肉腫組織・細胞の進展、転移における細胞外マトリックス分子の作用に関する研究

细胞外基质分子对肉瘤组织细胞进展和转移影响的研究

• 批准号: 13770790
• 负责人: 西田 佳弘
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770790/
• 关键词: ヒアルロン酸; ヒアルロン酸合成酵素; 骨肉腫; 抗腫瘍効果; 競合的・定量的RT-PCR; アンタイセンス; 脂肪肉腫; ヒアルロン酸結合タンパク; 免疫組織染色

骨肉腫細胞株におけるヒアルロン酸合成酵素の制御による抗腫瘍効果1)骨肉腫細胞株におけるヒアルロン酸合成酵素発現量解析骨肉腫細胞株MG63とHOSを単層培養し、total RNAを抽出し、3種のヒアルロン酸合成酵素(HAS-1、HAS-2、HAS-3)のmRNA発現量を競合的、定量的RT-PCRにより算出した。HOSはいずれのHASの発現量も低値を示したが、MG63においてはHAS-2の発現量が有意に多く、ヒアルロン酸合成の中心的役割を担うことが示唆された。2)MG63に対するアンタイセンスHAS-2投与によるヒアルロン酸合成の抑制アンタイセンスHAS-2はMG63に対しておよそ60%のmRNA発現抑制効果を示した。それに伴い、MG63細胞周囲および細胞内に染色されるヒアルロン酸の濃度も低下した。またヒアルロン酸発現の低下と同様に細胞周囲マトリックス形成も抑制された。3)MG-63に対するアンタイセンスHAS-2投与による抗腫瘍効果炭層培養したMG-63に対してアンタイセンスHAS-2を投与すると細胞増殖能が低下した(MTT assay)。またマトリゲルを用いたinvasion assayにおいてもアンタイセンスHAS-2投与群は細胞浸潤能が低く、HAS-2の腫瘍増殖・浸潤における重要な役割が示唆された。4)インフォームドコンセント骨肉腫患者に対して、あらかじめ研究に関して説明し、内容について理解していただいた。5)骨肉腫組織におけるHASの発現生検時、手術時採取した骨肉腫組織を液体窒素にて急速凍結し、-80℃で保管した。この組織から常法通りtotal RNAを抽出し、それぞれの骨肉腫組織で発現するHASのmRNA量を競合的・定量的RT-PCRにより解析したところ個々の骨肉腫によってHASの発現パターンが異なっており、制御するべきHASは腫瘍ごとに異なることが推測された。

Quantitative analysis of the content of acid synthesis enzymes in bone and meat cell lines MG63 HOS culture, total RNA extract, mRNA (HAS-1, HAS-2, HAS-3) was calculated by quantitative RT-PCR assay. The HOS concentration is low, the MG63 concentration is low, the HAS-2 quantity is intended to be high, and the service cutting of the acid synthesis center is instigated. 2) MG63, acid synthesis, HAS-2, acid synthesis, acid synthesis. The acidity of acidity was lower than that of MG63, the acidity of acidity was low. Because of the presence of acid, there is a low level of acid in the same cell. 3) MG-63

项目成果

Hideshi Sugiura, Mitsuru Takahashi, Hirohisa Katagiri, Yoshihiro Nishida, Hiroatsu Nakashima, Masahiro Yonekawa, Hisashi Iwata.: "Additional wide resection of malignant soft tissue tumors"Clin Orthop. 394. 201-210 (2002)

Hideshi Sugiura、Mitsuru Takahashi、Hirohisa Katagiri、Yoshihiro Nishida、Hiroatsu Nakashima、Masahiro Yonekawa、Hisashi Iwata.：“恶性软组织肿瘤的附加广泛切除”Clin Orthop。

Yoshihiro Nishida, Cheryl B Knudson, Warren Knudson.: "Extracellular matrix recovery by human articular chondrocytes after treatment of hyaluronan hexasaccharides or Streptomyces hyaluronidase"Mod. Rheum.. (In press). (2002)

Yoshihiro Nishida、Cheryl B Knudson、Warren Knudson：“透明质酸六糖或链霉菌透明质酸酶处理后人关节软骨细胞的细胞外基质恢复”Mod。

Hiroatsu Nakashima, Hirohisa Katagiri, Hideshi Sugiura, Masahiro Yonekawa, Yoshihiro Nishida, Yoshihisa Yamada: "Epithelioid sarcoma mimicking a primary osseous multifocal scapula lesion"Skeletal Rad. 31. 430-433 (2002)

Hiroatsu Nakashima、Hirohisa Katagiri、Hideshi Sugiura、Masahiro Yonekawa、Yoshihiro Nishida、Yoshihisa Yamada：“模仿原发性骨性多灶性肩胛骨病变的上皮样肉瘤”骨骼 Rad。