权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Dblファミリーヌクレオチド交換因子の機能解析

Dbl家族核苷酸交换因子的功能分析

基本信息

批准号：
13216072
负责人：
佐藤孝哉
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216072/
关键词：
GEF Db1ファミリー GTP結合蛋白質 Rhoファミリー Cdc42 ACK-1

项目摘要

RhoファミリーGTP結合蛋白質に対するグアニンヌクレオチド交換因子(GEF)であるDblファミリー蛋白質は、細胞骨格系の再構成や特異的な遺伝子発現の制御を介して、種々の細胞機能を調節しているが、その分子機構には不明の点が多い。本研究課題では、Dblに注目し、上流からの刺激に応答したRhoファミリーGTP結合蛋白質の活性調節機構を解析した。また、機能や特異性が未知である数種類のDb1ファミリー蛋白質について、生化学的、細胞生物学的解析を行なっている。まず、Db1に関しては、Cdc42の標的分子であるACK-1チロシンキナーゼによりリン酸化され、その結果、RhoA、Racl、Cdc42に対するGEF活性が上昇することが見いだされている。一方ACK-1は、アダプター分子Grb2を介して上皮成長因子レセプター(EGF-R)と会合することが知られているので、EGF-Rの下流でのDblの機能を詳細に検討した。その結果、EGF刺激によって、ACK-1およびDb1のチロシンリン酸化が誘導され、その際、EGF-Rの下流でCdc42、Grb2が関与することが明らかとなった。これに伴って、Dblが活性化され、RhoA、Rac1、Cdc42を介して、アクチン細胞骨格系の再構成が誘導された。以上の結果より、チロシンリン酸化によるDblの活性調節が、EGF-Rの下流で実際に機能していることが強く示唆された。一方、PCR法を用いたクローニングの過程で、Db1の近縁分子には、多くのスプライスバリアントが存在することも明らかとなった。現在、Sec14ドメインやSH3ドメインなど、活性調節に関与すると考えられるドメインの機能を検討している。また、解析を進めている何種類かの分子がHeLa細胞において、Db1とは異なる細胞骨格系の変化を誘導することなどを確認しており、今後その特異的な生理機能を明らかにしていく予定である。

The combination of Rho and GTP was used to determine the protein exchange factor (GEF). The protein exchange factor (GEF) was used to detect the protein protein, and the cellular bone system was then constructed into a special cell to control the introduction of the virus, the cell machine can be used to detect the concentration of the protein, and the molecular organization can detect the number of unknown cells. In this study, the topic, Dbl attention, and high-end stimulation were used to analyze the activity of GTP-binding protein in Rho protein. The analysis of Db1, biochemical and cellular biology, such as the number of unknown proteins, biochemical and cellular biology. The molecules of Db1, ACK-1, and Cdc42 genes were linked to acidification, acidification, RhoA, Racl, Cdc42, and GEF activity. On the other hand, ACK-1 and Grb2 molecules introduce the epithelial growth factor (EGF-R) to each other. Both ACK-1 and EGF-R molecules can be used to detect the growth of Dbl. Results, EGF stimulation, ACK-1 stimulation, Db1 response, acidification response, EGF-R response, Cdc42 response, Grb2 response and response response. The cellular skeletal system was reorganized into the cellular bone system of Dbl, RhoA, Rac1, Cdc42, and so on. As a result of the above results, the acidification of Dbl, the activity of EGF-R, and the strong indication of instigation in the field of international trade. On the one hand, the PCR method is used to analyze the process, the Db1 method is used to analyze the process, and the Db1 method is used to analyze the information. At present, Sec14 is responsible for the monitoring of SH3 performance, activity testing and monitoring. In this paper, we analyze and analyze the molecular structure of HeLa, the cellular bone system of DB1 and the physiological mechanism of the disease in the future.