内分泌撹乱物質の低用量効果のメカニズムとしてのGnRHニューロンのシナプス形成

GnRH 神经元突触发生作为内分泌干扰物低剂量作用的机制

基本信息

  • 批准号:
    13027217
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.47万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 财政年份:
    2001
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2001 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

胎生期ラット視床下部から分離した初代培養細胞を用い,神経細胞のシナプス形成に内分泌撹乱物質が及ぼす影響を検討した.培養液に代表的な内分泌撹乱物質であるノニルフェノール(NP)およびビスフェノールA(BPA)を添加し,細胞の成長の指標であるMAP2およびシナプス形成の指標であるシナプシンに対する抗体で細胞を染色し,共焦点レーザー顕微鏡による画像を画像解析することによって,シナプス形成への影響を定量的に評価した.その結果,10〜100nMのNPによって,細胞の成長,シナプス形成ともに促進され,MAP2/シナプシンとして求めたシナプス密度も促進された.しかし1,000nM以上ではこれらの指標は逆に抑制され,全体として逆U字型の用量-反応関係が得られた.BPAでも同様の用量-反応関係を得たが,各指標に促進の見られた濃度はNPの約100倍であった.この系にはエストロゲンβ受容体の発現が確認されたこと,エストラジオールによつてもMAP2,シナプシン発現が促進されたことから,NP, BPAの作用がエストロゲン受容体を介する可能性が示唆された.一方で,行動レベルの評価方法を検討するため,やはり代表的な内分泌撹乱物質であるジエチルスチルベストロール(DES)をマウス胎仔期後期から新生仔期にかけて母体を介して曝露(経口投与;0.3あるいは3μg/kg/day)し,出生した仔の成熟後のオープンフイールド活動量と受動回避反応を測定した.その結果、DES曝露はオープンフィールド活動量(移動距離)をオス・メス共に用量依存的に増加させた.また,記憶・学習能力を評価するための受動回避反応については,オスにおいてのみ用量依存的な学習の抑制が認められた.現在、性行動と攻撃行動の観察を継続中であり,将来的にはこの陽性対照処理を用いて,NP・BPAの行動影響を評価する予定である.
During the fetal period, the lower part of the bed is separated, the cells are cultured in the first generation, and the cells form endocrine disorders and shadows. The culture liquid represents an endocrine disorder, a cell growth, an antibody staining, a confocal image, a micrograph, a portrait analysis, a picture analysis. The amount of money you need to pay for it is a quantitative one. The results showed that 10 ~ 100nMMNPV cells grew, the cells grew, and the cells formed to promote the growth of cells. The density of the cells was enhanced by the growth of MAP2/. The 1000nM is higher than the reverse dose, and the reverse U-shape is used. The same amount of BPA is used, and the NP is about 100 times higher than that of the control. The effect of NP, BPA, on the possibility of referral of the receptive body indicates that it is possible to make sure that it is possible to improve the performance of the receptacle. On the one hand, the method of exercise therapy was not effective, and the endocrine disorder represented by the drug was not known. The endocrine hormone (DES) was detected in the later period of the fetus. The mother of the baby was exposed during the newborn period (oral injection vs. 0. 3 μ g

项目成果

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