Reg蛋白-Reg蛋白受容体系の消化器癌における発現と癌細胞の増殖・浸潤への関与

Reg蛋白-Reg蛋白受体系统在胃肠道肿瘤中的表达及参与癌细胞增殖和侵袭的研究

• 批准号: 02J10346
• 负责人: 小野川 徹
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J10346/
• 关键词: REG遺伝子; REG蛋白; REG蛋白受容体; 消化器癌; REG蛋白質; REG蛋白質受容体

東北大学附属医用細胞資源センターで維持している消化器を含む各臓器由来の培養癌細胞株49種よりtotal RNA及び蛋白質を抽出し、Northern blot法、Western blot法、免疫染色法を施行し、REG遺伝子、REG蛋白及びREG蛋白受容体の発現の有無を定性的に検討したところ、大腸癌由来のSW948,SW1417,COL0205,HCT15、胃癌由来のKATO III, MKN28(MKN74),AGS、食道癌由来のTE8,TE12,TE13などにREG遺伝子、REG蛋白及びREG蛋白受容体が発現していることを見出した。さらに、REG遺伝子の発現をRT-PCR法で検討する過程で、新たなヒトREG遺伝子REG IIIを見出し、その遺伝子とmRNAの全構造、染色体上の位置、組織別発現パターンを明らかにし、ヒトREG遺伝子ファミリーが全体で5つの遺伝子、REG I alpha, REG I beta, REG III, HIP/PAP, REG IVから構成されることを明らかにした。次に、ヒト肝臓癌・膵癌・胆道癌・胃癌・大腸癌等の消化器癌標本において、各種癌組織でのREG遺伝子、REG蛋白及びREG蛋白受容体の発現の有無を定性的に検討し、さらにrealtime Taqman RT-PCR法によりその発現の定量化を行う目的で、東北大学倫理委員会の承認を受け(承認番号2001-002)、東北大学病院肝胆膵外科・胃腸外科で同意書の得られた肝臓癌・膵癌・胆道癌・胃癌・大腸癌症例をそれぞれ約100症例収集し、この全検体よりtotal RNAの抽出及び組織切片の作成を終了した。また、臨床病理学的項目とREG遺伝子、REG蛋白及びREG蛋白受容体の発現の有無・発現量の結果との相関関係を検討する目的で、現在までに入手し得た各臨床検体について、組織型、腫瘍マーカー、進展度、脈管浸襲、リンパ節転移、再発形式、予後に関しての詳細なデータベースが完成した。さらにヒトREG遺伝子ファミリーが全体で5つの遺伝子、REG I alpha、REG I beta、REG III、HIP/PAP、REG IVから構成されるという知見に基づき、5つのREG蛋白質を識別する特異的アミノ酸配列を解析・含成し、各REG蛋白質ごとにモノクロナール抗体を作製した。得られた18クローンのモノクロナール抗体はWestern blot法で各REG蛋白質を特異的に認識することが確かめられた。

49 kinds of cultured cancer cell lines containing digestive organs, total RNA and protein extraction, Northern blot, Western blot, immunostaining, identification of REG gene, REG protein and REG protein receptor, origin of colorectal cancer SW948, SW1417,COL0205,HCT15, origin of gastric cancer KATO III MKN28 (MKN74),AGS, TE8, TE12, TE13, REG gene, REG protein and REG protein receptor were found in esophageal cancer. In addition, REG gene expression was investigated by RT-PCR. The new REG gene REG III was identified. The complete structure of REG gene mRNA, the position of REG gene on chromosome, the tissue type of REG gene expression, REG gene expression, REG alpha, REG beta, REG III, HIP/PAP, REG IV were identified. The aim of this study was to identify the presence or absence of REG gene, REG protein and REG protein receptor in various cancer tissues, including liver cancer, biliary tract cancer, gastric cancer and colorectal cancer, and to quantify the presence of REG protein and REG protein receptor by realtime Taqman RT-PCR.(Admission No. 2001-002), Department of Hepatobiliary and Gastrointestinal Surgery, Tohoku University Hospital, and the Department of Gastroenterology, Department of Hepatobiliary and Gastrointestinal Surgery, Tohoku University Hospital. About 100 cases of liver cancer, biliary tract cancer, gastric cancer, and colorectal cancer were collected. Total RNA extraction and tissue section preparation were completed. To investigate the correlation between the results of clinical pathology and the presence or absence of REG gene, REG protein, and REG protein receptor, we have now completed the detailed analysis of each clinical specimen, tissue type, tumor type, degree of progression, vascular invasion, node shift, pattern of recurrence, and future relevance. The REG protein is identified from all 5 REG proteins, REG I alpha, REG I beta, REG III, HIP/PAP, REG IV, and the composition of the REG protein is identified from all 5 REG proteins. Specific acid alignment analysis, composition, and antibody production for each REG protein are performed. Western blot was used to identify REG proteins.

项目成果

鈴木正徳, 海野倫明, 片寄 友, 竹内丙午, 小野川徹, 大塚英郎, 及川昌也, 松野正紀: "組織接着閉鎖剤の種類と特徴"Surgery Frontier. 8(4). 100-104 (2002)

Masanori Suzuki、Michiaki Unno、Tomo Katayose、Heigo Takeuchi、Toru Onokawa、Hideo Otsuka、Masaya Oikawa、Masanori Matsuno：“组织粘合剂闭合剂的类型和特征”Surgery Frontier 8(4) (2002)。

PDZ binding motif-dependent localization of K+ channel on the basolateral side in distal tubules

• DOI: 10.1152/ajprenal.00203.2004
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-RENAL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.2
• 作者: Tanemoto, M;Abe, T;Ito, S
• 通讯作者: Ito, S

Okamoto H, Unno M, Nata K, Noguchi N, Akiyama T, Nausheen JS, Ikeda T, Kawaguchi S, Yamauchi A, Onogawa T, Takasawa S: "Beta-cell regeneration by Reg protein : Experiments with Reg knockout and transgenic mice"Diabetologia. (in press). (2003)

Okamoto H、Unno M、Nata K、Noguchi N、Akiyama T、Nausheen JS、Ikeda T、Kawaguchi S、Yamauchi A、Onokawa T、Takasawa S：“Reg 蛋白的 Beta 细胞再生：Reg 敲除和转基因小鼠实验”

岡本 宏, 那谷耕司, 野口直哉, 秋山貴子, Nausheen J.Shervani, 池田崇之, 川口晶子, 山内晶世, 小野川徹, 中沢 徹, 高沢 伸: "膵臓β細胞の死から再生へ:Reg-Reg受容体情報伝達系による再生医学"糖尿病. 46(in press). (2003)

Hiroshi Okamoto、Koji Natani、Naoya Noguchi、Takako Akiyama、Nausheen J.Shervani、Takayuki Ikeda、Akiko Kawaguchi、Akiyo Yamauchi、Toru Onokawa、Toru Nakazawa、Shin Takazawa：“胰腺 β 细胞从死亡到再生：Reg-Reg 受体再生使用信息传输系统进行医学”糖尿病。46（印刷中）。（2003）

海野倫明, 藤原 耕, 佐藤武陽, 大塚英郎, 安達尚宣, 近藤典子, 小野川徹, 鈴木正徳, 松野正紀: "胆汁酸の腸管循環を担う有機アニオントランスポーターの発現と機能"消化と吸収. 24(1). 52-57 (2002)

Michiaki Unno、Kou Fujiwara、Takeyo Sato、Hideo Otsuka、Naonori Adachi、Noriko Kondo、Toru Onokawa、Masanori Suzuki、Masanori Matsuno：“负责胆汁酸肠道循环的有机阴离子转运蛋白的表达和功能”24（1）。 ）52-57（2002）。