発癌過程におけるコネキシン機能異常のメカニズム;細胞接着因子との相互依存性

癌变过程中连接蛋白功能障碍的机制；与细胞粘附因子的相互依赖性

• 批准号: 13214106
• 负责人: 山崎 洋
• 金额: $ 4.22万
• 依托单位: Kwansei Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214106/
• 关键词: コネキシン; ギャップ結合; カドヘリン; 細胞間コミュニケーション; 子宮内膜癌; Cx26

これまでの癌とコネキシンの研究から、コネキシン遺伝子は癌抑制遺伝子の一群である、と考えられる。しかし、発癌過程におけるギャップ結合異常の分子機構は未解明である。われわれは、ヒトの癌ではコネキシンの遺伝子変異は稀であり、コネキシン遺伝子発現異常及びタンパクの細胞内局在性異常が見られることを発表してきた。特に細胞接着因子との相互依存性を研究し、その異常が発癌にどのように寄与しているかを研究するのが本研究の目的である。癌細胞でギャップ結合コミュニケーションが低下・欠乏しているメカニズムとしてコネキシンの細胞内輸送制御機構の異常を仮定し、E-カドヘリンがその制御にかかわっていることを示した。さらに、Cx26と相互作用するタンパク質をHeLa細胞のcDNAライブラリーから酵母two-hybrid法で同定し,これをAP26と名付けたAP26遺伝子は登録されている機能未知のUXT遺伝子と同一であった。AP26とCx26が細胞内で相互作用していることを免疫共沈法により確認した。また、Cx26が細胞膜に局在する細胞でのみAP26も細胞膜に存在した。ヒト子宮内膜細胞ではCx26とE-カドヘリンのみではなく、AP26も細胞膜局在性には相関関係があることが明らかになった。さらにE-カドヘリン、Cx26およびAP26が細胞膜に存在する細胞では、Cx26およびAp26がβ-actinと共沈した。これらの結果は、Cx26にAP26と言う裏打ち蛋白がある可能性を強く示唆する。さらに、Cx26、AP26およびE-カドヘリンの細胞内局在性に相関性が見られることから、AP26がE-カドヘリンによる細胞接着を認識してギャップ結合を完成するためのdown-stream情報伝達を担っている可能性も示唆される。

A group of cancer suppressor genes were studied in this paper. The molecular mechanism of abnormal binding in the process of cancer development has not yet been clarified. In addition, there are also some abnormalities in the development of cancer cells, such as abnormal development of cancer cells, abnormal development of cancer cells, and abnormal development of cancer cells. The purpose of this study is to study the interdependence of cell adhesion factors and their abnormal development. Cancer cells are characterized by a decrease in the number of cells associated with the intracellular transport control mechanism, and by an increase in the number of cells associated with the intracellular transport control mechanism. Cx26 interaction with HeLa cell cDNA sequence was determined by yeast two-hybrid method, and AP26 gene sequence was identified by UXT gene sequence with unknown function. AP26 and Cx26 intracellular interactions were confirmed by immunoco-precipitation. Cx26 and AP 26 are present in the cell membrane. Endometrial cell membrane structure is related to Cx26 and AP26. E-actin, Cx26, and AP26 co-precipitate in the cell membrane. Cx 26, AP 26 and AP26 are the results of this study. Cx26, AP 26, and E-stream information transfer in the cellular domain is dependent on the probability that the downstream information transfer in the cellular domain will occur.

项目成果

Omori, Y, Yamasaki, H, et al.: "Involvement of gap junctions in tumor suppression analysis of genetically-manipulated mice"Mutation Research. 477. 191-196 (2001)

Omori, Y, Yamasaki, H, et al.：“间隙连接参与基因操作小鼠的肿瘤抑制分析”突变研究。

Yano, T, Yamasaki, H, et al.: "Redaction of malignant phenotype of Hep G2 cell is associated with the expression of connexin 26 but not connexin 32"Carcinogenesis. 22. 1593-1600 (2001)

Yano, T, Yamasaki, H 等人：“Hep G2 细胞恶性表型的编辑与连接蛋白 26 的表达相关，但与连接蛋白 32 的表达无关”致癌作用。

Yano, T, Yamasaki, H: "Regulation of cellular invasion and matrix metalloproteinase activity in Hep G2 cell by connexin 26 transfection"Molecular Carcinogenesis. 31. 101-109 (2001)

Yano, T, Yamasaki, H：“通过连接蛋白 26 转染调节 Hep G2 细胞的细胞侵袭和基质金属蛋白酶活性”分子癌发生。

Harnandez-Blazquez, Yamasaki, H et al.: "Control of Intracellular Movement of Connexins by E-cadnerin in Murine Skin Papilloma"Experimental Cell Research. 270. 235-247 (2001)

Harnandez-Blazquez、Yamasaki、H 等人：“鼠皮肤乳头状瘤中 E-cadnerin 对连接蛋白的细胞内运动的控制”实验细胞研究。

Saunders MM, Yamasaki, H et al.: "Gap junctions and fluid flow response in MC3T3-E1 cells"Am J Physiol Cell Physiol. 281. 1917-1925 (2001)

Saunders MM、Yamasaki, H 等人：“MC3T3-E1 细胞中的间隙连接和流体流动响应”Am J Physiol Cell Physiol。