CD9の機能解析とアンチセンスCD9遺伝子導入による新しい胃癌遺伝子治療の研究

CD9的功能分析及反义CD9基因导入的新型胃癌基因治疗研究

• 批准号: 13770726
• 负责人: 宮城 委史
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770726/
• 关键词: CD9; アデノウイルスベクター; 胃癌; Invasion Assay; 腹膜転移モデル

CD9の発現はHB-EGF、α3β1と共に細胞-細胞間の刺激伝達に関与している。この伝達関与により細胞増殖作用を促進することより、癌の進展や転移に関与している事が示唆される。前年度の実験では、3種の胃癌細胞株MKN-1、MKN-28、MKN-45を用いてセンスおよびアンチセンスCD9アデノウイルスベクターをそれぞれ感染させCD9蛋白の発現をWestern blot法にて確認した結果、いずれの癌細胞株でも強発現が確認された。本年度はセンス・アンチセンスCD9の導入において腹腔内増殖・抑制による腹膜転移への関与についてIn vitroおよびIn vivoにおいて検討した。浸潤能に影響があるかInvasion Assayを行い検討した。non-virus群とアンチセンスCD9発現癌細胞株を比較して、浸潤細胞数に有意な変化は示さなかったことよりCD9の発現抑制が直接浸潤抑制または促進に関与しないと考えられた。さらに胃癌細胞株MKN-45よりヌードマウスの高度腹膜転移モデル(MKN-45P)を作製し、高度腹膜転移細胞株にセンスおよびアンチセンスCD9アデノウイルスベクターを感染させIn vivo実験に用いた。センスおよびアンチセンスCD9導入MKN-45Pをヌードマウス腹腔内に散布しその効果について検討した。腹腔内散布後4週後の腹膜転移結節数についてNon-virus群、CD9導入群、アンチセンスCD9導入群で比較した。有意差は認められなかったがCD9導入群はNon-virus群に比べ結節数の増加がみられ、アンチセンスCD9導入群ではNon-virus群に比べ結節数が少なかった。この結果よりアンチセンスCD9の癌細胞への導入は、CD9の細胞増殖作用を抑制し、高度腹膜転移モデルの結節数減少をもたらしたと推察する。今後、腹膜転移の治療に応用できる可能性を示唆した。

CD9 expression is related to the expression of HB-EGF, α3β1 and cell-to-cell stimulation. This is related to the promotion of cell proliferation, cancer progression and metastasis. In the past year, three gastric cancer cell lines MKN-1, MKN-28, and MKN-45 were infected with CD9 protein by Western blot. This year, the introduction of CD9 into the abdominal cavity, the inhibition of peritoneal migration, and the detection of In vitro and In vivo are discussed. Infiltration Assay Non-virus group and CD9 development cancer cell line comparison, infiltration cell number, intentional change, inhibition of CD9 development, direct invasion inhibition, promotion In addition, gastric cancer cell line MKN-45 (MKN-45P) was infected with CD9 in vivo. MKN-45P is introduced into the abdominal cavity of the patient. The number of peritoneal metastasis nodes 4 weeks after intraperitoneal dissemination was compared among Non-virus group, CD9 introduction group, and CD9 introduction group. The number of CD9-introduced Non-virus group nodes increased and the number of CD9-introduced non-virus group nodes decreased. As a result, the introduction of CD9 cells into the peritoneal cavity was inhibited, and the number of nodules in the peritoneal cavity was reduced. In the future, the possibility of peritoneal migration therapy is discussed.