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テストステロンによって脳に発現誘導される性分化決定遺伝子の同定

鉴定性别分化决定基因，其表达由睾酮在大脑中诱导

基本信息

批准号：
13770633
负责人：
久下英明
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kochi Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

テストステロン処理によってラット雌新生児の脳の内側視索前野において発現誘導される遺伝子の同定を目的として、サブトラクションクローニング法によるスクリーニングを行った。テストステロン処理及び対照処理後のラット雌新生児から内側視索前野を単離し、それぞれに対応するcDNAを合成した。この2種類のcDNA産物を用いてビオチン化プライマー、ストレプトアビヂンならびにRDA法を用いたサブトラクションを行うことによって、テストステロン処理時に発現誘導されるcDNAの濃縮を行なった。ついで、上記サブトラクション後のcDNAをクローン化し、サザーンハイブリダイゼーションによるディファレンシャルスクリーニングを行い、テストステロン処理時に発現が上昇する遺伝子断片を持つクローンをさらにスクリーニングした。最終的に、in situ hybridization法を用いて、脳切片標本における各候補遺伝子の発現を検討した結果、候補遺伝子断片のうち現在のところ一種類において、雌新生児の内側視索前野におけるテストステロンによる発現誘導と無処理の雄新生児の内側視索前野における発現がみられた(2002年度分子生物学会発表)。これらの結果はラット新生児脳内側視索前野においてテストステロンによって発現誘導される特定のmRNAの存在を明らかにし、また今後、本mRNAの発現ならびにその蛋白質産物の機能解析を行うことによって、脳の性分化機構を明らかにするための一つの分子的手がかりを得たと言える。

The female newborn's inner visual cord front field is the same as the female newborn's inner visual cord front field. After the treatment, the female newborn will be separated from the female fetus and the female fetus will be synthesized. These two kinds of cDNA products were concentrated and induced by RDA method. In the middle of the process, the cDNA fragments of the gene fragments were detected when the gene fragments were processed, and the gene fragments were detected when the gene fragments were processed. Finally, in situ hybridization method was used to investigate the occurrence of each candidate gene fragment in the middle and middle sections of the tissue. The results showed that the occurrence of each candidate gene fragment in the middle and middle sections of the female neonate was induced and the occurrence of each candidate gene fragment in the middle and middle sections of the male neonate was induced (2002 report of the Society of Molecular Biology). The results show that the expression of specific mRNA in the mRNA is related to the functional analysis of protein products, and the mechanism of sexual differentiation is related to the molecular mechanism.