細胞浸潤に関わる細胞外マトリックス分解酵素の機能解析

参与细胞侵袭的细胞外基质降解酶的功能分析

• 批准号: 10163217
• 负责人: 佐藤 博
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10163217/
• 关键词: マトリックスメタロプロテアーゼ; 浸潤; MT-MMP; ゼラチナーゼA; TIMP-2

膜型マトリックスメタロプロテアーゼ(MT-MMP)はヒト癌組織に高頻度に発現し、その発現レベルは癌の浸潤性、悪性度などと相関する。現在までに4種類のMT-MMPが同定されているがなかでも最初に申請者らにより同定されたMT1-MMPが最も高頻度にヒト癌組織に発現することから癌細胞の浸潤に密接に関わっていると考えられる。MT1-MMPの酵素機能としてはゼラチナーゼA活性化能と自身の細胞外基質分解活性の2つが知られている。細胞表面におけるゼラチナーゼA活性化機構をリコンビナントMT1-MMPを用いて解析したところ、ゼラチナーゼAの細胞表面への結合は細胞表面への結合は細胞表面のMT1-MMPとTIMP-2の複合体を介して起こり、このゼラチナーゼA/MT1-MMP/TIMP-2の3者複合体中のゼラチナーゼAがフリーのMT1-MMPによりプロセスされされることを見い出した。一方、MT1-MMP発現細胞による細胞外基質分解および細胞浸潤活性を検討したところ、MT1-MMPが両活性を発揮するためには細胞表面に局在することが必須であった。したがって細胞膜貫通領域を欠失したMT1-MMP発現細胞では細胞浸潤は認められなかった。また阻害物質を用いた検討の結果、細胞浸潤にはMT1-MMPにより活性化されたゼラチナーゼAよりもむしろMT1-MMP自身の細胞外基質分解活性が重要であることが示唆された。他のMT-MMPファミリーであるMT2-MMP,MT3-MMP発現細胞では効率のよい細胞外基質分解、細胞浸潤は起こらなかった。

膜基质金属蛋白酶（MT-MMP）在人类癌组织中经常表达，其表达水平与癌症的侵袭性，恶性肿瘤等相关。迄今为止，已经确定了四种MT-MMP，并且最初是由申请人鉴定出的MT1-MMP在人类癌组织中最常表达，并且被认为与癌细胞侵袭密切相关。 MT1-MMP的两个已知酶功能是明胶酶A激活能力及其自身的细胞外基质降解活性。当明胶酶使用重组MT1-MMP分析细胞表面的激活机制时，发现明胶酶A与细胞表面的结合通过细胞表面上的MT1-MMP和TIMP-2的复合物发生，而该含量A/MMMMP/MMP/MMP-2-2-MMP-2-2-另一方面，当我们通过表达MT1-MMP的细胞研究细胞外基质降解和细胞侵袭活性时，必须将MT1-MMP定位于细胞表面以发挥两种活性。因此，在删除了跨膜区域的表达MT1-MMP的细胞中未观察到细胞浸润。此外，使用抑制剂的研究表明，MT1-MMP本身的细胞外基质降解活性对于细胞浸润而不是明胶酶A很重要，而不是由MT1-MMP激活的明胶酶A。其他MT-MMP家族MT2-MMP和MT3-MMP表达细胞，没有有效分解细胞外基质和侵袭。

项目成果

H.J. Cha et al.: "Ursolic acid-induced down-regulation of MMP-9 gene is mediated through the nuclear translocation of glucocorticoid receptor in HT1080 human fibrosarcoma cells." Oncogene. 12. 771-778 (1998)

H.J. Cha 等人：“熊果酸诱导的 MMP-9 基因下调是通过 HT1080 人纤维肉瘤细胞中糖皮质激素受体的核易位介导的。”

Y.Kadono et al.: "Transformation of epithelial MDCK cells with pp60v-src induces expression of membrane-type 1-matrix metalloproteinase and the invasiveness." 58. 2240-2244 (1998)

Y.Kadono 等人：“用 pp60v-src 转化上皮 MDCK 细胞会诱导膜型 1-基质金属蛋白酶的表达和侵袭性。”

T.Yoshizaki et al: "The expression of matrix metalloproteinase 9(92kDa type IV collagenase/gelatinase B)is enhanced by Epstein-Barr virus latent membrane protein 1." Proc.Natl.Acad.Sci.,U.S.A.,. 95. 3621-3626 (1998)

T.Yoshizaki 等人：“Epstein-Barr 病毒潜伏膜蛋白 1 增强了基质金属蛋白酶 9（92kDa IV 型胶原酶/明胶酶 B）的表达。”

Y.Kadono et al.: "Membrane type 1-matrix metalloproteinase (MT1-MMP)is involved in the formation of hepatocyte growth factor/scatter factor-induced branching tubules in Madin-Darby Canine Kidney(MDCK)epithelial cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.251. 681-

Y.Kadono 等人：“1 型膜基质金属蛋白酶 (MT1-MMP) 参与 Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 上皮细胞中肝细胞生长因子/散射因子诱导的分支小管的形成。”

K.Wada et al: "Cloning of three Caenorhabditis elegans genes potentially encoding novel matrix metalloproteinases." Gene. 211. 57-62 (1998)

K.Wada 等人：“克隆三个可能编码新型基质金属蛋白酶的秀丽隐杆线虫基因。”