機能未同定転写調節因子の網羅的解析によるA群レンサ球菌毒素蛋白質発現機構の解明
综合分析功能尚未明确的转录调控因子,阐明A族链球菌毒素蛋白的表达机制
基本信息
- 批准号:21K07007
- 负责人:
- 金额:$ 2.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
A群レンサ球菌は、1990年前後より再興感染症としての劇症型感染症の起因菌(人喰いバクテリア)となることが報告された。病原性発揮には毒素蛋白質の質的、量的変化が重要な役割を果たしているが、発現制御については未知の部分が多い。今回の研究ではゲノム情報から数多く推定される機能未知の転写調節を司ると考えられる因子の機能を明らかにすることにより、未知の発現制御の解明に取り組んでいる。1.転写調節遺伝子ノックアウト株の樹立ー劇症型感染症患者由来株である10-85のゲノム情報から機能未知の転写調節を司ると考えられる因子の網羅的なノックアウト株の樹立を試み、昨年度約40種類、今年度10種類のノックアウト株を樹立した。2.各種ストレスに対する解析ー昨年度DNA活性の減弱を報告した2種の転写調節因子ノックアウト株において、相補株、10-85以外の劇症型感染症由来1529株におけるノックアウト株も作成した。これらに、pHストレス、温度ストレス、酸化ストレス(過酸化酸素使用)などの各種ストレスを与え、増殖に及ぼす影響を検討した。その結果この2種は酸化ストレス応答にも関与していることが判明した。3.酸化ストレス実験ー上記2種以外のノックアウト株に対して酸化ストレス実験を行い、新たに2種のノックアウト株も酸化ストレス応答減弱を認めた。一つはPspCドメイン保有の蛋白質であり、もう一方はredoxを感知すると推定される発現制御因子であった。10-85以外の1529株においてもノックアウト株も樹立し、相補株の作成を試みたが、1529株由来PspCドメイン保有の蛋白質ノックアウト株ではいかなるプラスミドの導入もできなかった。10-85株と1529株は遺伝子導入に必要な遺伝子の違いがすでにゲノムから判明していたが、この蛋白質は異なる機序の遺伝子導入メカニズムに関与していることが示唆された。
Group A レ ン サ aureus は, around 1990 よ り renewed adapting just-in-time inventory と し て の play USES, adapting just-in-time inventory の cause bacteria (喰 い バ ク テ リ ア) と な る こ と が report さ れ た. Pathogenicity 発 swing に は toxin protein の qualitative, quantitative variations change of important な が "を cut fruit た し て い る が, 発 now royal に つ い て は が い more unknown の part. Today back to の research で は ゲ ノ ム intelligence か ら more presumption く さ れ る function unknown の planning write adjust を department る と exam え ら れ る factor の function を Ming ら か に す る こ と に よ り, unknown の 発 now suppression の interpret に group take り ん で い る. 1. Planning to write adjust heritage 伝 son ノ ッ ク ア ウ ト strains の set ー play USES, adapting just-in-time inventory patients origin strains で あ る 10-85 の ゲ ノ ム intelligence か ら function unknown の planning write adjust を department る と exam え ら れ る factor の snare な ノ ッ ク ア ウ ト strains の を try み, last year, about 40 kinds, this year 10 kinds の ノ ッ ク ア ウ ト strains を set し た. 2. Various ス ト レ ス に す seaborne る parsing ー yesterday annual reports on DNA activity weakened の を し た two の planning write adjustment factor ノ ッ ク ア ウ ト strains に お い て, phase strains, 10-85 の play USES, adapting just-in-time inventory origin 1529 strains に お け る ノ ッ ク ア ウ ト strains も made し た. こ れ ら に, pH ス ト レ ス, temperature ス ト レ ス, acidification ス ト レ ス acid acidification passes (use) な ど の various ス ト レ ス を に え, raised colonization and ぼ す influence を beg し 検 た. The そ <s:1> result <e:1> そ two kinds of <s:1> acidification ストレス応 answer に <s:1> relation and <s:1> て る る とが とが とが determine that た た. 3. Acidification ス ト レ ス be 験 ー written two outside の ノ ッ ク ア ウ ト strains に し seaborne て acidification ス ト レ ス be 験 を い, new た に two の ノ ッ ク ア ウ ト strains も acidification ス ト レ ス 応 a weakened を recognize め た. A つ は PspC ド メ イ ン retain の protein で あ り, も う side は REDOX を perception す る と presumption さ れ る 発 suppression factor now で あ っ た. Outside の 10-85 1529 strains に お い て も ノ ッ ク ア ウ ト strains も し, fill phase strains の done try を み た が, 1529 strains of origin PspC ド メ イ ン retain の protein ノ ッ ク ア ウ ト strains で は い か な る プ ラ ス ミ ド の import も で き な か っ た. Traces of 10-85 strains と 1529 strains は 伝 child import に な necessary but 伝 の violations い が す で に ゲ ノ ム か ら.at し て い た が, こ の protein は different な る machine sequence の heritage 伝 son import メ カ ニ ズ ム に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た.
项目成果
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