細胞分裂制御キナーゼの分子連携とその調節異常による腫瘍形成機構

细胞分裂控制激酶的分子协调及其失调引起的致瘤机制

• 批准号: 01J00391
• 负责人: 広田 亨
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J00391/
• 关键词: 細胞分裂; 分裂期キナーゼ; Aurora-A; リン酸化; 中心体; RNAi; Ajuba; LIMドメイン; 短鎖RNA干渉法; 染色体不安定性; キネトコア; CENP-A

Auroraキナーゼは進化上高度に保存されている普遍的な分裂期キナーゼである。本研究は、詳細が不明であったAurora-Aの生理機能について調べ、ヒトの細胞分裂のメカニズムに迫ることを主題とした。本年度は、昨年度までに同定したAurora-Aの会合分子について、引き続き、それらの相互作用の解析を行った。さらに、最終年度として、これまでの結果を論文発表することも目標とした。以下に、本年度の成果を要約する。(1)Aurora-Aは分裂期進入のための必須子である:リン酸化部位認識特異抗体を用いることにより、Aurora-Aの活性化がG2後期の中心体において始まることを見出した。そこで、RNAi法を用いてAurora-Aの発現を抑制したところ、HeLa細胞はG2期で停止し分裂期への進入が著しく損なわれた。細胞分裂の開始に際しCyclinB1-Cdk1の活性化が中心的な役割を持つと考えられ、その最初の活性化は中心体で起こるが、我々はG2期後期においてAurora-Aが中心体で活性化することが、つづくCyclinB1-Cdk1の活性化に必要であることを示した。(2)AjubaはAurora-Aの自己リン酸化による酵素活性化を誘導する:Aurora-Aの会合分子としてヒトAjubaを同定した(GenBank Acc.No.AY169959)。Ajubaは3つのLIMドメインをもつタンパク質であり、LIM2およびLIM3を介してAurora-Aと結合することを見出した。分裂期においてAurora-AはAjubaと結合することで自己リン酸化を引き起こし、活性化することが明らかになった。AjubaはG2後期の中心体におけるAurora-Aの活性化を誘導する必須の調節因子であることが分かった。

Aurora is highly conserved in evolution. This study focuses on the physiological functions of Aurora-A, such as cell division, cell division and cell division. This year, the analysis of Aurora-A interaction was carried out at the same time as last year. The final year of the project is 2010. The following are the results of this year. (1)Aurora-A mitotic phase enters into the essential sub-phase: acidification site recognizes specific antibodies, activation of Aurora-A and centrosome in late G2 phase. The expression of Aurora-A was inhibited by RNAi, and HeLa cells stopped in G2 phase and entered the division phase. During the initiation of cell division, the activation of the center of CyclinB1-Cdk1 is maintained, and during the initial activation of the centrosome, and during the late G2 phase, the activation of the center of Aurora-A is necessary. (2)Ajuba induced enzyme activity in aurora-A by its own acidification:aurora-A and its confluent molecules were identified (GenBank Acc.No.AY169959). Ajuba has three different types of LIM, LIM2 and LIM3. Aurora-A cleavage phase is characterized by its own acidification. Ajuba is an essential regulator for the activation of Aurora-A in the centrosome of late G2.

项目成果

Hirota, T et al.: "Aurora-A and an interacting activator, the LIM protein Ajuba, are required for mitotic commitment in human cells."Cell. 114(5). 585-598 (2003)

Hirota, T 等人：“Aurora-A 和相互作用的激活剂 LIM 蛋白 Ajuba 是人类细胞有丝分裂承诺所必需的。”细胞。

Iida, S., et al.: "The tumor suppressor WARTS ensures genomic integrity by regulating both mitotic progression and G_1 tetraploidy checkpoint function"Oncogene. (印刷中). (2004)

Iida, S., et al.：“肿瘤抑制因子 WARTS 基因组通过调节有丝分裂进展和 G_1 四倍体检查点功能来确保完整性”Oncogene（2004 年出版）。

Arima, T et al.: "Downregulation of nuclear protein ICBP90 by p53/p21^<Cip1/WAF1>-dependent DNA-damage checkpoint signals contributes to cell cycle arrest at G1/S transition"Genes to Cells. 9. 131-142 (2004)

Arima, T 等人：“p53/p21^<Cip1/WAF1> 依赖性 DNA 损伤检查点信号对核蛋白 ICBP90 的下调有助于细胞周期在 G1/S 转变时停滞”基因到细胞。

Morisaki, T et al.: "WARTS tumor suppressor is phosphorylated by Cdc2/Cyclin B at spindle poles during mitosis"FEBS Lett. 529. 319-324 (2002)

Morisaki, T 等人：“WARTS 肿瘤抑制因子在有丝分裂过程中被 Cdc2/Cyclin B 在纺锤体极处磷酸化”FEBS Lett。

Marumoto, T et al.: "Aurora-A kinase maintains the fidelity of early and late mitotic events in HeLa cells."Journal of Biological Chemistry. 278(51). 51786-51795 (2003)

Marumoto, T 等人：“Aurora-A 激酶维持 HeLa 细胞早期和晚期有丝分裂事件的保真度。”生物化学杂志。