サルコグリカ次損による心筋症の発症機序と細胞死にいたる情報伝達経路に関する研究

肌聚糖损伤引起的心肌病发病机制及导致细胞死亡的信息传递途径研究

• 批准号: 12670717
• 负责人: 花田 裕典
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12670717/
• 关键词: 心筋症; ジストロフィン; サルコグリカン

心筋症の発症の機序や病態を分子レベルで解明するために、心筋症ハムスターBIO14.6を用いて筋肉細胞の生理的性質の検討や、発現変化遺伝子を検索することなどによって、細胞変性にかかわる遺伝子群を同定し、病態との関連性を検討した。心筋症ハムスター培養筋肉細胞では、正常型に比べてCaイオン取り込み活性が高いこと、その流入経路は、進展刺激に応じてチャンネル活性が上昇する非特異的カチオンチャネルであることを示唆した。このような心筋症ハムスター筋肉細胞におけるイオン代謝異常と、後半で同定した発現変化遺伝子と関連性を検討することによって心筋症に関連する遺伝子群を推定することが可能になった。BIO14.6及び正常型ハムスターの培養筋肉細胞からサブトラクションcDNAライブラリーを調製し、発現解析を行なった結果、心筋症ハムスターの心臓で特異的に発現が増加する約30種類(未知の物を含む)の遺伝子を得た。しかし、ハムスターでは利用できる遺伝子情報が少ないこと、ライブラリーに含まれる遺伝子の冗長度が高いことなど、多数の発現変化遺伝子を検索するには不利であることが明らかになった。そこで方法を改良し、遺伝子情報が豊富なマウスの心臓から作成した正規化cDNAアレイライブラリー(15,000クローン、平均鎖長2.4kb)から、サブトラクションcDNAをプローブにして発現変化遺伝子の検索を行った。心筋症あるいは正常型ハムスター特異的に発現変化している2000クローンのうち1350クローンの配列が決定でき、心筋症ハムスター特異的に発現が上昇している約170種と、減少している約130種の遺伝子を同定した。この中には、収縮系、イオントランスポーターやCa結合タンパク質等、心筋症や、先に検討した心筋症ハムスター筋肉細胞におけるイオン代謝異常と密接に関連することが予想される遺伝子群が多く含まれていた。

The mechanism of the development of heart disease and pathological molecular changes are explained by BIO14.6, and the physiological properties of muscle cells are discussed. The activity of cultured muscle cells in cardiac muscle disease is higher than that in normal type, and the activity of cultured muscle cells in different inflow channels is higher than that in normal type. The metabolic abnormalities in the muscle cells of patients with heart disease are discussed in the following ways: 1. the genetic association of patients with heart disease is discussed in the following ways: 2. the genetic association of patients with heart disease is estimated in the following ways: BIO14.6 and the normal type of cultured muscle cells were modulated and analyzed. The results showed that the heart-specific gene expression in the heart muscle cells increased. About 30 kinds of genes (unknown substances included) were obtained. For example, if you want to make use of the information, you can use the information to make sure that it is not too long. This method was improved to generate normalized cDNA fragments (15,000 kb, average length 2.4 kb) from cDNA fragments and to generate cDNA fragments from cDNA fragments. The occurrence of cardiac muscle disease in normal type increased by about 170 species and decreased by about 130 species. The relationship between these two factors is that they are closely related to each other, and that they are related to each other.

项目成果

Nakamura, TY: "Stretch-activated cation channels in skeletal muscle myotubes from sarcogelycan-defficient hamsters"AM.J.Physiol.Cell Physiol.. 281(2). C690-C699 (2001)

Nakamura, TY：“肌聚糖缺陷仓鼠骨骼肌肌管中的拉伸激活阳离子通道”AM.J.Physiol.Cell Physiol.. 281(2)。

M.Sampaolesi: "Stretch-induced cell damage in sarcoglycan-deficient myotubes."Pflugers Archiv. (印刷中). (2001)

M. Sampaolesi：“肌聚糖缺陷肌管中的拉伸诱导的细胞损伤”。Pflugers Archive（2001 年出版）。

Sampaolesi, M: "Stretch-induced cell damage in sarcoglycan-defficient myotubes"Pfluger Arch.. 442(2). 161-170 (2001)

Sampaolesi，M：“肌聚糖缺陷肌管中拉伸诱导的细胞损伤”Pfluger Arch.. 442(2)。

Y.T.Nakamara: "Stretch-Activated Cation Channels in Skeletal Muscle Myotubes from Sarcoglycan Deficient Hamster"American Journal of Physiology. (印刷中). (2001)

Y.T.Nakamara：“肌聚糖缺陷仓鼠骨骼肌肌管中的拉伸激活阳离子通道”美国生理学杂志（2001 年出版）。