カルパイン/カルパスタチン系を介する骨吸収制御の機構

钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制素系统介导的骨吸收控制机制

• 批准号: 13770818
• 负责人: 鈴木 直子
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770818/
• 关键词: カルパイン; カルパスタチン; 破骨細胞; 骨吸収; NF-κB; インテグリン; アデノウィルスベクター

カルパインは細胞骨格やシグナル伝達のモジュレーターとして機能している重要なカルシウム依存性プロテアーゼであり、その生理的インヒビターであるカルパスタチンにより活性が制御されている。我々は、E64d(合成カルパイン阻害剤)が骨吸収を阻害することを見い出し、骨吸収過程におけるカルパインの役割に着目するに至った(林昌美ら第15回日本骨代謝学会発表)。破骨細胞はインテグリン(αvβ3)を介して骨表面のオステオポンチン等に接着し、形態変化や細胞骨格の再構成(波状縁の形成、アクチンリングの形成等)を伴って骨吸収を遂行する。一方、転写因子NF-κB(IκBの分解により活性化される)は、破骨細胞の分化に必須のシグナル系の一員であり、破骨細胞の生存と死をも制御している可能性があることが示されている。これらの点から、本研究は、骨吸収過程におけるカルパイン/カルパスタチン系の作用点が、インテグリンを介する情報伝達系の制御や、NF-κBの活性化(IκBの分解)の過程にあると予想し、あらたな観点から骨代謝異常の病態の理解や治療にアプローチしようとするものである。そこではじめに、骨吸収過程におけるカルパイン/カルパスタチン系の関与を、合成カルパイン阻害剤を用いたアッセイよりも直接的に証明する目的で、ヒト破骨細胞内でのカルパスタチン大量発現に着手した。分化後の破骨細胞は非増殖性であり、また高効率で細胞に導入させる必要があることから、組み換えアデノウィルスベクターを用いて、ヒト破骨細胞からクローニングしたカルパスタチン遺伝子を導入、発現させた。しかし、強制発現させたカルパスタチンが不安定化しており、破骨細胞内でのカルパスタチンによる骨吸収活性阻害効果がはっきりと認められなかった。現在、新しいコンストラクトによるカルパスタチンの安定した発現を試みている。

This is the most important part of the system. It is important to know that it is important to know how to do this. In our hospital, E64d (synthetic bone block), bone aspiration was used to prevent bone injury, and bone suction was used to cut the target (Lin Changmei returned to the Japanese Orthopaedic Society for 15 days). Osteoclast (α v β 3), bone surface, bone surface, bone surface and so on. On the one hand, the writing factor NF- κ B (I κ B), the differentiation of osteoclast cells must be related to the differentiation of osteoclast cells, and the possibility of survival and death of osteoclast cells should be shown in detail. The purpose of this study is to determine the role of bone aspiration in the process of bone aspiration, this study, bone aspiration, bone absorption, bone resorption, bone resorption, bone absorption, bone resorption, bone resorption, bone absorption, bone resorption, bone and bone. In the process of bone aspiration, the process of bone aspiration is related to the development of the system, the synthetic method is used to prevent the damage, the purpose is known directly, and the amount of DNA in the cell is detected in large quantities. After differentiation, the cells of osteoclasts were not gonadal, and the rate of infection was high. After differentiation, the cells of osteoclasts were not gonadal, and the cells of high frequency of differentiation were not gonadal, the cells of osteoclasts were not gonadal, the cells of high frequency of differentiation were not reproductive, the cells of high frequency of differentiation were not of gonadal origin, the cells of high frequency of differentiation were not of reproductive nature, and the rate of infection was high. In the first place, we need to know that there is an increase in the activity of bone resorption in the cells of the cells and the cells of the broken bone. At present, there are some problems in the development of peace and stability in the country.