BCL6がん遺伝子とAPI2-MALT1融合遺伝子の機能解析と診断治療への応用

BCL6癌基因和API2-MALT1融合基因的功能分析及其在诊断治疗中的应用

• 批准号: 13218150
• 负责人: 細川 好孝
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218150/
• 关键词: BCL6; MALT1; マイクロアレイ; two-hybrid法

染色体転座関連がん遺伝子BCL6ならびに我々自身が単離したAPI2-MALT1融合遺伝子の機能を解明することにより、悪性リンパ腫の診断、治療への臨床応用を実現することを目的として以下の諸点を明らかにした。1)BCL6プロジェクト cDNAマイクロアレイによる標的遺伝子の探索。BA/F3細胞に樹立したBCL6発現誘導系と蛍光プローブを用いた大規模なcDNAマイクロアレイを組み合わせてBCL6の新規標的遺伝子を探索し、三つの標的遺伝子を同定した。同定した遺伝子の発現がBCL6の直接な制御下にあるかどうかレポーターアッセイ法やゲルシフト法を用いて検討するため、それぞれのプロモーターを含むゲノムを単離し、現在レポーターコンストラクトを作成中である。2)API2-MALT1プロジェクト MALTリンパ腫に高頻度に認められる染色体転座t(11;18)(q21;q21)の本体がAPI2-MALT1遺伝子融合であることを明らかにしてきた。API2-MALT1,API2,MALT1それぞれをtagを付加した発現ベクターを用いて各種細胞株にトランスフェクトし蛋白の安定性を検討したところ、API2,MALT1はproteasome阻害剤の添加により半減期の延長が観察された。一方、API2-MALT1キメラはproteasome阻害剤を添加しなくても半減期の延長がみられた。また、細胞内局在を検討したところ、API2は核と細胞質に局在したが、API2-MALT1キメラの形成によって局在は細胞質へ移動した。さらにAPI2,MALT1の機能ドメインをbaitにして結合タンパク質を解析して、Two-hybrid assayによって結合蛋白質の候補を単離した。さらに、API2-MALT1トランスジェニックマウスの作成し解析中である。

Chromosome planning a masato even が ん heritage 伝 son BCL6 な ら び に 々 I own が 単 from し た API2 heritage - MALT1 fusion 伝 son の function を interpret す る こ と に よ り, 悪 リ ン パ swollen の diagnosis, treatment へ の clinical 応 を be presently す る こ と を purpose と し て の below the point を Ming ら か に し た. 1) Exploration of the 伝 offspring of the target of BCL6プロジェ ト cDNA 伝 ロアレ ロアレ による. BA/F3 cells に set し た BCL6 発 induction system now と 蛍 light プ ロ ー ブ を with い た large-scale な cDNA マ イ ク ロ ア レ イ を group み close わ せ て BCL6 の new rules underlying legacy 伝 を explore し, three つ の mark heritage 伝 son を be し た. Son be し た heritage 伝 の 発 now が BCL6 の な directly under the system of imperial に あ る か ど う か レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ method や ゲ ル シ フ を ト method with い て beg す 検 る た め, そ れ ぞ れ の プ ロ モ ー タ ー を containing む ゲ ノ ム を 単 し, now レ ポ ー タ ー コ ン ス ト ラ ク ト を made in で あ る. 2) API2 - MALT1 プ ロ ジ ェ ク ト MALT リ treated ン パ swollen に high frequency に recognize め ら れ る chromosome planning a t (11; 18) (q21; q21) の ontology が API2 - MALT1 posthumous son 伝 fusion で あ る こ と を Ming ら か に し て き た. API2 - MALT1 API2, MALT1 そ れ ぞ れ を tag を plus し た 発 now ベ ク タ ー を with い て all kinds of cell lines に ト ラ ン ス フ ェ ク ト の し protein stability を beg し 検 た と こ ろ, API2 MALT1 は proteasome inhibitor against tonic の add に よ り half life extended の が 観 examine さ れ た. One party, the API2 - MALT1 キ メ ラ は proteasome resistance against tonic を add し な く て も half life extended の が み ら れ た. ま た, cells in を beg し 検 た と こ ろ, API2 は nuclear と cytoplasm に bureau in し た が, API2 MALT1 キ メ ラ の form に よ っ て bureau in は cytoplasm へ mobile し た. Function of さ ら に API2, MALT1 の ド メ イ ン を bait に し て combining タ ン パ ク qualitative analytical し を て, Two hybrid assay に よ っ て binding protein の alternate を 単 from し た. Youdaoplaceholder0, API2-MALT1トラ スジェニッ スジェニッ ウス ウス ウス ウス are made into である in the <s:1> analysis.

项目成果

Imanishi et al.: "Primary hyperparathyroidism caused by parathyroid-targeted overexpression of cyclin D1 in transgenic mice"J.Clin.Invest.. 9. 1093-1102 (2001)

Imanishi 等人：“转基因小鼠中由甲状旁腺靶向过度表达细胞周期蛋白 D1 引起的原发性甲状旁腺功能亢进”J.Clin.Invest.. 9. 1093-1102 (2001)

Tagawa et al.: "Molecular cytogenetic analysis of the breakpoint region at 6q21-22 in T-cell lymphoma/leukemia cell line"Genes Chromosomes & Cancer 2002. (in press).

Takawa 等人：“T 细胞淋巴瘤/白血病细胞系 6q21-22 断点区域的分子细胞遗传学分析”基因染色体

Yonezumi et al.: "Detection of API2-MALT1 chimeric gene in extranodal and nodal marginal zone B cell lymphoma by RT-PCR and LA-PCR analyses"Br.J.Haematol.. 115. 588-594 (2001)

Yonezumi 等人：“通过 RT-PCR 和 LA-PCR 分析检测结外和结节边缘区 B 细胞淋巴瘤中的 API2-MALT1 嵌合基因”Br.J.Haematol.. 115. 588-594 (2001)

Hosokawa et al.: "In vivo analysis of mammary and non-mammary tumorigenesis in MMTV-cyclin D1 transgenic mice deficient in p53"Transgenic Research. 5. 471-478 (2001)

Hosokawa 等人：“缺乏 p53 的 MMTV-细胞周期蛋白 D1 转基因小鼠中乳腺和非乳腺肿瘤发生的体内分析”转基因研究。