ポリアミン制御因子アンチザイムの分解機構

多胺调节抗酶的降解机制

• 批准号: 13214099
• 负责人: 村上 安子
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214099/
• 关键词: アンチザイム; オルニチン脱炭酸酵素; 細胞内たんぱく分解; プロテアソーム; ユビキチン; 核外移行; アンチザイム2; 細胞内局在

アンチザイム(AZ)の主要分子種であるAZ1と最近見出されたAZ2について、細胞内局在、安定性、分解様式を解析した。対数増殖期の細胞では、AZ1とAZ2はいずれもオルニチン脱炭酸酵素(ODC)との複合体として細胞質に、遊離の状態で核に存在した。ポリアミンで強く誘導すると遊離のAZ1が細胞質に出現し、ミトコンドリアにも少量(核の10-20%)出現した。しかし遊離のAZ2は核に限局されていた。AZの細胞内半減期はいずれも40-100分と短寿命であった。いずれのAZもプロテアソーム阻害剤MG132で安定化された。また、核のAZ1,AZ2の分解は核外移行阻害剤レプトマイシンBで強く阻害された。従って、AZ1,AZ2はいずれも細胞質のプロテアソームで分解されると推定された。^<35>Sで放射標識・精製したAZ1(開始コドンの異なる長短二種),AZ2のいずれも網状赤血球溶血液中でエネルギー依存的に分解された。分解はプロテアソーム阻害剤やODCで阻害される点でも細胞内分解を反映すると考えられる。さらに、分解と平行してSDS/PAGEで高分子のバンドが検出されることからAZ1,AZ2はユビキチン化されて26Sプロテアソームで分解されると推定された。なお、興味深いことに、AZを捕捉してその機能を阻害するアンチザイムインヒビター(ODCより強い親和性でAZに結合する活性を持たないODCファミリー)はAZの分解も高分子バンドの出現も阻害しなかった。今後、AZのユビキチン化に関与するE3の同定とともに、AZ1,AZ2の核に局在する生理的意義(単なる貯蔵型か、あるいは特異的な機能を果たしているのか)を明らかにすることが重要であろう。

The main molecular species of AZ (AZ), AZ1 and AZ2, has been recently discovered, and its intracellular localization, stability, and decomposition formula are analyzed. The number of cells in the proliferative phase, the AZ1 and AZ2 decarbonization enzymes (ODC), the cytoplasmic complex, and the nuclear nuclei in the free state are present.ポリアミンでstrongく induces the appearance of free AZ1 in the cytoplasm and the appearance of ミトコンドリアにも in a small amount (nuclear 10-20%).しかしfreeのAZ2はNUCLEAR limiterされていた. The intracellular half-period of AZ is 40-100 minutes and the life span is short. The stabilization of the いずれのAZもプロテアソームblocker MG132.また, AZ1, AZ2 の decomposition は extra-nuclear migration blocker 扤レプトマイシンB でstrong くblocker された.従って、AZ1,AZ2はいずれもcytoplasmic のプロテアソームでdegradation されるとESTIMATE された. ^<35>S でradiation mark・Refined AZ1 (starting コドンのdifferent なる long and short), AZ2 のいずれも reticulocyte lysate in the blood, でエネルギーdepends on the に decomposition された. The decomposition and decomposition of ODC is the inhibitor of ODC and the decomposition in the cells is reflected in the decomposition of the cells.さらに、DecompositionとparallelしてSDS/PAGEでpolymerのバンドが検出されることからA Z1, AZ2 はユビキチン化されて26S プロテアソームで decomposition されるとESTIMATION された.なお, interest deep いことに, AZをcapture してその function を hinder するアンチザイムインヒビター(ODC よりstrong いaffinity The combination of sex and activity of AZ and the decomposition of AZ and the appearance of high molecular weight hinder the development of ODC (ODC). From now on, the physiological significance of AZ's のユビキチン化に口 and するE3's とともに, AZ1, and AZ2's nuclear bureau in する(単なる攵式か、あるいはSpecial functionをfruitたしているのか)を明らかにすることがimportantであろう.

项目成果

Chattopadhyay MK: "Antizyme regulates the degradation of ornitheme decarboxylase in fission yeast Schizosaccharomyces pombe-Study in the spe2 knockout strains"J. Biol. Chem.. 276・24. 21235-21241 (2001)

Chattopadhyay MK：“抗酶调节裂殖酵母裂殖酵母中鸟基脱羧酶的降解 - 在 spe2 敲除菌株中的研究”J. Biol. 276・21241 (2001)。

Atkins JF: "Overriding standard decading : Implications of recoding for ribosome function and enrichment of gene expression"Cold Spring Harbor Symp Quant Biol. (in press).

Atkins JF：“超越标准十年：重新编码对核糖体功能和基因表达富集的影响”Cold Spring Harbor Symp Quant Biol。

Howord MT: "Cell culture analysis of the regulatory frameshift event required for the expression of mammalian antizymes"Genes Cells. 6・11. 931-941 (2001)

Howard MT：“哺乳动物抗酶表达所需的调节移码事件的细胞培养分析”Genes Cells 6·11（2001）。