酵母のシグナル伝達系を利用したMAPキナーゼ阻害剤単離とMAPキナーゼの機能解明

使用酵母信号转导系统分离 MAP 激酶抑制剂并阐明 MAP 激酶功能

• 批准号: 09780583
• 负责人: 中村 太郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780583/
• 关键词: MAPキナーゼ; 酵母; スクリーニング

昨年度構築したスクリーニング系を用いて今年度は実際にスクリーニングを開始した。スクリーニングに用いたサンプルはカビ及び放線菌由来の粗培養抽出液であり、それぞれ、1137、1188種類、合計2325種類を2つのスクリーニング系(α-factorによる増殖停止を利用した系。CRV4遺伝子とMAPキナーゼカスケードの合成致死性を利用した系)に用いた。α-factorを利用した系は1次スクリーニングからポジティブな物は得られなかった。crv4変異株を利用した物は野生株よりcrv4変異株の方により強く作用するサンプルが3種類得られた。次にこれらのサンプルがどこに作用するかを遺伝学的手法を使って調べた。まず、crv4変異株にMAPキナーゼカスケードの構成因子を活性化させたもの(MAPKKKホモログのBCK1優性活性化型変異、MAPKホモログの多コピー型)を導入して薬剤の感受性が抑圧されるかを調べた。しかしながらいずれの場合にも薬剤感受性は抑圧されなかった。この結果は用いたサンプルの作用点がMAPKよりも下流かMAPキナーゼカスケードとは別のCRV4関連情報伝達系に起こっていることを示唆している。よって残念ながら今回のスクリーニングでは目的とする薬剤の取得には成功できなかった。今後は(1)スクリーニングのサンプル数をもっと(10倍以上)増やすこと(2)一回のスクリーニングにかけるサンプル量をもっと増やすこと(今回のサンプルの多くは抗菌活性をしめさなかったため)などによって、目的とする薬剤のスクリーニングを続けていきたいと思っている。

Last year's construction of the new system was completed. This year's new system was launched. The crude culture extract from which the actinomycetes originated was classified into 1137 and 1188 species, totaling 2325 species. CRV4 gene MAPα-factor is used in the first place. crv4 heterosis plants are used to grow wild plants, crv4 heterosis plants are used to The next step is to make sure that you have a good understanding of how to do this. The component factors of MAPK, MAPK, In the case of a child, the sensitivity of the child is reduced. The result is that the action point of the target group is MAPK, MAP and CRV4 related information. The goal of the project is to achieve success. In the future,(1) the number of drops in the first round of the game will increase by more than 10 times.(2) the number of drops in the first round of the game will increase.(3) the number of drops in the game will increase.(4) the number of drops in the game will increase.(5) the number of drops in the game will increase.(6) the number of drops in the game will increase.(7) the number of drops in the game will increase.(8) the number of drops in the game will increase.

项目成果

Nakamura T.Ohmoto T.Hirata D Tsuchiya E.Miyakawa T: "Yeast Crv4/T+p1,a predicted type II membrane protein,is involued in an event important for growth,functionally overlapping with the event regulated by calcineurin-and Mpk1-mediated pathways" Molecular a

Nakamura T.Ohmoto T.Hirata D Tsuchiya E.Miyakawa T：“酵母 Crv4/T p1，一种预测的 II 型膜蛋白，参与对生长重要的事件，与钙调神经磷酸酶和 Mpk1 介导的事件功能重叠。