プリオン蛋白質関連神経細胞死発現機構に関する研究

朊病毒蛋白相关神经细胞死亡机制研究

• 批准号: 13226017
• 负责人: 佐伯 圭一
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226017/
• 关键词: プリオン; プリオン蛋白; 神経細胞; アポトーシス

プリオン病で見られる神経変性の発現機構には正常型のプリオン蛋白と病原体の本体と見られる異常型のプリオン蛋白の機能が密接に関係していると考えられている。本研究ではプリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株におけるアポトーシス抑制能について検討した。特にアポトーシス抑制関連因子(Bcl-2,Bcl-XL, SOD及びTNF-alpha)との相互作用について検討した。また、プリオン蛋白遺伝子欠損マウス、野生型マウス、プリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株およびプリオン蛋白遺伝子再構築不死化神経細胞株を用いて、EMC-B株、コクサッキーB1,B2,B3,B5,B6株感染時における宿主細胞内プリオン蛋白の機能を推定、検討を行なった。プリオン蛋白遺伝子欠損不死化神経細胞株に上記のBcl-2,Bcl-XL, SOD-1 cDNAを導入したところ、PrP cDNAを導入した細胞株で認められる無血清培地下でのアポトーシス抑制効果が認められた。プリオン蛋白遺伝子を再導入した細胞株におけるBcl-2,Bcl-XL及びSOD蛋白の産生を検討したところ、産生に変化は認められなかった。ところが、細胞内成分および細胞膜成分のSOD活性を測定したところ、SOD活性の上昇を認めた。正常プリオン蛋白は銅結合蛋白であることから、SOD分子に銅を供給する銅シャペロン分子であることが推測され、プリオン蛋白を発現によって細胞内SOD活性が上昇したと考えられた。また、細胞膜成分のSOD活性も上昇したことから、プリオン蛋白自体が膜上でSOD様の活性を持っていると予想された。

The expression mechanism of the abnormal type of protein is closely related to the function of the normal type of protein and the pathogen. This study examines the potential of protein gene expression to inhibit apoptosis in immortalized neuronal cell lines. In particular, the interaction between these factors (Bcl-2,Bcl-XL, SOD, and TNF-alpha) and their inhibitory effects was investigated. The function of protein in host cells infected with EMC-B strain, CCK B1,B2,B3,B5,B6 strain was estimated and studied. Bcl-2, Bcl-XL, SOD-1 cDNA was introduced into the cell lines of the non-damaged neurons, and PrP cDNA was introduced into the cells. The expression of Bcl-2, Bcl-XL and SOD proteins was investigated by reintroduction of Bcl-2, Bcl-XL and SOD proteins into cell lines. Determination of SOD activity of intracellular components and cell membrane components The activity of SOD in cells was increased due to the presence of copper in normal cells. The SOD activity of cell membrane components increased, and the SOD activity of cell membrane components increased.

项目成果

Seo S.W., Saeki K. et al.: "Comparative analysis of the prion protein ORF nucleotide sequences from the wild ruminants mufflon and golden takin"Intervirology. 44. 359-363 (2001)

Seo S.W.、Saeki K. 等人：“来自野生反刍动物马弗隆和金羚的朊病毒蛋白 ORF 核苷酸序列的比较分析”Intervirology。

Kubosaki A., Saeki K. et al.: "Regulation of cellular form of prion protein expression in mouse lymphocyte development"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 282. 103-107 (2001)

Kubosaki A.，Saeki K.等人：“小鼠淋巴细胞发育中朊病毒蛋白表达的细胞形式的调节”Biochem。