新規細胞外マトリックス分解酵素阻害分子による神経膠芽腫浸潤抑制の試み

尝试使用新型细胞外基质降解酶抑制剂分子抑制胶质母细胞瘤侵袭

• 批准号: 14770707
• 负责人: 中田 光俊
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770707/
• 关键词: 神経膠芽腫; 浸潤; 細胞外マトリックス; MMP; testican

【目的】我々は近年,gliomaの浸潤に関与する細胞外マトリックス分解酵素MT1-MMP (membrane type 1-matrix metalloproteinase)に対する抑制分子を脳細胞外マトリックスTestican family(TF)内に見出した(Cancer Res 61:8896-902,2001)。本研究ではTF間の相互作用およびヒトglioma組織におけるTFの発現および局在を検討した。【方法】MT1-MMP, MMP-2とともにTFの発現ベクターおよびdeletion mutantを293T細胞に遺伝子導入し,Zymographyと免疫沈降を行った。またWound assayによりglioma細胞株に対する浸潤抑制効果を検討した。Glioma 51例につき,ABI PRISM 7700を用いmRNA発現量を計測した。またin situ hybridizationを行った。【結果】MT1-MMP阻害効果を有しないT-2は同効果を有するT-1,T-3,N-Tesと結合することによりその働きを阻害することが分かった。その結合サイトはT-1,T-3,N-Tesのextracellular calcium binding (EC) domainとT-2のunique domainであった。N-TesのEC domainを欠失した変異体(Δ122)はMT1-MMPを抑制し,かつT-2との結合を逃れた。Wound assayの結果もこれと矛盾しない所見であった。またTFの発現量はいずれもglioblastomaで有意に低く,その局在はneuronで強く,腫瘍細胞では弱かった。発現量はTFのうちT-2で最も高かった。【結論】脳組織内に比較的多量に存在するT-2はT-1,T-3,N-TesのMT1-MMP阻害能を解除することによって浸潤を促進させる。Δ122は抗浸潤治療の候補分子になり得ることが示唆された。

[Objective] Recently, we have reported that MT1-MMP (membrane type 1-matrix metalloproteinase) is an inhibitor of glioma invasion and has been identified in the extracellular Testican family(TF)(Cancer Res 61:8896- 902, 2001). In this study, the interaction between TF and glioma was discussed. [Methods] MT1-MMP, MMP-2, TF, deletion mutant, 293T cell gene transfer,Zymography, immunosedimentation. Wound assay for glioma cell lines Glioma 51 cases,ABI PRISM 7700 mRNA expression was measured. In situ hybridization. [Results] MT1-MMP resistance effect has been found in T-2 and T-1,T-3,N-Tes. T-1,T-3,N-Tes and extracellular calcium binding (EC) domain and T-2 unique domain. N-Tes and EC domain are missing and heterogeneic (Δ122) and MT1-MMP are suppressed, while T-2 is not. Wound assay results are contradictory. The amount of TF detected in the tumor is intentionally low, the tumor is strong in the neuron, and the tumor cells are weak in the tumor. The highest value of TF is TF-2. [Conclusion] There are more T-2 than T-1,T-3,N-Tes and MT1-MMP in the tissue, which can relieve the inhibition and promote the infiltration.Δ122 is a candidate molecule for anti-infiltration therapy.

项目成果

Nakada M: "The role of matrix metalloproteinase on glioma invasion"Frontiers in Bioscience. (in press).

Nakada M：“基质金属蛋白酶对神经胶质瘤侵袭的作用”生物科学前沿。

高橋友哉, 中田光俊: "グリオーマにおけるADAMTS familyの発現について"ポストシークエンス時代における脳腫瘍の研究と治療. 135-140 (2002)

Tomoya Takahashi，Mitsutoshi Nakata：“ADAMTS家族在神经胶质瘤中的表达”后序列时代的脑肿瘤研究和治疗135-140（2002）。