歯周病原因子による伸展刺激負荷歯周組織構成細胞の分子生物学的研究

牙周致病因子拉伸刺激牙周组织组成细胞的分子生物学研究

• 批准号: 13771291
• 负责人: 朝井 康行
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Asahi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771291/
• 关键词: 骨芽細胞様細胞; 歯周病; 病原因子; 内毒素性リポ多糖; 細胞応答; 破骨細胞様細胞; 歯周病原因子; Toll様受容体

本研究は,矯正治療時に種々の生物学的ストレスを受けると考えられる骨芽細胞における菌体表層成分に対する応答性について検討した.その結果,下記のような知見が得られた.1.Toll様受容体(TLR)2陰性でTLR4陽性である骨芽細胞様細胞株SaOS-2において,大腸菌型合成リピドA(化合物506)刺激による破骨細胞分化因子RANKLならびに破骨細胞分化抑制因子OCIFの遺伝子発現変化についてRT-PCR法を用いて検討した.その結果,同細胞は化合物506刺激により明確なRANKL mRNA発現の増強を示した.他方,OCIF mRNA発現に変化がみられなかった.また,フローサイトメトリーによる細胞表層におけるRANKL発現においても同様の結果が得られた.2.SaOS-2細胞とヒト末梢血単核球細胞(PBMC)の共培養によるPBMCからのTRAP陽性細胞(破骨細胞様細胞)分化における化合物506の影響について検討した.その結果,PBMCはSaOS-2細胞との共培養によりTRAP陽性細胞の発現がみられ,同現象は化合物506前処理したSaOS-2細胞との共培養によりTRAP陽性多核細胞数が増強した.また,これら増強作用は,抗ヒトTLR4抗体であるHTA125により抑制された.以上の結果から,内毒素性リポ多糖(LPS)の活性中心であるリピドAは,骨芽細胞のTLR4を介してRANKL発現を増強し,破骨細胞活性化に関与していることが示唆される.

This study investigated the biological response of bone bud cells to the surface composition of bacteria during orthodontic treatment. 1. Toll receptor (TLR)2 negative, TLR4 positive, osteoblast cell line SaOS-2 stimulated by coliform synthesis of TLR A(compound 506), osteoclast differentiation factor RANKL and osteoclast differentiation inhibitor OCIF gene development examined by RT-PCR. The results showed that RANKL mRNA expression increased in the same cells stimulated by compound 506. In addition,OCIF mRNA expression was changed. 2. Effects of compound 506 on differentiation of TRAP positive cells (osteoclasts) in co-culture of SaOS-2 cells and peripheral blood mononuclear cells (PBMC). As a result, the number of TRAP-positive multinucleated cells increased in the co-culture of SaOS-2 cells with PBMC pretreated with compound 506. The anti-TLR 4 antibody was found to inhibit HTA125. These results indicate that the activity center of endotoxin polysaccharide (LPS) increases, the expression of RANKL in osteoclasts increases, and the activation of osteoclasts is related to the increase of TLR4.

项目成果

朝井 康行: "低毒性リピドAの構造と機能"エンドトキシン研究. 4. 97-101 (2001)

浅井泰之：“低毒脂质A的结构和功能”内毒素研究4. 97-101 (2001)。

Yasuvuki Asai: "Bacterial fimbriae and their peptides activate human gingival epithelial cells through Toll-like receptor 2"Infection and Immunity. 69・12. 7387-7395 (2001)

Yasuvuki Asai：“细菌菌毛及其肽通过 Toll 样受体 2 激活人类牙龈上皮细胞”感染和免疫 7387-7395。

小川 知彦: "Porphyromonas gingivalis合成リピドAに対するTLR欠損マウス由来歯肉線維芽細胞の認識機構"エンドトキシン研究. 4. 73-80 (2001)

小川智彦：“来自 TLR 缺陷小鼠的牙龈成纤维细胞对牙龈卟啉单胞菌合成脂质 A 的识别机制”内毒素研究 4. 73-80 (2001)。

小川 知彦: "LPSを認識するTLR"細胞. 33・7. 252-255 (2001)

小川智彦：“识别LPS的TLR”33・7（2001）。