ヒト細胞の老化、不死化、癌化

人体细胞的衰老、永生化和癌变

• 批准号: 01J04310
• 负责人: 阪口 政清
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J04310/
• 关键词: S100C; A11; ヒト正常表皮角化細胞; p21(WAF1; CIP1); TGFβ; Protein kinase C(PKC); SP1; Smad3; Nucleolin; Sp1; p21; ケラチノサイト; Ca

我々は先に、高Caによるヒト表皮角化細胞の増殖抑制が、S100C/A11のリン酸化、核移行、Sp1の活性化によるp21(WAF1/CIP1)の誘導という新しい信号伝達経路を介することを報告した(JCB,163:825-835,2003)。本研究では、ヒト表皮角化細胞に対するもう一つの代表的な増殖制御因子であるTGFβの作用機序を検討した。ヒト正常表皮角化細胞(NHK)をTGFβで処理すると、高Caに曝露した際と同様に、S100C/A11は10Thrがリン酸化され、nucleolinに結合して核に移行し、核内でSp1を介してp21(WAF1/CIP1)を誘導した。S100C/A11をリン酸化する酵素を探るため、皮膚で発現しているprotein kinase C(PKC)のα,δ,ε,η,ζ分子種を強制発現させたところ、PKCαのみがS100C/A11の10Thrをリン酸化した。TGFβ処理により、PKCαは活性化された。また、PKCαのドミナントネガティブ体を導入すると、TGFβによるS100C/A11のリン酸化が阻害され、増殖抑制も解除された。以上の結果は、細胞内でS100C/A11の10Thrをリン酸化するのはPKCαであることを示している。TGFβの信号伝達にSmad s系が働いていることはよく知られている。siRNAを用いてSmad3をdown-regulateすると、TGFβに依る増殖抑制が解除された。抗S100C/A11抗体を用いて、S100C/A11の機能をブロックしても同様であった。即ち、TGFβによる増殖制御はS100C/A11系とSmad s系の両方が機能して初めて起こることが確認された。なお、この条件下でSp1はSmad3と結合し、p21(WAF1/CIP1)プロモーターに作用する。以上、我々はS100C/A11がNHKの増殖抑制に中心的な役割を果たすことを明らかにした。

We report on the induction of new signaling pathways in epidermal keratinocytes, inhibition of proliferation, acidification of S100C/A11, nuclear migration, and activation of Sp1 (WAF1/CIP1) by high Ca concentrations (JCB,163:825- 835, 2003). In this study, we investigated the mechanism of TGFβ in epidermal keratinocytes. Normal epidermal keratinized cells (NHK) were induced by TGFβ, high Ca exposure, S100C/A11, 10Thr acidification, nucleolin binding, nuclear migration, and p21(WAF1/CIP1). S100 C/A11 protein kinase α,δ, η, zeta protein kinase C(PKC) protein kinase C Due to TGFβ regulation, PKCα is activated. In addition, PKCα and S100C/A11 were introduced into the cell, and the inhibition of proliferation was eliminated. The above results indicate that the intracellular S100C/A11 and 10Thr may be acidified by PKCα. TGFβ signal transmission Smad s is a signal transmission system. siRNA is used to remove Smad3 down-regulate and TGFβ-dependent growth inhibition. Anti-S100C/A11 antibody use, S100C/A11 function is the same. That is, TGFβ is the growth control system of S100C/A11 system and Smad s system. Under these conditions, Sp1 functions in conjunction with Smad3 and p21(WAF1/CIP1). The S100C/A11 is the center of NHK's growth inhibition.

项目成果

Sakaguchi M: "PKCα mediates TGFβ-induced growth inhibition or human keratinocytes via phosphorylation of S100C/A11"J.Cell Biol.. (In Press). (2004)

Sakaguchi M：“PKCα 通过 S100C/A11 磷酸化介导 TGFβ 诱导的生长抑制”J.Cell Biol.（2004 年出版）。

Sakaguchi M: "S100C/A11 is a key mediator of Ca++-induced growth inhibition of human epidermal keratinocytes"J.Cell Biol.. 163. 825-835 (2003)

Sakaguchi M：“S100C/A11 是 Ca 诱导的人表皮角质形成细胞生长抑制的关键介质”J.Cell Biol.. 163. 825-835 (2003)

Kobayashi, N., Sakaguchi, M.et al.: "Improvement in the differentiated hepatic phenotype of immortalizes human hepatocytes by adenovirus mediated p21 gene transfer"ASAIO J.. 48. 355-359 (2002)

Kobayashi，N.，Sakaguchi，M.等人：“通过腺病毒介导的 p21 基因转移来改善永生化人肝细胞的分化肝表型”ASAIO J.. 48. 355-359 (2002)

Kobayashi, N., Kunieda, T., Sakaguchi, M.et al.: "Active expression of p21 facilitates differentiation of immortalized human hepataytes"Transplant Proc.. 35. 433-434 (2003)

Kobayashi, N.、Kunieda, T.、Sakaguchi, M.等人：“p21 的活性表达促进永生化人肝细胞的分化”Transplant Proc.. 35. 433-434 (2003)

Kondo, A., Sakaguchi, M.et al.: "Localization of S100C immunoreactivity in various human tissues"Acta. Med. Okayama. 56. 31-34 (2002)

Kondo, A.、Sakaguchi, M.等人：“S100C 免疫反应性在各种人体组织中的定位”Acta。