RNAiを用いた植物の環境ストレス・ホルモン応答性プロテインキナーゼ遺伝子の解析
使用 RNAi 分析植物环境胁迫/激素响应蛋白激酶基因
基本信息
- 批准号:14740451
- 负责人:
- 金额:$ 2.24万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、植物ホルモンのアブシジン酸(ABA)および浸透圧ストレスにより特異的に活性化されるプロティンキナーゼ遺伝子の機能を明らかにするために、当初RNAiを用いた機能欠損的アプローチを計画した。しかしながら、近年、国際的なシロイヌナズナのゲノムリソースが急速に整備され、各遺伝子の遺伝子破壊変異体が容易に取得可能となったこと、RNAiは、1)ベクターの構築が難しい、2)明確な発現抑制を示すラインが少ない、3)発現抑制効果が後代で低下する、等幾つかの問題点があること、シグナル伝達では、注目するシグナル因子が質的に機能するか、あるいは量的に機能するかは不明であること等から、遺伝子破壊変異体を用いた解析を行なった。本年度は、前年度に明らかにされたSRK2Eの活性化に関わる背景について検討を行なった。SnRK2は、キナーゼドメインの他に特徴的な構造をもった調節ドメインはない。そこで、SRK2EのNおよびC末端を欠いたコンストラクトをシロイヌナズナT87培養細胞に導入し、その活性化における影響を検討した6SRK2Eは、ABAの他に浸透圧ストレスでも活性化されることを前年度明らかにしたが、そのC末端の318〜357アミノ酸配列を欠いたSRK2Eでは、浸透圧ストレスでは正常な活性化を示すが、ABAによる活性化が顕著に抑制された。また、ABA非感受性変異体(abi1-1,abi2-1)におけるSRK2Eの活性化を検討したところ、abi1-1においてABA依存的な活性化のみが強く抑えられた。しかしながら、浸透圧ストレス依存的な活性化は正常であった。これらの結果から、ABAおよび浸透圧ストレスによるSRK2Eの活性化はそれぞれ異なるメカニズムおよび経路により制御されることが示唆された。
This study aims to clarify the functional aspects of plant ABA and RNAi, as well as the functional aspects of RNAi. In recent years, the international community has been rapidly preparing for the development of new technologies, and it is easy to obtain new technologies from different genes. 1) It is difficult to construct new technologies, 2) It is difficult to identify new technologies, 3) It is difficult to identify new technologies, and 3) It is difficult to identify new technologies. The quality of the product is unknown. This year's SRK2E activation background was discussed in the previous year. SnRK2 has a structure that is adjustable for other features. SRK2E was introduced into cultured T87 cells and its activation was investigated. SRK2E was introduced into T87 cells and its activation was investigated. SRK2E was activated by ABA in the presence of N-terminal and C-terminal acids. SRK2E was activated by ABA in the presence of N-terminal and C-terminal acids in the presence of N-terminal and C-terminal acids. ABA activation is inhibited by the presence of ABA. ABA-insensitive variant (abi1-1,abi2-1) is the most active variant of SRK2E. The activation of the active substance depends on the saturation of the substance. The result is that ABA and SRK2E are activated in different ways.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Riichiro Yoshida, Tokunori Hobo, Kazuya Ichimura, Tsuyoshi Mizoguchi, Funmiori Takahashi, Jose Alonso, Joseph R.Ecker, Kazuo Shinozaki: "ABA-activated SnRK2 protein kinase is required for dehydration stress signaling in Arabidopsis"PLANT & CELL PHYSIOLOGY
Riichiro Yoshida、Tokunori Hobo、Kazuya Ichimura、Tsuyoshi Mizoguchi、Funmiori Takahashi、Jose Alonso、Joseph R.Ecker、Kazuo Shinozaki:“ABA 激活的 SnRK2 蛋白激酶是拟南芥脱水应激信号传导所必需的”植物
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吉田理一郎, 保浦徳昇, 篠崎一雄: "植物の環境応答と形態形成のクロストーク II.植物ホルモン応答と形態形成2.アブシジン酸応答"シュプリンガー・フェアラーク東京. 230 (2004)
Riichiro Yoshida、Noriyoshi Yasura、Kazuo Shinozaki:“环境反应与植物形态发生之间的串扰 II。植物激素反应和形态发生 2. 脱落酸反应”Springer-Verlag Tokyo 230 (2004)。
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- 影响因子:0
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Riichiro Yoshida, Tokunori Hobo, Kazuya Ishimura, Tsuyoshi Mizoguchi, Fuminori Takahashi, Jose Aronso, Joseph R.Ecker, Kazuo Shinozaki: "ABA-activated SnRK2 protein kinase is required for dehydration stress signaling in Arabidopsis"Plant cell and Physiolo
Riichiro Yoshida、Tokunori Hobo、Kazuya Ishimura、Tsuyoshi Mizoguchi、Fuminori Takahashi、Jose Aronso、Joseph R.Ecker、Kazuo Shinozaki:“ABA 激活的 SnRK2 蛋白激酶是拟南芥脱水应激信号传导所必需的”植物细胞和生理学
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