ショウジョウバエPCNA/DNAポリメラ-ゼδ補助タンパク遺伝子の機能と発現調節

果蝇PCNA/DNA聚合酶δ辅助蛋白基因的功能及表达调控

• 批准号: 01639514
• 负责人: 山口 政光
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01639514/
• 关键词: ショウジョウバエ; PCNA; ホメオドメインタンパク; プロモ-タ-; 発現調節; DNA複製; 形能形成; CATアッセイ

(1)ショウジョウバエPCNA遺伝子の塩基配列の解析から5′上流域にホメオドメインタンパクの結合コンセンサス配列が存在していることを明らかにした。またプライマ-伸長法により転写開始点を決定した。プロモ-タ-領域にはTATAボックスやCAATポックスは存在せず、哺乳動物遺伝子に見られるGCボックスに類似の配列が存在している。(2)大腸菌におい合成したショウジョウバエホメオドメインタンパクがin vitroで実際に上記の配列に結合することをフットプリント法を用いて明らかにした。(3)PCNA遺伝子5′上流域をクロラムフェニコ-ル(CAT)遺伝子に連結し、ショウジョウバエ培養細胞kc細胞に導入すると、CATの強い発現がみられた。一方、ショウジョウバエホメオドメインタンパクのひとつであるzerknulltタンパク発現プラスミドを同時導入するとCAT発現の抑制がみられた。(4)胚から成虫に至るまで、PCNAmRNAは存在しているが、特に初期胚で高く発現し、また、未受精卵にも高いことから、主に母性mRNAとして蓄えられていることを、ノ-ザン法により明らかにした。以上本年度は主にPCNA遺伝子発現調節について種々の知見を得た。特に(1)〜(3)の知見は、形態形成をつかさどるホメオボックス遺伝子が、分化形質遺伝子のみならずPCNA遺伝子のようなDNA複製に関与する遺伝子の発現も制御している可能性を示し、分化と増殖の関係を考えるうえで示唆深い。

(1)The analysis of the base arrangement of PCNA gene in the upper basin of the river is carried out. The first step is to determine the starting point. A similar arrangement exists in the TATA domain and in the mammalian domain. (2)Coliform bacteria are synthesized in vitro, and the method of synthesis is used in vitro. (3)PCNA gene 5 'upstream region is linked to CAT gene, which is introduced into kc cells. A party, a party (4)From the embryo to the adult, PCNAmRNA is present in the early embryo, especially in the unfertilized egg, and in the main maternal mRNA. This year, the main PCNA gene discovery regulation was achieved. In particular,(1) to (3), the knowledge of the relationship between morphological formation and PCNA DNA replication, the relationship between morphological differentiation and PCNA DNA replication, and the possibility of the development and control of PCNA DNA replication are discussed.

项目成果

YAMAGUCHI,M.ET AL.: "REPRESSION OF POLYOMA VIRUS DNA REPLICATION BY 5-FLANKING REGION OF MOUSE DNA POLYMERASEβ GENE CONTAINING TRANSCRIPTIONAL SILENCER ELEMENTS" J,BIOL.CHEM.264. 16887-16891 (1989)

YAMAGUCHI,M.等人：“含有转录沉默元件的小鼠 DNA 聚合酶β基因的 5 侧翼区域抑制多瘤病毒 DNA 复制”J，BIOL.CHEM.264（1989）。

Yamaguchi,M.et al: "Cell-type-specific expression of mouse DNA polymerase β gene is regulated by silencer elements" J.Cell.Physiol.141. 431-436 (1989)

Yamaguchi, M. 等人：“小鼠 DNA 聚合酶 β 基因的细胞类型特异性表达受沉默元件调节”J.Cell.Physiol.141 (1989)。

Yamaguchi,M.et al: "Paradoxical effect of simian virus 40 enhancer on the function of mouse DNA polymerase β gene promoter" Nucleic Acids Res.17. 3725-3734 (1989)

Yamaguchi, M. 等人：“猿猴病毒 40 增强子对小鼠 DNA 聚合酶 β 基因启动子功能的矛盾效应”Nucleic Acids Res.17 (1989)。

Yamaguchi,M.et al: "Drosophila proliferating cell nuclear antigen gene:structure,expression during development and specific binding of homeodomain proteins to its 5'-flanking region" Mol.Cell.Biol.10. 872-879 (1990)

Yamaguchi,M.等人：“果蝇增殖细胞核抗原基因：发育过程中的结构、表达以及同源结构域蛋白与其 5-侧翼区域的特异性结合”Mol.Cell.Biol.10。