細胞浸潤に関わる細胞外マトリックス分解酵素の機能解析

参与细胞侵袭的细胞外基质降解酶的功能分析

• 批准号: 11144218
• 负责人: 佐藤 博
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11144218/
• 关键词: 上皮細胞; MDCK; 管腔形成; MMP; MT1-MMP; mts1; 浸潤; 細胞外マトリックス

腎尿細管上皮由来MDCK細胞はHGF存在下コラーゲンゲル3次元培養により枝分かれした管腔を形成する。この管腔形成はマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)の阻害剤により完全に抑制されるが、ノーザンプロティングにより膜型MMP(MT1-MMP)の発現が誘導されることを見い出した。Tissue Inhibitor of MMP-1(TIMP-1)はMT1-MMP以外の全てのMMPの酵素活性を阻害するが、管腔形成は抑制しなかったことからMT1-MMPが重要な役割を果たすことが示唆された。実際にMT1-MMのアンチセンスRNAを発現させたところ管腔形成を有意に阻害した。一方、MDCK細胞のオンコジーンによるトランスフォーメイションにおいてもMT1-MMPの発現が誘導され、トランスフォーム細胞のコラーゲンゲル内での浸潤性の増殖はTIMP-1以外のMMP阻害物質で抑制されたことからMT1-MMPの重要性が示唆された。MT1-MMPと協調して浸潤性増殖に関与する遺伝子を検索する目的でMDCK細胞のトランスフォーメイション、管腔形成にともない発現誘導される遺伝子をmRNA Differential Display法にて検索したところmts1/S100A4遺伝子が同定された。mts1 anti-sense RNAの発現により細胞浸潤、管腔形成がともに抑制されたことからmts1はMT1-MMPと協調して癌浸潤のみならず形態形成にともなう浸潤性の増殖にも関与することが示唆された。

Renal tubule epithelial origin urine は MDCK cells in the presence of HGF コ ラ ー ゲ ン ゲ ル three yuan culture に よ り branch points か れ し た lumen を form す る. こ の lumen formed は マ ト リ ッ ク ス メ タ ロ プ ロ テ ア ー ゼ (MMP) の resistance against tonic に よ り に completely inhibit さ れ る が, ノ ー ザ ン プ ロ テ ィ ン グ に よ り membrane type MMPS (MT1 MMP) の 発 now が induced さ れ る こ と を see い out し た. Tissue Inhibitor of MMP - 1 (TIMP - 1) は outside の MT1 MMP - all て の MMPS の enzyme activity を resistance against す る が, lumen formed は suppression し な か っ た こ と か ら MT1 MMP - important な が "を cut fruit た す こ と が in stopping さ れ た. Be interstate に MT1 - MM の ア ン チ セ ン ス RNA を 発 now さ せ た と こ ろ lumen formed を intentionally に resistance against し た. Side, MDCK cells の オ ン コ ジ ー ン に よ る ト ラ ン ス フ ォ ー メ イ シ ョ ン に お い て も MT1 MMP - の 発 now が induced さ れ, ト ラ ン ス フ ォ ー ム cells の コ ラ ー ゲ ン ゲ ル within で の invasive の raised colonization は TIMP - 1 outside の MMPS inhibitor against substances で inhibit さ れ た こ と か ら MT1 MMP - の importance が in business Youdaoplaceholder0. MT1 MMP - と coordination し て invasive raised colonization に masato and す る posthumous son 伝 を 検 cable す る purpose で MDCK cells の ト ラ ン ス フ ォ ー メ イ シ ョ ン, lumen formed に と も な い 発 now induced さ れ る heritage 伝 son を mRNA Differential Display France にて検 Somalia たと ろ ろmts1/S100A4 伝 が same determination された. Mts1 anti - sense RNA の 発 now に よ り cell infiltration, lumen formed が と も に inhibit さ れ た こ と か ら mts1 は MT1 MMP - と coordination し て carcinoma infiltrating の み な ら ず morphogenetic に と も な う invasive の raised colonization に も masato and す る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

佐藤博: "タンパク質分解-分子機構と細胞機能"シュプリンガー・フェアラーク東京(印刷中).

Hiroshi Sato：“蛋白水解 - 分子机制和细胞功能”Springer-Verlag Tokyo（印刷中）。

Y. Kitagawa, et al.: "Expression of messenger RNAs for membrane-type 1, 2, and 3 matrix metalloproeinases in human renal cell carcinomas"Journal of Urology. 162. 905-909 (1999)

Y. Kitakawa 等人：“人肾细胞癌中膜型 1、2 和 3 型基质金属蛋白酶的信使 RNA 的表达”泌尿学杂志。

H. Takeshita, et al.: "Matrix metalloproteinase 9 is induced by Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 C-terminal activation regions 1 and 2"Journal of Virology. 73. 5548-5555 (1999)

H. Takeshita 等人：“基质金属蛋白酶 9 由 Epstein-Barr 病毒潜伏膜蛋白 1 C 末端激活区 1 和 2 诱导”《病毒学杂志》。

H. Nakamura, et al.: "Enhanced production and activation of progelatinase A mediated by membrane-type 1 matrix metalloproteinase in human papillary thyroid carcinomas"Cancer Research. 59. 467-473 (1999)

H. Nakamura 等人：“人乳头状甲状腺癌中膜型 1 基质金属蛋白酶介导的原明胶酶 A 的产生和激活增强”癌症研究。

H. Noritake, et al.: "Overexpression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1(TIMP-1) in metastatic MDCK cells transformed by v-src"Clinical an Experimental Metastasis. 17. 105-110 (1999)

H. Noritake 等人：“在 v-src 转化的转移性 MDCK 细胞中过度表达基质金属蛋白酶组织抑制剂 - 1 (TIMP-1)”临床实验转移。