ビタミンEの大量摂取に対する恒常性維持機構の解明

阐明大量摄入维生素E的体内平衡维持机制

• 批准号: 13760093
• 负责人: 竹中 麻子
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760093/
• 关键词: ビタミンE; α-トコフェロール; α-トコフェロール輸送タンパク質; α-TTP; 初代培養肝細胞; α-tocopherol; a-トコフェロール輸送タンパク質; a-TTP

生体内の最も重要な抗酸化物質の一つであるα-トコフェロールの血中や諸組織への供給量は、肝臓に存在するα-トコフェロール輸送タンパク質(α-TTP)量によって規定されると考えられている。本研究ではα-TTP合成量の変動要因を解明することを最終目的として、まずα-トコフェロールの過剰摂取に応答したα-TTP合成量の変動について解析を行った。ラット初代培養肝細胞の培地に0-20mg/Lのα、δ、γ-トコフェロールを添加して0-24時間培養後のα-TTP mRNA量およびタンパク量の測定を行った。その結果、培地中のトコフェロール濃度の変化に応答したα-TTP合成量の変化は観察できず、細胞内外のトコフェロール濃度はα-TTP合成量の直接の制御要因ではないと考えられた。次に、血中、組織中α-トコフェロール濃度の変化を生じるさまざまな病態あるいは栄養欠乏動物における肝臓α-TTP mRNA量、タンパク量を解析した。その結果、ストレプトゾトシン(STZ)誘発糖尿病動物において、α-TTP量が大幅に減少することが示された。そこで次に、ラット初代培養肝細胞を用いて、糖尿病時にα-TTP量の減少をひき起こす要因について検討を行った。その結果、培地へのインスリン添加濃度が10^<-8>Mから10^<-10>Mに低下すると、初代培養肝細胞中のα-TTP量が減少した。STZ誘発糖尿病動物では、膵臓β細胞の損傷により血中インスリン濃度が検出限界以下まで低下していることと合わせて考えると、このインスリン濃度の低下が肝臓α-TTP量の減少をひき起こす要因である可能性が示された。糖尿病動物や低インスリン状態の肝細胞におけるα-TTP量の減少はα-TTP mRNA量の減少を伴っておらず、翻訳以降の段階で生じるものと考えられた。また、インスリン濃度の減少に応答したα-TTP量の減少には12時間必要であった。細胞にシクロヘキシミドを添加して新たなタンパク合成を停止させ、α-TTPの半減期を解析したところ、インスリン無添加の培養条件では、インスリン添加時に比べてα-TTPの半減期が減少しているという結果が得られた。本研究の結果から、肝臓におけるα-TTP量は生理的濃度のインスリンの存在により安定化されており、低インスリン状態の継続によりα-TTP量の減少がひき起こされる可能性が強く示された。

One of the most important anti-acidification substances in the body is the amount of α-TTP supplied to the blood and tissues and the amount of α-TTP transported to the liver. The purpose of this study is to clarify the main causes of α-TTP synthesis and analyze the changes in α-TTP synthesis.α, δ, γ-TTP mRNA levels in primary cultured hepatocytes were measured after 0-20mg/L of α, δ, γ-TTP mRNA was added and cultured for 0-24 hours. The results showed that the concentration of α-TTP in culture medium changed, and the concentration of α-TTP in culture medium changed, and the concentration of α-TTP in culture medium changed, and the synthesis amount of α-TTP changed directly. In addition, changes in α-TTP mRNA concentrations in blood and tissues can cause pathological changes, and the amount of α-TTP mRNA and protein in the liver of undernourished animals can be analyzed. The results showed that STZ induced diabetes in animals, and the amount of α-TTP was significantly reduced. This is the first time that primary cultured hepatocytes have been used, and the reduction of α-TTP in diabetes mellitus has been discussed. As a result, the concentration of culture medium decreased from 10^<-8>M to 10^<-10>M, and the amount of α-TTP in primary cultured hepatocytes decreased. The possibility that STZ induces damage to beta cells in diabetic animals, decreases serum concentrations below detection limits, and decreases liver alpha-TTP levels is shown. The decrease of α-TTP mRNA in liver cells of diabetic animals was accompanied by a decrease in α-TTP mRNA level, a decrease in α-TTP mRNA level and a decrease in α-TTP mRNA level. The decrease in α-TTP concentration was necessary for 12 days. The half-life of α-TTP was reduced when the cell was added to the culture medium. The results of this study strongly suggest that the presence of α-TTP in liver tissues at physiological concentrations, the stabilization of α-TTP in liver tissues, and the reduction of α-TTP in liver tissues at low concentrations are possible.