口腔トレポネーマ由来外膜タンパク質によるヒト歯周組織構成細胞の認識・活性化機構
口腔密螺旋体外膜蛋白识别和激活人牙周组织细胞的机制
基本信息
- 批准号:15791052
- 负责人:
- 金额:$ 2.18万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は,成人性歯周炎患者の歯肉縁下プラークから分離・培養した口腔トレポネーマの病原因子の一端を明らかにすることを目的として,これら口腔トレポネーマの外膜画分中の宿主細胞活性化因子を抽出・精製し,構造を調べるとともに,同タンパク質の生物学的諸活性について,種々のヒト歯周組織構成細胞を用いて検討しようとするものである.本年度は以下の結果が得られた.1.Treponema denticola, Treponema vincentiiおよびTreponema medium菌体からTriton X-100およびTriton X-116を用いて外膜抽出画分(OME)を得た.2.これらOMEをプロテアーゼ処理すると細胞活性の低下がみられた.3.T.medium由来OMEを高速液体クロマトグラフィー(HPLC)を用いてフラクション1〜70に分画し,マウスToll様受容体(TLR)2発現Ba/F3細胞を用いてTLR2活性画分のスクリーニングを実施したところ,フラクション57(Tm-FR57)にTLR2を介した細胞活性化,フラクション45(Tm-FR45)に細胞傷害活性がそれぞれみられた.4.Tm-FR57でヒト歯肉上皮細胞および歯肉線維芽細胞を刺激すると,弱いながらもIL-8産生の誘導がみられた.現在,Tm-FR57およびTm-FR45断片化ペプチドをHPLCにて分離・精製後,得られたペプチドのN末端アミノ酸配列の解析を進めている.
The aim of this study was to isolate, culture and identify one end of pathogenic factors in oral cavity of adult periodontitis patients, extract, refine and structurally modulate host cell activation factors from adventitia of oral cavity, and identify biological activities of host cells. The tissue of the plant is composed of cells. This year, the following results were obtained: 1. Treponema denticola, Treponema vincentii and Treponema medium cells were separated from Triton X-100 and Triton X-116 by outer membrane extraction (OME). 2. OME was treated with Triton X-100 and Triton X-116. 3. T. medium OME was treated with Triton X-100 and Triton X-116. TLR receptor (TLR)2 was found in Ba/F3 cells. TLR2 activity was detected in Ba/F3 cells. TLR 57(Tm-FR57) was found in Ba/F3 cells. TLR2 activity was detected in Ba/F3 cells. TLR 45(Tm-FR45) was found in Ba/F3 cells. IL-8 is produced by weak medium and induced by weak medium. Now,Tm-FR57 and Tm-FR45 fragments were separated and purified by HPLC, and the N-terminal acid sequence of the fragments was analyzed.
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Treponemal phospholipids inhibit innate immune responses induced by pathogen-associated molecular patterns
- DOI:10.1074/jbc.m306735200
- 发表时间:2003-11-07
- 期刊:
- 影响因子:4.8
- 作者:Hashimoto, M;Asai, Y;Ogawa, T
- 通讯作者:Ogawa, T
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