腫瘍壊死因子過剰発現モデルの心筋アポトーシスにおける一酸化窒素の役割

一氧化氮在肿瘤坏死因子过表达模型心肌细胞凋亡中的作用

• 批准号: 13770340
• 负责人: 奥山 雅基
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770340/
• 关键词: 心筋アポトーシス; ドキソルビシン; Fas; Fas ligandシステム; 酸化ストレス

Fas/Fas ligandシステムは多くの組織でアポトーシスを誘導することが報告されている。我々は心不全患者の血中可溶型Fas及び可溶型Fas ligandが増加し、可溶型Fas ligandの産生の一部は心臓由来であることを報告した。また、ラット培養心筋細胞において高濃度のFas ligandでのみアポトーシス誘導が可能であり、心筋はFas抵抗性を有していたが、ドキソルビシンを前投与することにより心筋はFasに対する感受性が増し、Fas ligandによる心筋アポトーシスは著増することも報告した。ドキソルビシン前投与後のFas ligand添加によってカスパーゼ8活性が著増することから、ドキソルビシンはFasからカスパーゼ8までのシグナル伝達に影響を与えていると考えた。今回ドキソルビシンによる心筋細胞のFasに対する感受性が増加する機序を検討した。FLICE inhibitory protein(FLIP)は内因性のカスパーゼ8阻害蛋白であり、そのFLIP蛋白はドキソルビシンにより濃度および時間依存性に低下した。N-acetylcysteine (NAC)あるいはsuperoxide dismutase (SOD)+ Catalase(CAT)を用いたところ、ドキソルビシンによるFLIP蛋白の低下は回復した。さらに、これらの抗酸化剤によりドキソルビシンによるFas感受性の増強(アポトーシス細胞の増加)は消失した。ドキソルビシンとFas ligandの投与で相乗的に増加したカスパーゼ8活性はNAC, SOD+CATによって消失した。次に、過酸化水素を前投与したところFLIPは濃度依存的に低下し、同時にFas感受性が増加した。以上より心筋細胞内のFLIP発現は酸化ストレスにより修飾され、心不全に陥った心筋では活性酸素種が増加することから、FLIP発現の低下によってFas/Fas ligandを介した心筋アポトーシスが惹起される可能性がある。

Fas/Fas ligand システムは多くのorganization でアポトーシスをinducing することがreport されている. We report on the origin of soluble Fas and soluble Fas ligand in the blood of patients with cardiac insufficiency, and the origin of soluble Fas ligand in the heart.また, ラット cultured cardiac cells において high concentration のFas ligandでのみアポトーシスinducing がpossibleであり、心sujiはFasresistantを有していたFas ligandによる心susuアポトーシスは簗することもreport した. Fas ligand adds によってカスパーゼ8 active が Increase the することから、ドキソルビシンはFasからカスパーゼ8までのシグナル伝大に Impact を and えていると卡えた. This time, the heart muscle cell's sensitivity is increased, the heart muscle cell's sensitivity is increased, and the machine sequence is increased. FLICE inhibitory protein (FLIP) is an endogenous inhibitory protein and has low concentration and time dependence. N-acetylcysteine ​​(NAC)あるいはsuperoxide dismutase (SOD)+ Catalase(CAT)を用いたところ、ドキソルビシンによるFLIP protein のlower recovery した.さらに、これらのAnti-acidification 鉤によりキソルビシンによるFas sensitivity is enhanced (アポトーシスcells are added) and disappears.ドキソルビシンとFas ligandのinvestment and でmultiplied by に嗗addしたカスパーゼ8 active はNAC, SOD+CATによってdisappear した. In this case, if overacidified hydrogen is administered before administration, FLIP will decrease concentration-dependently, and at the same time, Fas sensitivity will increase. The above-mentioned FLIP in cardiac muscle cells is acidified, modified, and insufficient. Heart muscle active acid type が increase す る こ と か ら, FLIP 発appear の low に よ っ て Fas/Fas ligandを Introductionした心丝アポトーシスがcausesされるpossibilityがある.

项目成果

Minako Yamaoka: "Apoptosis in rat cardiac myocites induced by Fas ligand : Priming for Fas-mediated apoptosis with doxorubicin"Journal of Molecular Cellular Cardiology. 32. 881-889 (2000)

Minako Yamaoka：“Fas 配体诱导的大鼠心肌细胞凋亡：用阿霉素引发 Fas 介导的细胞凋亡”分子细胞心脏病学杂志。

Seiji Yamaguchi: "Elevated circulating levels and cardiac secretion of soluble Fas ligand in patients with congestive heart failure"American Journal of Cardiology. 83. 1500-1503 (1999)

Seiji Yamaguchi：“充血性心力衰竭患者可溶性 Fas 配体的循环水平和心脏分泌升高”美国心脏病学杂志。