RAにおける生物製剤の臨床応用を目指した創薬開発

针对 RA 生物制剂临床应用的药物发现和开发

• 批准号: 15390454
• 负责人: 松野 博明
• 金额: $ 8.19万
• 依托单位: Toin University of Yokohama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15390454/
• 关键词: 関節リウマチ; インターロイキン-18; 単球; T-リンパ球; インターロイキン-1β; Tumor Necrosis Factor; 抗カルパスタチン抗体; カルパイン; SCIDマウス; dentin; ピットホール; 破骨細胞

1 滑膜Tリンパ球と単球との接着による活性化に対するIL-18の影響我々は、RA滑膜組織中のTリンパ球と単球の接着による活性化に対するIL-18の影響を検討した。その結果、IL-18は、単球からの用量依存性のIL-1β、TNFα産生増大効果を示した。Phytohemagglutinin(PHA)刺激されたT細胞と単球のco-culture系において、核内NFκB、リン酸化IkBそしてPI-3 kinaseは増加しており、IL-18刺激によりさらに増大した。また、NFκBおよびPI-3kinaseの阻害剤の添加によりIL-18の産生は抑制された。以上の結果より、IL-18は、NFκBやPI-3-kinaseの活性化を介してRA滑膜組織のTリンパ球と単球の接着による活性化をさらに増大させる事が明らかとなった。また、IL-18は単球上のTNFαレセプター、 VCAM-1、ICAM-1の発現も増大させた。2 新規(高特異性、高感度)抗カルパスタチン抗体測定法の開発カルパスタチンは、関節破壊酵素であるカルパインの生体内抑制因子でカルパイン活性を調整している。RAにおける抗カルパスタチン抗体の測定は既に他の研究者によって行われているが操作性および特異度(50%程度)に問題があった。我々は、抗原として赤血球由来のカルパインを使用したELISA法を開発し、患者の抗体を測定した。その結果、RA患者血清中IgG型抗カルパスタチン抗体の陽性率は82.8%であったが、他の疾患では以下の通りであった。OA8.3%、SLE5.6%、強皮症0%、MTCD O%、シューグレン症候群20%。以上の結果から、抗カルパスタチン抗体はRAの診断に有用であることが明らかとなった。

1. To investigate the effect of IL-18 on the adhesion of synovial T cells and T cells in RA synovial tissue. The results showed that IL-18 increased production of IL-1β and TNFα in dose-dependent manner. Phytohemagglutinin(PHA) stimulated T cell co-culture system, increased nuclear NFκB, IL-3 kinase and IL-18 stimulated T cell co-culture system. The addition of inhibitors to NFκB and PI-3kinase inhibits IL-18 production. These results suggest that IL-18, NFκB and PI-3-kinase activation in RA synovial tissue may be related to the increase of IL-18 activity in synovial tissue. The development of TNFα, VCAM-1 and ICAM-1 in IL-18 cells increased. 2. New regulation (high specificity, high sensitivity) of the development of anti-kryptonemia antibody assay, regulation of the activity of the in vivo inhibitor of arthrolysin. The determination of anti-RA antibodies was conducted by other researchers with operability and specificity (50%). We use ELISA to develop and detect antibodies from patients. The results showed that the positive rate of IgG type anti-RA antibody in RA patients was 82.8%. OA 8.3%, SLE 5.6%, scleroderma 0%, MTCD 0%, SCDS 20%. The above results show that anti-RA antibodies are useful in the diagnosis of RA.

项目成果

High diagnostic value of anticalpastatin autoantibodies in rheumatoid arthritis detected by ELISA using human erythrocyte calpastain as antigen.

以人红细胞钙蛋白酶抑制剂为抗原，ELISA法检测抗钙蛋白酶抑制剂自身抗体对类风湿性关节炎具有较高的诊断价值。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J. Rheumatol. 31(1)
• 作者: Iwaki-Egawa S;Matsuno H;Yudoh K;Nakazawa F;Miyazaki K;Ochiai A;Hirohata S;Shimizu M;Watanabe Y
• 通讯作者: Watanabe Y

Ogawa Y, Ohtsuki M, Uzuki M, Sawai T, Onozawa Y, Nakayama J, Yonemura A, Kimura T, Matsuno H: "Suppression of osteoclastogenesis in rheumatoid arthritis by induction of apoptosis in activated CD4+ T cells"Arthritis Rheumatism. 48・12. 3350-3358 (2003)

Okawa Y、Ohtsuki M、Uzuki M、Sawai T、Onozawa Y、Nakayama J、Yonemura A、Kimura T、Matsuno H：“通过诱导活化的 CD4+ T 细胞凋亡来抑制类风湿关节炎中的破骨细胞生成”关节炎风湿病。 .3350-3358 (2003)

Interleukin-18 Enhances Monocyte Tumor Necrosis Factor α and Interleukin-1 β Production Induced by Direct Contact With T Lymphocytes

Interleukin-18 增强与 T 淋巴细胞直接接触诱导的单核细胞肿瘤坏死因子 α 和 Interleukin-1 β 的产生

• 发表时间: 2004
• 期刊: Arthritis Rheum. 50(2)
• 作者: Sheng-Ming Dai;Matsuno H;Nakamura H;Nishioka K;Yudoh K
• 通讯作者: Yudoh K