (E-cadherin gene), armadillo (β-catenin gene), the number of children, the number of children, the number The TAF-I β

项目成果

Izumi,M., et al.: "Transcription of the catalytic 180-kDa subunit gene of mouse DNA polymerase α is controlled by E2F, and Ets-related ......"Biochem.Biophys.Acta.. 1492. 341-352 (2000)

Izumi,M., 等人：“小鼠 DNA 聚合酶 α 的催化 180-kDa 亚基基因的转录受 E2F 控制，并且 Ets 相关......”Biochem.Biophys.Acta.. 1492. 341 -352 (2000)

Ohno,K., et al.: "Characterization of a Drosophila homologue of the human myelodysplasia/myeloid leukemia factor(MLF)."Gene. 260. 133-143 (2000)

Ohno,K. 等人：“人类骨髓增生异常/骨髓性白血病因子 (MLF) 果蝇同源物的表征。”基因。

Inoue,Y.H., et al.: "Orbit,a novel microtubule-associated protein essential for mitosis in Drosophila."J.Cell Biol.. 149. 153-165 (2000)

Inoue, Y.H., et al.：“Orbit，果蝇有丝分裂所必需的新型微管相关蛋白。”J.Cell Biol.. 149. 153-165 (2000)

Oshige,M.,, et al.: "Molecular cloning and expression during development of the Drosophila gene for the catalytic subunit of DNA polymerase ε."Gene. 256. 93-100 (2000)

Oshige, M., 等人：“DNA 聚合酶 ε 催化亚基的果蝇基因发育过程中的分子克隆和表达。”基因 256. 93-100 (2000)

Kwon,E.-J., et al.: "Transcriptional regulation of the Drosophila raf proto-oncogene by D-STAT durimg development and immune response."J.Biol.Chem.. 275. 19824-19830 (2000)

Kwon,E.-J., et al.：“D-STAT 在发育和免疫反应过程中对果蝇 raf 原癌基因的转录调节。”J.Biol.Chem.. 275. 19824-19830 (2000)