カルネキシン/カルレティキュリンのシャペロン分子機構と細胞分化における意義の解明

阐明钙联蛋白/钙网蛋白的伴侣分子机制及其在细胞分化中的意义

• 批准号: 13770070
• 负责人: 井原 義人
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770070/
• 关键词: カルレティキュリン; シャペロン; レクチン; 糖タンパク質; アポトーシス; カルシウム; カルネキシン

カルネキシンとカルレティキュリン(CRT)はERに存在するCa2+結合性の分子シャペロンである。特にCRTはこれまでの報告から、分子シャペロン機能のみならず、遺伝子発現制御や細胞接着、細胞死などの分子機構にも関与することが明らかとなり、多機能分子としての役割が注目されている。平成14年度はCRTのCa2+代謝と細胞分化における新しい生理機能とその分子機構について、CRT遺伝子の導入を行った培養細胞系を用いた細胞分化モデルの解析を行った。カルレティキュリン高発現心筋芽細胞株を用いた細胞分化モデルの解析心筋細胞分化のモデルとして知られるラット心筋芽細胞株H9C2にマウスCRT遺伝子発現ベクターを導入し、CRT高発現細胞クローンを樹立した。これらのクローンを用いて、CRT高発現が心筋細胞分化を阻害し、細胞のアポトーシスを促進することを見いだした。CRT発現がどのような分子機構で細胞のアポトーシスを制御しているのかを解析した結果、以下のことが明らかとなった。1)CRT高発現細胞では、細胞生存シグナルであるPKB/Aktシグナルの分化条件下での抑制が観察された。2)CRT高発現細胞では、PKB/Aktを脱リン酸化するPP2Aの発現誘導が見られた。3)CRT高発現細胞では分化誘導条件下での細胞内遊離カルシウム濃度の上昇が見られた。一方、同様に細胞内遊離カルシウム濃度を上昇させるThapsigarginにより、PP2Aの転写レベルでの誘導が見られた。上記の結果から、CRT高発現細胞では細胞内カルシウム代謝が影響を受けることにより、細胞内遊離カルシウム濃度の上昇に伴うPP2A遺伝子の発現誘導が起こり、それによるPKB/Aktシグナルの抑制という分子機構によって、分化誘導条件下でアポトーシスが促進されるのではないかと考えられた。

There are するCa2+ binding <s:1> molecules シャペロ である である ネキシ とカ とカ レティキュリ レティキュリ (CRT) する ERに. Special に CRT は こ れ ま で の report か ら, molecular シ ャ ペ ロ ン function の み な ら ず, but 伝 発 suppression now then や cell, die な ど の molecular institutions に も masato and す る こ と が Ming ら か と な り, more functional molecular と し て cut が の service attention さ れ て い る. Pp.47-53 14 year は CRT の Ca2 + metabolism と cell differentiation に お け る new し い physiology と そ の molecular institutions に つ い て, CRT but 伝 の import line を っ た を culture cell line with い た cell differentiation モ デ ル の parsing line を っ た. カ ル レ テ ィ キ ュ リ ン high 発 now heart muscle bud cell lines を use い た cell differentiation モ デ ル の parsing heart muscle cell differentiation の モ デ ル と し て know ら れ る ラ ッ ト heart muscle bud cell lines H9C2 に マ ウ ス CRT heritage 伝 son 発 now ベ ク タ ー を import し, CRT high 発 now cell ク ロ ー ン を set し た. こ れ ら の ク ロ ー ン を with い て, high CRT 発 now が heart muscle cells differentiation を resistance against し, の ア ポ ト ー シ ス を promote す る こ と を see い だ し た. CRT 発 now が ど の よ う な molecular institutions で cells の ア ポ ト ー シ ス を suppression し て い る の か を parsing し た results, the following の こ と が Ming ら か と な っ た. 1) high CRT 発 now cells で は, cell survival シ グ ナ ル で あ る PKB/Akt シ グ ナ ル の differentiation conditions で の inhibit が 観 examine さ れ た. 2)CRT high-occurrence cells で で, PKB/Aktを deacidification リ するPP2A <s:1> occurrence induction が appears られた. 3) Under the condition of で <s:1> differentiation induction in CRT high-occurrence cells, the concentration of free カ シウム シウム in で <s:1> cells <e:1> <e:1> increased が as seen in られた. One party, with others in に intracellular free カ ル シ ウ ム concentration rising を さ せ る Thapsigargin に よ り, PP2A の planning write レ ベ ル で の induced が see ら れ た. Written の results か ら, CRT high 発 now cell で は intracellular カ ル シ ウ ム metabolic が を by け る こ と に よ り, intracellular free カ ル シ ウ ム concentration rising の に with う PP2A heritage 伝 son の 発 now by inducing が こ り, そ れ に よ る PKB/Akt シ グ ナ ル の inhibit と い う molecular institutions に よ っ て, induced differentiation conditions で ア ポ ト ー シ Youdaoplaceholder0 promotes される, される, で, な, な, と to test えられた.

项目成果

T.Iida, et al.: "Hammerhead ribozyme against g-glytamylcysteine synthetase sensitizes human colonic cancer cells to cisplatin by downregulating both the glutathione synthesis and the expression of multidrug resistance proteins"Cancer Gene Therapy. 8. 803-

T.Iida 等人：“针对 g-谷氨酰半胱氨酸合成酶的锤头核酶通过下调谷胱甘肽合成和多药耐药蛋白的表达，使人结肠癌细胞对顺铂敏感”癌症基因治疗。

S.Goto, et al.: "Doxorubicin-induced DNA intercalation and scavenging by nuclear glutathione S-transferase π"FASEB J. 15. 2702-2714 (2001)

S.Goto 等人：“阿霉素诱导的 DNA 嵌入和核谷胱甘肽 S-转移酶 π 的清除”FASEB J. 15. 2702-2714 (2001)

Kondo T., et al.: "Diethylstilbestrol attenuates antioxidant activities in testis from male mice"Free Radic.Res.. 36(9). 957-966 (2002)

Kondo T. 等人：“己烯雌酚减弱雄性小鼠睾丸的抗氧化活性”Free Radic.Res.. 36(9)。

Tani M., et al.: "Hammerhead ribozyme against gamma-glutamylcysteine synthetase attenuates resistance to ionizing radiation and cisplatin in human T98G glioblastoma cells"Jpn.J.Cancer Res.. 93. 716-722 (2002)

Tani M.等人：“针对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的锤头核酶减弱了人T98G胶质母细胞瘤细胞对电离辐射和顺铂的抵抗力”Jpn.J.Cancer Res.. 93. 716-722 (2002)

Goto S., et al.: "Significance of nuclear glutathione S-transferase pai in resistance to anti-cancer drugs"Jpn.J.Cancer Res.. 93. 1047-1056 (2002)

Goto S.等人：“核谷胱甘肽S-转移酶pai在抗癌药物抗性中的意义”Jpn.J.Cancer Res..93.1047-1056(2002)