Glykobiologie, Analyse der Bedeutung komplex modifizierter Glykoproteine in Höheren Pflanzen

糖生物学,高等植物中复杂修饰糖蛋白的意义分析

基本信息

项目摘要

Im letzten Antragszeitraum haben wir mit Hilfe von unterschiedlichen GnTI/GFP-Fusionen wichtige Signale für Golgi-Lokalisierung [1,2] in Pflanzen ermittelt. Durch einen "antisense"-Ansatz konnten wir zeigen, daß GNTI-Drosselung auch in Kartoffel und Tabak toleriert wird, wobei mit dem CaMV 35S-Promotor ein Gradient im "komplexen" Glykan-Muster von jungen (schwach reduziert) zu alten Geweben (stark reduziert) verzeichnet wurde [3]. Damit können Kulturpflanzen prinzipiell für die Herstellung therapeutischer Glykoproteine (mit definierten Glykanen und damit für Säuger geringem Antigenpotential) genutzt werden. Mit einem neuen "Huckepack"-Konstrukt, das gleichzeitig konstitutive Expression einer cDA für humane Glucocerebrosidase (hGC) in allen Geweben und GNTI-Drosselung in Knollen vermittelt, sind wir auf dem Weg, ein erstes humankompatibles Glykoprotein aus Kartoffel zu gewinnen. Mit Versuchen zur Anreicherung aus Blatt- und Knollengewebe der transgenen Pflanzen sowie einer vergleichenden Charakterisierung des Glykoproteins soll baldmöglichst begonnen werden. Erste Hinweise, daß "komplex"-modifizierte Glykoproteine eine Rolle bei der Zell/Zell-Erkennung spielen, wurden bereits im vorletzten Antragszeitraum durch gezielte Pilz-Infektionen an GnTI-defizienten Arabidopsis cglMutanten erhalten. Pflanze/Pathogen-Interaktionen sollen daher künftig verstärkt untersucht werden.
Im letzten Antragszeitraum haben wir mit Hilfe von unteriedlichen GnTI/GFP-Fusionen wichtige Signale für Golgi-Lokalisierung [1,2] in Pflanzen ermittelt.我们可以选择“反义”标记,也可以选择在Kartoplasty和Tabak中的Drosselung标记,也可以使用CaMV 35 S-Promotor在“复合”Glykan-Muster von jungen(schwach reduziert)中的梯度进行阿尔滕的完全还原(stark reduziert)。Damit können Kulturpflanzen prinzipiell für die Herstellung therapeutischer Glykoproteine(mit definierten Glykanen und damit für Säuger geringem Antigenpotential)genutzt韦尔登。通过一个新的“Huckepack”-结构,我们可以在艾伦的胃和GNTI-Drosselung中快速组成性表达一种人源性葡糖脑苷脂酶(hGC)的cDA,这是一种来自Kartoenzu的人类相容性糖蛋白。通过对转基因Pflanzen的Blatt-和Knolesweebe的分析,我们发现韦尔登中糖蛋白的特性是非常明显的。首先,Hinweise,在策尔/策尔-Erkennung spielen的作用下,将“复合”-修饰的糖蛋白引入到拟南芥中,通过诱导Pilz-感染和GnTI-抗性突变,获得了较好的结果。Pflanze/Pathogen-Interaktionen sollen daher künftig verstärkt untersucht韦尔登.

项目成果

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