S100Cタンパク質を介した新規細胞増殖抑制機構の解明

阐明S100C蛋白介导的新型细胞生长抑制机制

• 批准号: 17790150
• 负责人: 阪口 政清
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790150/
• 关键词: S100C; A11; Annexin I; Phospholipase A2; 表皮角化細胞; 増殖; アラキドン酸; Ca; TGFβ; Smad; NFAT; Sp1; KLF16; ヒト表皮角化細胞

S100C/A11の新たな機能を探る目的で、相互作用のあるタンパク質を検索した。S100C/A11はAnnexin Iに結合するという報告があり、Annexin IはPhospholipase A2(PLA2)に結合しその活性を阻害することを介してアラキドン酸カスケードの制御に関与する。そこで、S100C/A11がAnnexin Iとの結合を介してアラキドン酸カスケードに作用するとの作業仮説の下に、今回検討を行った。その結果、S100C/A11は確かにAnnexin Iに結合し、この複合体形成は試験管内でAnnexin IとPLA2との結合を大幅に増強することがわかった。また、S100C/A11-Annexin I-cPLA2の細胞内での結合に関しても免疫沈降法により確認することができた。さらに、TGFβや高Caで処理するとS100C/A11はリン酸化を受けるが、そのことがこのタンパク質相互作用にどのように影響するかを検討したところ、S100C/A11のリン酸化修飾はこの結合に影響を及ぼさないが、CaのS100C/A11への結合がそのタンパク質問相互作用に重要であることが明らかとなった。ヒト表皮由来細胞の増殖はPLA2(中でもcytosolic PLA2;cPLA2)活性に依存していることが周知である。そこで、S100C/A11の機能状態とその結果としてのS100C/A11-Annexin I複合体形成がcPLA2活性にどのように影響するかを検討した。細胞内遊離アラキドン酸の定量により解析したところ、細胞内cPLA2活性はS100C/A11-Annexin I複合体により著しく抑制されることが明らかとなった。また、表皮角化細胞の増殖がcPLA2活性に依存していることが確認できた。以上、Annexin IがS100C/A11への結合を介してPhospholipase A2(PLA2)活性を効率よく抑制し、細胞増殖を制御する新規機構を明らかにすることができた(投稿準備中)。

为了探索S100C/A11的新功能，我们搜索了相互作用的蛋白质。据报道，S100C/A11与膜联蛋白I结合，该I参与了通过与磷脂酶A2（PLA2）结合并抑制其活性的蛛网膜酸级联反应。因此，我们基于工作假设研究了这段时间，即S100C/A11通过与膜联蛋白I结合作用于花生四烯酸级联对I。结果表明，S100C/A11当然与膜联蛋白I结合，并且这种复合形成显着增强了附属膜I与PLA2与PLA2在体外的结合。此外，S100C/A11-ANNEXIN I-CPLA2的细胞内结合也可以通过免疫沉淀来证实。此外，当TGFβ或高CA处理导致S100C/A11被磷酸化时，我们研究了这如何影响这种蛋白质相互作用，并发现S100C/A11的磷酸化修饰不会影响CA与S100C/A11的结合对S100C/A11的结合，对S100C/A11的结合对其蛋白质异花很重要。众所周知，人表皮衍生细胞的增殖取决于PLA2（尤其是胞质PLA2； CPLA2）活性。因此，我们研究了S100C/A11的功能状态，以及所得的S100C/A11- ANNEXIN I复合物的形成如何影响CPLA2活性。通过定量细胞内蛛网膜酸分析表明，细胞内CPLA2活性被S100C/A11-ANNEXIN I复合物显着抑制。还证实表皮角质形成细胞的增殖取决于CPLA2活性。这揭示了一种新的机制，通过该机制，通过与S100C/A11结合，通过该机制有效地抑制磷脂酶A2（PLA2）活性，并调节细胞增殖（准备发布）。

项目成果

Bifurcated converging pathways for high Ca^<++>- and TGFb-induced inhibition of growth of normal human keratinocytes

高Ca^<>-和TGFb诱导的正常人角质形成细胞生长抑制的分叉汇聚途径

• 发表时间: 2005
• 期刊: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 102
• 作者: Sakaguchi M;Sonegawa H;Nukui T;Sakaguchi Y;Miyazaki M;Namba M;Huh NH.
• 通讯作者: Huh NH.

SURGERY FRONTIER

外科前沿

• 发表时间: 2015
• 作者: Sumi S;Yanai G;Yang K-C;Shirouzu Y;有上貴明
• 通讯作者: 有上貴明

Intracellular delivery of proteins into mammalian living cells by polyethylenimine-cationization

• DOI: 10.1263/jbb.99.95
• 发表时间: 2005-02-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING
• 影响因子: 2.8
• 作者: Futami, J;Kitazoe, M;Yamada, H
• 通讯作者: Yamada, H

Targeted disruption of transcriptional regulatory function of p53 by a novel efficient method for introducing a decoy oligonucleotide into nuclei

通过一种新的有效方法将诱饵寡核苷酸引入细胞核，有针对性地破坏 p53 的转录调节功能

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nucleic Acids Research 33:e88
• 作者: Sakaguchi M;Nukui T;Sonegawa H;Murata H;Futami J;Yamada H;Huh NH
• 通讯作者: Huh NH

REIC/Dkk-3 as a potential gene therapeutic agent against human testicular cancer.

• DOI: 10.3892/ijmm.19.3.363
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: International journal of molecular medicine
• 影响因子: 5.4
• 作者: R. Tanimoto;F. Abarzúa;M. Sakaguchi;M. Takaishi;Y. Nasu;H. Kumon;N. Huh